演示文稿-血细胞

nullnull检定规程血细胞分析仪检定规程 JJG714-90null 一、概述 本规程适用于新制造、使用中和修理后的血细胞分析仪以及血细胞计数仪和血红蛋白测定仪的检定。 血细胞分析仪(以下简称分析仪)是医用计量仪器。它可以测量血液中红细胞数 (RBC)、白细胞数(WBC)和血红蛋白的浓度(Hb)。分析仪主要应用于医院血液临床 检验，也广泛应用于医药、化工和科研部门的血液检验和颗粒计数。 在分析仪中血细胞的计数一般采用电阻法。它利用宝石小孔作传感器，当传感器吸取定量的血细胞样品液后，便将血细胞数转换成对应的电脉冲数。电脉冲经放大、电压甄别和整形后，通过测定电脉冲数就确定了血细胞数。 血红蛋白的测定一般采用比色原理。它利用光电元件作传感器，由传感器将血红蛋白浓度的变化转换成对应电压信号的变化。电压信号经放大运算后，通过测定电压变化的大小确定血红蛋白的浓度。 血细胞分类血细胞分类　： 　　血细胞分类主要有以下两种。 　　(一)形态分类： 　　1、 利用整形的激光束照射血细胞，通过折射、透射、反射后的激光束进行收集整理并转换成相应数据。 　　2、 利用高频波反射，收集信号转换成数据。 　　(二)粒子分类： 　　根据电阻法原理，通过电流变化所产生的脉冲大小和数量获得对应的血细胞分类和数目。 　　形态分类是维持血细胞近似原生状态下进行测定的，较为准确可信，其分类可达五项以上。粒子分类是破坏血细胞的原生状态，将细胞膜打孔，排除细胞质，将膜紧裹核，测定核的大小，故称粒子分类。严格地说粒子分类是一种筛选法，其分类局限在三类以下。发展简史发展简史 　　1947年美国科学家库尔特(W.H.Coulter)发明了用电阻法计数粒子的专利技术。1956年他又将这一技术应用于血细胞计数获得成功，其原理是根据血细胞非传导的性质，以电解质溶液中悬浮血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础，进行血细胞计数和体积测定，这种方法称为电阻法或库尔特原理。1962年，我国第一台血细胞计数仪在上海研制成功。到了60年代未血细胞分析仪除可进行血细胞计数外，还可以同时测定HGB血红蛋白。70年代，血小板计数仪问世。80年代，开发了白细胞分类(3分类及5分类)。90年代，开发出了可对网状红细胞进行计数的血细胞分析仪，同时5分类及幼稚细胞检测更成熟，并发展成为血细胞分析流水线。 null 二、技术要求 1 外观 1．1 分析仪应附有产品说明书、产品合格证书以及配套附件。 1．2分析仪不应有影响工作性能的机械损伤；各旋钮、开关应定位准确， 功能良好；样品台应平稳整洁。 1．3分析仪上必须标明型号、出厂日期、编号及厂名。 2 空白 2．1 红细胞空白计数不大于0.02×10 ／L。 2．2 白细胞空白计数不大于0.02×10／L。 2．3 血红蛋白空白测定值不大于2 g／L。 3交叉污染率 3．1红细胞交叉污染率不大于2％。 3．2白细胞交叉污染率不大于2％。 3．3血红蛋白交叉污染率不大于2％。 null 二、技术要求 4准确度 4．1红细胞计数准确度优于±6％。 4．2白细胞计数准确度优于±10％。 4．3血红蛋白测定准确度优于±(3+3％×c)g／L。 注：c为血红蛋白浓度值，单位为g／L。  5变异系数 5．1 红细胞计数的变异系数不大于2.5％。 5．2 白细胞计数的变异系数不大于3.5％。 5．3 血红蛋白测定的变异系数不大于1.5％ 。 null三、检定条件 6检定条件 6．1检定室内的温度为(20±5)℃。 注：对于特殊仪器，其检定室温度可根据说明书的要求确定。 6．2检定室内的相对湿度不大于80％。 6．3 电源电压需经过电子交流稳压器的稳压。 6．4检定室内有较好的防尘措施。 6．5远离强电磁场的干扰源。 7检定设备 7．1标准物质。 经国家计量行政部门批准、颁布并具有相应标准物质《制造计量器具许可证》的单位提供的标准物质。 null 三、检定条件 7．2空白稀释液 空白稀释液需经4＃漏斗抽滤。 7．3移液管：50mL，A级。 7．4容量瓶：100mL，A级。 7．5量杯： 25mL。 7．6分度吸管：0.25mL，A级。 7．7混匀器。 7．8电子交流稳压器：AC220V，1kW (2) null 四、检定项目和方法 8外观检查 用目测检查分析仪的涂漆、渡层和玻璃器件；用手拨动各旋钮、开关和样品台，以及紧固件情况；分析仪有关的技术文件一应具齐，其铭牌字迹清楚。 9.1分析仪、标准物质、稀释液在检定室的温度平衡不小于2小时。 9.2接通电源预热15分钟。将分析仪各开关和旋钮按说明书进行预调。 10空白检定 10．1空白的检定 取25 mL空白稀释液置于25 mL清洁量杯中，按常规测试方法连续测量二次，不计结果。另取20 mL空白稀释液连续测量五次，舍去第一个测量值，其余填人附录3的1中。 操作步骤操作步骤操作步骤 1．从冰箱中取出参评物，放置室温15分钟，勿摇动。 2．在评价测定前，先测定两份正常人新鲜血液。 3．将参评物瓶口朝上置双手掌心，双手来回搓动8次。 4．颠倒小瓶，使瓶口朝下置于掌心，来回搓动8次。 5．重复3和4步骤8次(计2分钟左右)。 6．瓶底朝上，确认瓶底无沉积物，说明已充分混匀。 7. 用软纸拭净瓶口，轻轻打开瓶塞 8.稀释：稀释器、吸样管要经过校准。吸血后吸样管外的血液要完全擦干净。血液稀释后要尽快测定，否则易引起“稀释性溶血”。null 四、检定项目和方法 10．2红细胞空白的检定: 取45 mL红细胞空白稀释液，按10．1款检定，其四次的平均值应符合2．1款的要求。 10．3 白细胞空白的检定：取45 mL白细胞空白稀释液，按10．1款检定，其四次的平均值应符合2．2款的要求。 10．4血红蛋白空白的检定：取适量血红蛋白稀释液，按10．1款检定，其四次的平均值应符合2．3款的要求。 ll交叉污染率的检定 11．1交叉污染率的检定： a)取低值样品20 mL摇匀后，置于清洁量杯中,舍去第一个测量值，其余填人附录3的表2中。 null 四、检定项目和方法 b)取高值样品20 mL摇匀后，置于清洁量杯中，舍去第一个测量值，其余填入附录3的表2中。按常规测试方法连续测量四次， c)取上述同一低值样品20 mL摇匀后，置于清洁量杯中，按常规测试方法连续测量四次，舍去第一个测量值，其余填入附录3的表2中。 d)交叉污染率(CO)的计算 CO= ×100％ (1) 式中： ——高值样品的平均值; ——前一次低值样品的平均值; ——后一次低值样品的平均值。 四、检定项目和方法11．2红细胞交叉污染的检定 取高值为6.5×10／L红细胞粒子标准物质20 mL，低值为2.5×10／L红细胞粒子标准物质40 mL，按11．1款检定，其结果应符合3．1款的要求。 11．3 白细胞交叉污染率的检定 取高值为14×10／L白细胞粒子标准物质20 mL，低值为2×10／L白细胞粒子标准物质40 mL，按11．1款检定，其结果应符合3．2款的要求。 11．4血红蛋白交叉污染率的检定 取高值为200 g／L的血红蛋白标准物质20 mL，低值为50ｇ/L血红蛋白标准物质40 mL，按11．1款检定，其结果应符合3．3款的要求。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法 12准确度的检定 12．1红细胞计数准确度的检定 a)红细胞粒子标准物质的选择 红细胞粒子标准物质可采用生物粒子标准物质或非生物粒子标准物质。但在一次检定过程中要采用同一类型的粒子标准物质；粒子标准物质的稀释倍数应与分析仪规定的稀释倍数一致，而且粒子标准物质的稀释液也应与分析仪规定的稀释液一致。 b)取标准值为4．5×10／L红细胞粒子标准物质20 mL，置于25 mL量杯中。 c)将粒子标准物质放置混匀器中，混匀30 s。 d)按常规测试方法测量红细胞粒子标准物质，连续测量六次，舍去第一个 测量值，其余填人附录3的表3中。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法 1 对于在面板上可校准测量值的分析仪，在测量标准值为4．5×lO／L红细胞粒子标准物质时，可调整测量值，使测量值与粒子标准物质标准值一致。一旦调整后，应保持到红细胞计数准确度检定的全过程结束。 若因小孔阻塞，泄漏、校准等原因，致使测量最后一个数据时，被测粒子标准物质液量少于10 mL时，则需要补充原粒子标准物质，然后按c)与d)步骤重新操作。 e)取空白稀释液25 mL，置于量杯中，按常规测试方法测量一次，不计结果。 f)取标准值为6．5 x10／L红细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 g)取标准值为5．5 x10／L红细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 h)取标准值为3．5 x10／L红细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。i)取标准值为2．5×10/L红细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法 12．2 白细胞计数准确度的检定 a)白细胞粒子标准物质的选择 根据被检分析仪所采用的溶血剂应适当选择白细胞粒子标准物质。当溶血剂对白细胞的外形大小无影响时，应采用常用的白细胞粒子标准物质；若溶血剂对白细胞的外形大小有影响，此时应选择与之相对应的白细胞粒子标准物质。白细胞粒子标准物质可用生物粒子标准物质或非生物粒子标准物质。但在一次检定 过程中要采用同一类型的粒子标准物质；粒子标准物质的稀释倍数应与分析仪的稀释倍数一致，而且粒子标准物质的稀释液也应与分析仪的稀释液一致。 b)取标准值为8×10／L的白细胞粒子标准物质20 mL，置于25 mL量杯中。 c)将粒子标准物质放在混匀器中，混匀30 s。 d)按常规测试方法测量白细胞粒子标准物质，连续测量六次，舍去第一个测量值，其余填人附录3的表3中。 。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法 1 对于面板上可校准测量值的分析仪，在测量标准值为8×10／L的白细胞粒子标准物质时，可调整测量值，使测量值与粒子标准物质的标准值一致。一旦调整后，应保持到白细胞计数准确度检定的全过程结束。 2若因小孔阻塞、泄漏、校准等原因，待测量最后一个数据时，被测粒子标准物质的液量少于10 mL时，则需要补充原粒子标准物质，然后按c)，d)步骤重新操作。 e)取空白稀释液20 mL，按常规测试方法测量一次，不计结果。 f)取标准值为14×10／L的白细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 g)取标准值为11×10／L的白细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 h)取标准值为5×10／L的白细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 i)取标准值为2×10／L的白细胞粒子标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)，e)步骤操作。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法 12．3血红蛋白准确度的检定 a)血红蛋白标准物质的选择 根据被测分析仪所采用的测量方法，应选择与之相对应的血红蛋白标准物质。当采用HiCN方法时，应采用氰化高铁血红蛋白标准物质。在一次检定过程中要采用同一类型的血红蛋白标准物质，而且血红蛋白标准物质的稀释倍数应与分析仪的稀释倍数一致，同时血红蛋白标准物质的稀释液也应与分析仪的稀释液一致。 b)取标准值为100 g／L血红蛋白标准物质20 mL，置于25 mL量杯中。 c)按常规测试方法测量血红蛋白标准物质，连续测量四次，舍去第一个测量值， 其余填入附录3的表3中 四、检定项目和方法四、检定项目和方法l 对于在面板上可校准测量值的分析仪，在检定前可用校准溶液调整或在测量标准值为100g，L血红蛋白标准物质时，调整测量值，使测量值与血红蛋白标准物质的标准值一致。而且，一旦调整后应保持到血红蛋白准确度检定的全过程结束。 2 若因泄漏、校准等原因，待测量最后一个数据时，被测血红蛋白标准物质的液量少于5 mL时，则需要补充原标准物质后重新操作一次。 d)取空白稀释液25 mL，按常规测试方法测量一次，不计结果。 e)取标准值为200/L的血红蛋白标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)步骤操作。 f)取标准值为150/L的血红蛋白标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)步骤操作。 g)取标准值为50 g／L的血红蛋白标准物质20 mL，置于量杯中，按c)，d)步骤操作。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法12.4准确度的计算 根据格拉布斯准则剔除可疑值后，按下式计算红细胞计数、白细胞计数和血红蛋白 检定的准确度。即 A= ×100% 分析仪测量值的平均值 标准物质的标准值   四、检定项目和方法四、检定项目和方法 3变异系数的检定 13．1变异系数的检定 a)取中值的标准物质20 mL，混匀后，置于25 mL清洁量杯中，按常规测试方法连续测量六次，舍去第一个测量值，其余填人附录3的表3中。 b)另取20 mL上述同一标准物质与上次测量余下的标准物质混匀后，继续连续测 量六次，舍去第一个测量值，将其余值填人附录3的表3中。 13．2红细胞计数的变异系数检定 　　取标准值为4．5×10／L红细胞粒子标准物质40 mL，按13．1款检定。 13．3白细胞计数的变异系数检定 取标准值为8×10／L白细胞粒子标准物质40 mL，按13．1款检定。 13．4血红蛋白的变异系数检定 取标准值为100 g／L血红蛋白标准物质40 mL，按13．1款检定。 四、检定项目和方法四、检定项目和方法13．5变异系数的计算 ． 根据格拉布斯准则剔除可疑值后，按下式计算红细胞计数、白细胞计数和血红蛋白检定的变异系数。即 CV= 四、检定项目和方法五、检定结果处理和检定周期 五、检定结果处理和检定周期14经检定合格的血细胞分析仪发给检定证书；不合格的发给检定结果书。 15检定周期不得超过1年。 常用参数的代号及其临床意义 常用参数的代号及其临床意义 null