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24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群的检测及遗传学分析

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24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群的检测及遗传学分析 · 394· 』!!!!!!!!竺!!!堡型旦!里!!!!!gz:』尘!!!!!∑!!!!塑!1 24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群 的检测及遗传学分析 曾美秀1 谢晓宝1 王志林1 邱国强1 曹祥山1 邹昭玲1 [摘要] 目的:分析多发性骨髓瘤(MM)患者外周血Thl、Th2细胞数量和比例及骨髓细胞分子遗传学变 化,探讨其相关关系及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测分析24例MM患者外周静脉血Thl、Th2细胞 的比例并采用荧光原化杂交技术(FISH)对其骨髓细胞13q14缺失、p53缺失、IgH易位重排...
24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群的检测及遗传学分析
· 394· 』!!!!!!!!竺!!!堡型旦!里!!!!!gz:』尘!!!!!∑!!!!塑!1 24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群 的及遗传学分析 曾美秀1 谢晓宝1 王志林1 邱国强1 曹祥山1 邹昭玲1 [摘要] 目的:分析多发性骨髓瘤(MM)患者外周血Thl、Th2细胞数量和比例及骨髓细胞分子遗传学变 化,探讨其相关关系及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测分析24例MM患者外周静脉血Thl、Th2细胞 的比例并采用荧光原化杂交技术(FISH)对其骨髓细胞13q14缺失、p53缺失、IgH易位重排进行检测。结果:① Ⅲ期MM患者Thl细胞比例较对照组显著降低,Ⅱ、Ⅲ期MM患者Th2细胞比例较对照组及I期降低.Ⅲ期 MM患者Thl/Th2比值较对照组、I及Ⅱ期增高(P说明书
进行DNA变性、 杂交、洗涤、复染,荧光显微镜观察结果。GPL D13S319探针在正常问期细胞中表现为2个红色 信号(2R),只有1个红色信号时(1R)判断为陬j性。 GPLRBl探针及(;PLP53探针在正常间期细胞中 分别表现为2个绿色信号(2G),只有1个绿色信号 时(1G)判断为阳性。GPI。IGH断裂苇排探针在正 常问期细胞中表现为2个黄色融合信号(2F),出现 相互分离的红色信号、绿色信号和1个黄色融合信 号(1R1GIF)时判断为阳性(图l~4)。分析每例正 常对照标本的200个问期细胞,计算出阳性信号的 百分率及其均值(z)和标准差(s),以阳性细胞数> ;+35作为标准。分析每例MM患者标本的100 个问期细胞,计算阳性信号的百分率。超过标准者 判定为阳性。 1.3统计学处理 所有数据均由SPSSll.5forWindows统计软 件完成。T辅助细胞亚群分析采J1j独立t检验、一 元方差分析完成。Thl/Th2比值与132一MG栩关性 比较采』fjSpearm相关分析。del(13q14,、p53缺失 和lgH基因重排阿1性率与Durie-Salmon分期的相 关性用Fisher精确概率法统计。P<0.05为差异 有统计学意义。 2结果 2.1不同临床分期MM患者Th哑群的变化 Ⅲ期MM患者7Fhl细胞较对照组显著降低, n、11l期MM患者Th2细胞比例较对照射l及l期 降低。ⅡI期MM患者Thl/Th2比值较对照组、I 及Ⅱ期增高(P<0.05或P<0.01)。见表1。 2.2 FISH检验结果及与临床分期的关系 24例MM患者均采川含I)13S319、RBl、IGH、 图1 探针GP!。RBI对13q14进行间期FISll检测图仅出现1个绿色信号时(1G)表示13ql4缺失;图2 探针GPI—IGH 对14q32进行间期FIStl检测图出现黄红绿3个信号表示发生了IGH基因重排;图3探针GPL!)13S319对13q14进行 间期FISH检测图仅出现1个红色信号时(1R)表示13q14缺失;图4探针GPLP53对17p13进行间期FISH检测图仅 出现1个绿色信号时(1G)表示17P13缺失 万方数据 ·396· 表1不同临床MM患者和对照组T辅助细胞亚群的 表达水平 ;士s 与对照组比较,1’P<0.05,2’P<0.01;与l期比较, ”P<0.05,”P<0.01;与Ⅱ期比较,”P<0.05 P53探针进行检测,结果检出9例13q14缺失,其 中5例D13S319阳性(20。83%),6例RBl阳性 (25.00%),8例IGH重排(33.33%),3例P53缺 失(12.50%)。其中有1例同时检出13、14、17号 染色体异常,1例同时检出13、17号染色体异常。 del(13q14)、14q32易位重排及del(17p13)阳性率 在DS分期之间无相关性(P>0.05)。见表2。 表2 DS分期与del(13q14)、del(17p13J及14q32易 位重排的关系 例 临床分期例数del(17p13)del(13q14)14q32易位重排 2.3FISH预后风险分组与Thl/Th2的关系 以是否存在del(13q14)和(或)del(17p13)把病 例组按预后风险分组为高危组和标危组2组∞3,分 析比较发现高危组MM患者Thl及Th2细胞均较 标危组明显降低,Thl/Th2比值较之升高(P< 0.05或P<0.01)。见表3。 表3 Thl/Th2在FISH预后风险分组的表达分析 Z工5 与标危组比较,”P提示
MM患者del(17p13)可能与 其髓外进展及不良预后有关。 另外参照文献(33,我们将MM病例组按是否 1 1 6 l 1 7; 5 4”期期期IⅡⅢ 万方数据 临床血液学杂志2010年7月第2呈卷躯7舅 存在del(13q14)和(或)del(17p13)分为高危组和标 危组,分析比较发现前者Thl及Th2细胞均较后 者显著降低,而Thl/Th2比值升高,提示高危组 MM患者免疫缺陷更为严重,预后亦更差。 参考文献 [1]张之南。沈悌.血液病诊断及疗效标准[M].2版.北 京:科学出版社,1998:373—380. [2]薛永权.白血病细胞遗传学及图谱[M].天津:天津科 学技术出版社,2003:86~99. [3]DlsPENZIERlA,RAJKUMARSV,GERTZMA. Treatmentofnewlydiagnosedmultiplemyelomabased onMayoStratificationofMyelomaandRisk—adapted Therapy(mSMART):consensusstatement[J].Mayo ClinProc。2007,82:323—341. [4]OGAWARAH.HANDAH,YAMAZAKIT,eta1. HighThl/Th2ratioinpatientswithmultiplemyelo— ma[J].LeukRes,2005,29:135—140. [5]SHAUGHNESSYJJ R,TIARAE,SAwYERJ,et a1.Prognosticimpactofcytogeneticandinterphase fluorescenceinsituhybridizationdefinedchromoseme 13deletioninmultiplemyeloma:earlyresultsoftotal therapyll[J].BrJ Haematol,2003,120:44~52. [6]zoJERN,KONIGSKERGR,ACKERMANNJ,eta1. Deletionof13q14remainsanindependentadverse prognosticvariableinmultiplemyelomadespiteits frequentdetectionbyinterphasefluorescencesituhyb一 · 397· ddizafion[J1.Blood,2000。95:1925~1930. [73刘淑艳。李建勇,陈丽娟。等.多发性骨髓瘤分子细胞 遗传学异常的研究[J].中华血液学杂志。2007,28 (4):223~226. [83TERPOSE,ELEuTHERAKI孓PAPAIAKOVOUv。 DIMOPOULOSMA.Clinicalimplicationsofchromo— somalabnormalitiesinmultiplemyeloma[J].Leuk Lymphoma,2006。47:803—814. [9]FONSECAR,BLOODE。RUEM.eta1.Clinicaland biologicimplicationsofrecurrentgenomicaberrations inmyeloma[J].Blood,2003,101:4569—4575. [10]CHANGH,SI,(JANS,LID,eta1.Multiplemyeloma involvingcentralnervoussystem:highfrequencyof chromosome17p13.1(p53)deletions[J].BrJ Haernatoi,2004,127:280—284. [11]CHANGH,YEUNGJ.QIC,eta1.Aberrantnuclear p53proteinexpressiondetectedbyimmunohistochem— istryisassociatedwithhemizygousp53deletionand ·poorsurvivalformultiplemyeloma[J].BrJ Hematol, 2007,138:324—329. [12]SHETHN,YEUNGJ,CHANGH.p53nuclearaccu— mulationisassociatedwithextramedullaryprogression ofmultiplemyeloma[J].LeukRes,2009,33:1357— 1360. (收稿日期:2009—10—27) (上接第393页) [33JAFFEES,HARRISNL.STEINH,eta1.World healthorganizationclassificationoftumors:pathology andgeneticsoftumoursofhematopoieticandlymph— oldtissues[M].Lyon,France:IARCPress,2001:189 —237. [43CHESONBD,HORNINGSJ。COIFFIERB,eta1. Reportofaninternationalworkshoptostandardizere— sponsecriteriafornon—Hodgkin’slymphomas.NCI SponsoredInternationalWorkingGroup[J].JClin Oncol,1999,17:1244—1244. [53At—HAKEEMDA。FEDEI,ES。CARLOSR,eta1. ExtranodalNK/T—celllymphoma,nasaltype[J].Oral Oncol,2007,43:4—14. [6]wuX,LIP,ZHAOJ,eta1.Aclinicalstudyof115 patientswithextranodalnaturalkiller/T·-celllympho—- ma,nasaltype[J].ClinOneol,2008,20:619~625. [71KIMT。PARKYH。LEESY,eta1.Localtumorin— vasivenessismorepredictiveofsurvivalthanInterna— tionalPrognosticIndexinstageI(E)/Ⅱ(E)extran- odalNK/T-celllymphoma,nasaltype[J].Blood, 2005,106:3785—3790. [83潘战和.黄慧强,林旭滨。等.鼻型NK/T细胞非霍奇 金淋巴瘤预后因素探讨(附93例长期随访结果分析) [J].癌症,2005。24(12):1493—1497. [9]胡巧英.刘鹏.84例鼻型NK/T细胞淋巴瘤的治疗与 预后分析[J].实用肿瘤杂志,2007。22(4);317—321. [10]王碧芸。洪小南.印季良。等.鼻腔NK/T细胞淋巴瘤 的预后因素分析[J].中华肿瘤杂志,2006,28(7):523 —525. [11]肖健,王树森.黄岩,等.62例鼻型NK/T细胞淋巴瘤 的预后因索分析EJ].癌症,2006,25(9):1173—1177. [123CHEUNGM,CHANj,LAUWH,eta1.Earlystage nasalNK/T-eelllymphoma:clinicaloutcome,prog— nosticfactors,andtheeffectoftreatmentmodality [J].IntJRadiatOncolBiolPhys.2002,54:182—190. [133史艳侠,彭柔君,林素暇。等.T细胞性非霍奇金淋巴 瘤103例的预后分析[J].中华内科杂志,2007,46 (12):1000一1002. [14]BARRl0NUEVOC,ZAHARIAM,MARTINEZM T,eta1.ExtranodalNK/T—celllymphoma,nasaltype: studyofclinicopathologicandprognosisfactorsina seriesof78casesfromPeru[J].ApplImmunohisto— chemMolMorphol。2007,15:38—44. [15]唐琼兰。刘卫平,李甘地。等.西南地区鼻和鼻型NK/ T细胞淋巴瘤的临床病理特征及预后分析[J].肿瘤, 2003,23(5):411—413. [161KOOMWS,CHUNGEJ,YANGWI,ela1.An— gioentrieT—cellandnk/T—celllymphomas:radiothera— peuticviewpoints[J].IntJ RadiatOncolBiolPhys, 2004,59:1127一1137. (收稿日期:2009-08—07) 万方数据
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