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24例多发性骨髓瘤患者T辅助细胞亚群
的
及遗传学分析
曾美秀1 谢晓宝1 王志林1 邱国强1 曹祥山1 邹昭玲1
[摘要] 目的:分析多发性骨髓瘤(MM)患者外周血Thl、Th2细胞数量和比例及骨髓细胞分子遗传学变
化,探讨其相关关系及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测分析24例MM患者外周静脉血Thl、Th2细胞
的比例并采用荧光原化杂交技术(FISH)对其骨髓细胞13q14缺失、p53缺失、IgH易位重排进行检测。结果:①
Ⅲ期MM患者Thl细胞比例较对照组显著降低,Ⅱ、Ⅲ期MM患者Th2细胞比例较对照组及I期降低.Ⅲ期
MM患者Thl/Th2比值较对照组、I及Ⅱ期增高(P
说明书进行DNA变性、
杂交、洗涤、复染,荧光显微镜观察结果。GPL
D13S319探针在正常问期细胞中表现为2个红色
信号(2R),只有1个红色信号时(1R)判断为陬j性。
GPLRBl探针及(;PLP53探针在正常间期细胞中
分别表现为2个绿色信号(2G),只有1个绿色信号
时(1G)判断为阳性。GPI。IGH断裂苇排探针在正
常问期细胞中表现为2个黄色融合信号(2F),出现
相互分离的红色信号、绿色信号和1个黄色融合信
号(1R1GIF)时判断为阳性(图l~4)。分析每例正
常对照标本的200个问期细胞,计算出阳性信号的
百分率及其均值(z)和标准差(s),以阳性细胞数>
;+35作为标准。分析每例MM患者标本的100
个问期细胞,计算阳性信号的百分率。超过标准者
判定为阳性。
1.3统计学处理
所有数据均由SPSSll.5forWindows统计软
件完成。T辅助细胞亚群分析采J1j独立t检验、一
元方差分析完成。Thl/Th2比值与132一MG栩关性
比较采』fjSpearm相关分析。del(13q14,、p53缺失
和lgH基因重排阿1性率与Durie-Salmon分期的相
关性用Fisher精确概率法统计。P<0.05为差异
有统计学意义。
2结果
2.1不同临床分期MM患者Th哑群的变化
Ⅲ期MM患者7Fhl细胞较对照组显著降低,
n、11l期MM患者Th2细胞比例较对照射l及l期
降低。ⅡI期MM患者Thl/Th2比值较对照组、I
及Ⅱ期增高(P<0.05或P<0.01)。见表1。
2.2 FISH检验结果及与临床分期的关系
24例MM患者均采川含I)13S319、RBl、IGH、
图1 探针GP!。RBI对13q14进行间期FISll检测图仅出现1个绿色信号时(1G)表示13ql4缺失;图2 探针GPI—IGH
对14q32进行间期FIStl检测图出现黄红绿3个信号表示发生了IGH基因重排;图3探针GPL!)13S319对13q14进行
间期FISH检测图仅出现1个红色信号时(1R)表示13q14缺失;图4探针GPLP53对17p13进行间期FISH检测图仅
出现1个绿色信号时(1G)表示17P13缺失
万方数据
·396·
表1不同临床MM患者和对照组T辅助细胞亚群的
表达水平 ;士s
与对照组比较,1’P<0.05,2’P<0.01;与l期比较,
”P<0.05,”P<0.01;与Ⅱ期比较,”P<0.05
P53探针进行检测,结果检出9例13q14缺失,其
中5例D13S319阳性(20。83%),6例RBl阳性
(25.00%),8例IGH重排(33.33%),3例P53缺
失(12.50%)。其中有1例同时检出13、14、17号
染色体异常,1例同时检出13、17号染色体异常。
del(13q14)、14q32易位重排及del(17p13)阳性率
在DS分期之间无相关性(P>0.05)。见表2。
表2 DS分期与del(13q14)、del(17p13J及14q32易
位重排的关系 例
临床分期例数del(17p13)del(13q14)14q32易位重排
2.3FISH预后风险分组与Thl/Th2的关系
以是否存在del(13q14)和(或)del(17p13)把病
例组按预后风险分组为高危组和标危组2组∞3,分
析比较发现高危组MM患者Thl及Th2细胞均较
标危组明显降低,Thl/Th2比值较之升高(P<
0.05或P<0.01)。见表3。
表3 Thl/Th2在FISH预后风险分组的表达分析
Z工5
与标危组比较,”P
提示 MM患者del(17p13)可能与
其髓外进展及不良预后有关。
另外参照文献(33,我们将MM病例组按是否
1
1
6
l
1
7;
5
4”期期期IⅡⅢ
万方数据
临床血液学杂志2010年7月第2呈卷躯7舅
存在del(13q14)和(或)del(17p13)分为高危组和标
危组,分析比较发现前者Thl及Th2细胞均较后
者显著降低,而Thl/Th2比值升高,提示高危组
MM患者免疫缺陷更为严重,预后亦更差。
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