备用床实验报告

备用床实验报告 实验报告书写格式及要求 一、实验目的 二、实验用物 三、实验步骤 评估 预期目标 操作步骤 评价 四、实验小结 例如: 实验本首页:1 5-6节 备用床 一、铺备用床 一、实验目的 1.掌握铺备用床的操作顺序和方法，操作中贯彻节力原则，符 合平、整、美、实的要求。 2.熟悉铺备用床评估内容及用物准备。 3.了解铺备用床的操作评价。 二、实验用物 床褥、大单 、被套、棉被或毛毯、枕套、枕芯、床刷、刷套。 三、实验步骤 评估 1.病人有无进行治疗或进餐。 2.检查病床及床垫有无损坏，床单、被套符合床及棉胎的尺寸，适合季节需要。 预期目标 操作步骤 评价 1.病床符合实用、耐用、舒适、安全的原则。 2.大单中缝对齐，四角平整、紧扎。 3.被头充实，盖被平整、两边内折对称。 4.枕头平整充实，开口背门。 5.操作流畅，注意节力。 6.病室及病人单位环境整洁、美观。 四、实验小结 :自己通过本次实验的收获、不足、存在问、体会等等。 实验指导老师:??? 实验时间: ?年?月?日 备注:按实际操作情况书写，要求内容完整、字迹工整。 护理学基础教研室护理实训讲义 单 位:黑龙江省绥化职业技术教育中心 专 业:护 理 实验科目: 护理学基础 实验内容:铺备用床法 实验方式: 示教指导、操作练习 引言: 病床单位是医疗机构提供给病人使用的家具设备，它是病人住院期间休息、睡眠、饮食、排泄、活动和治疗的最基本的生活单位。每个病床单位应配备固定的设施， 包括:床、床垫、床褥、棉胎或毛毯、枕芯、大单、被套、枕套、橡胶单、中单、床旁桌椅等设施。根据临床不同的需要，常用三种铺床法:备用床、暂空床和麻醉床。今天我们就来共同学习临床常用铺床法之一 ——铺备用床法。 铺备用床法 [实验目的]: ※ 1(保持病室整洁、舒适、美观 2(准备迎接新病人 [前期准备]: 1(护士的准备:衣帽整洁、洗手、口罩 2(用物的准备:床上用物及 扫床刷。 3(环境的准备:病室内清洁通风，床单位设备齐全，无病人治疗或进餐 [操作步骤]: ※ 素质要求 整理衣帽，举止端庄 核 对 核对床号，铺床的种类 铺 大 单 1.移动桌椅 移床旁桌距床约20CM;移椅距床尾正中15CM 酌情翻转床垫，将床褥平铺于床垫上 2. 展开大单 护士站在床的右侧，将大单平放在床褥上，大单中线对齐床的横 纵中线，将大单分别向床头和床尾展开，正面向上 3. 铺床头角 右手将床头的床垫托起，左手伸向床头中线将大单平塞于床垫下， 在距离里床头30CM处向上提起大单边缘，使其与床边垂直，呈 一等边三角形，以床缘为界将三角形分为上下两半，将上半三角 暂时覆盖床上，下半三角平整的塞于床垫下，将上半三角翻下塞 于床垫下即床角为斜角 4.铺床尾角 左手将床尾的床垫托起，右手伸过床尾中线将大单塞于床垫下，同 铺床头发铺好床尾角 5. 铺床中部 两手将大单中部拉紧，平塞于床垫下 6(铺好对侧 转至对侧，同法铺好大单 套 被 套 1. 展开被套 被套封口端齐床头放置，正面向外，对齐中线，逐层打开 2(铺展棉胎 将床尾被套开口端的上层向上打开至三分之一处将“S”型折叠棉 胎放入开口处，中线与被套中线对齐拉棉胎上缘至被套封口端，将 竖折的棉胎分别向两侧展开，对好两上角，使棉胎平铺于被套内， 逐层拉平被套和棉胎，对齐被套开口端下中缝 3. 折叠被筒 盖被上端与床头平齐，边缘内向反折与床沿平齐，被尾塞于床垫下， 转至对侧同法铺好另一侧盖被 套 枕 套 将枕套套于枕芯上，是四角充实，轻拍枕芯，将枕头平放于床头， 开口端背向门 操 作 后移回床旁桌椅，洗手，摘口罩 [注意事项] ※ 1、 床铺应符合使用耐用舒适安全美观的原则。大单被套枕套均应做到 平、整、紧、实、美。 2、 动作轻稳，避免抖动、拍打等动作，以免微生物传播 3、 应用省时节力原则 铺床时身体应靠近床，两脚前后或左右分开，扩大支撑面，降低重 心，增加身体的稳定性， 应用臂部肌肉力量，手臂动作平稳协调，有节律地连续进行。 翻转床垫时应借助自身的重量以节省体力，减少扭伤。 先铺床头，后铺床尾，再铺中部，铺好一侧，再铺另一侧，避免多 余无效动作，减少走动次数。 《护理学基础》实训指导 学校:绥化职业技术教育中心 班级: 姓名: 分子生物学基础实验报告 [文档副标题 ] 姓名:贺选 班级:生信基地1101 学号:U201612592 2016-9-3 分子生物学基础实验 分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力，生物技术综合实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。 实验一 质粒DNA的小量制备 一、实验原理 要把一个有用的外源基因通过基因手段，送进细胞中去进行繁殖和达，需要运载工具，携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体。载体的和应用是DNA体外重组的重要条件。作为基因工程的载体必须具备下列条件:是一个复制子，载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖;载体在受体细胞中能大量增殖，只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增;载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点，便于外源基因的插入;载体具有选择性的遗传标记，如有抗四环素基因，抗新霉素基因等，以此知道它是否已进入受体细胞，也可根据这个标记将受体细胞从其他细胞中分离筛选出来。细菌质粒具备上述条件，它是基因工程中常用的载体之一。 质粒是一种染色体外的稳定遗传因子，大小在1,120kb之间， 具有双链闭合环状结构的DNA分子，主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力，能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数，可表达它携带的遗传信息。它可独立游离在细胞质内，也可以整合到细菌染色体中，它离开宿主的细胞就不能存活，而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。 质粒在细胞内的复制，一般分为两种类型:严密控制型和松弛控制型。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制，染色体不复制时，它也不复制。每个细胞内只含有1个或几个质粒分子。后者的质粒在整个细胞周期中随时复制，在细胞里，它有许多拷贝，一般在20个以上。通常大的质粒如F因子等，拷贝数较少，复制受到严格控制。小的质粒，如ColE ?质粒，拷贝数较多，复制不受严格控制。在使用蛋白质合成抑制剂,氯霉素时，染色体DNA复制受阻，而松弛型ColE?质粒继续复制12,16h，由原来20多个拷贝可扩增至1000,3000个拷贝，此时质粒DNA占总DNA的含量由原来的2,增加到40,,50,。本实验分离提纯化的质粒pBR322、pUC19就是由ColE ?衍生的质粒。 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤:培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可破坏菌体细胞壁，十二烷基硫酸钠可使细胞壁解，经溶菌酶和阴离子去污剂处理后，细菌染色体DNA缠绕附着在细胞壁碎片上，离心时易被沉淀出来，而质粒DNA则留在清液中。用乙醇沉淀、洗涤，可得到质粒DNA。 质粒DNA的相对分子量一般在106,107范围内，如质粒pBR322的相对分子质量为×106，质粒pUC19的相对分子质量为×106。在细胞内，共价闭环DNA常以超螺旋形式存在。如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂，分子就能旋转而消除链的张力，这种松弛型的分子叫做开环DNA。在电泳时，同一质粒如以cccDNA形式存在，它比其开环和线状DNA的泳动速度快，因此在本实验中，自制质粒DNA在电泳凝胶中呈现3条区带。 二、实验目的 1(掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法。 2(了解制备原理及各种试剂的作用。 三、实验材料和试剂 材料:大肠杆菌，含pET-28质粒。 试剂: 1. LB培养基:10g/L胰蛋白胨，5g/L酵母提取物，10g/L NaCl，用NaOH调pH至左右。如 固体培养基则添加15g/L琼脂。 2. 溶液?:50 mmol/L葡萄糖，25mmol/LTris-HCl，10mmol/L EDTA。 灭菌后存放。 3. 溶液?:预先配制1,SDS母液，临用前一天晚上加入 /LNaOH，4?保存。 4. 溶液?:5mol/L乙酸钾60mL、冰乙酸、双蒸馏水。 5. 酚/氯仿液:酚为重蒸酚，配制时，先将氯仿中加入异戊醇，使其体积比为24:1，然后 等量的加入重蒸酚，混匀，并用/LTris-HCl 抽提几次以平衡这一混合物，于棕色瓶中存放，并在上面覆盖等体积的 mol/LTris-HCl，4?保存。 6. 无水乙醇 7. 70,乙醇 8. TE缓冲液:10mmol/LTris-HCl、1mmol/LEDTA，其中含RNA酶20μg/mL。 仪器: 恒温培养箱、恒温摇床、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、台式高速离心机、台式小型振荡器、EP管、加样器、吸头。 关于微量移液器的操作: 1) 将微量移液器按钮轻轻压至第一停靠点; 2) 垂直握持微量移液器，将吸嘴浸入液面下几毫米，不要插入到液体底部; 3) 缓慢，平稳的松开控制按钮，吸上样液。千万不要松的太快; 4) 等一秒钟后将吸嘴提离液面; 5) 平稳的把按钮压到第一停靠点，再把按钮压到第二停靠点以排出剩余的液体; 6) 提起微量移液器，让吸嘴轻轻靠容器内壁，松开按钮; 7) 剔除吸嘴。 四、操作步骤 培养细菌 将带有质粒pET-28的大肠杆菌接种在含50μg/mL卡那霉素的LB液体培养基中，37?振荡培养过夜。注意:添加Kan时，须待LB培养基冷却到50?左右方可加入。 接种操作: 1) 首先准备好10ul量程的移液枪，枪架，70%酒精和棉球，镊子，枪头盒子还有Ep管架，放到超净工作台，打开紫外灯灭菌20-30min. 2) 关掉紫外灯，把装有10ml LB培养基的锥形瓶，菌液和卡那霉素放到 超净工作台上，点燃酒精灯。 3) 用酒精棉球擦拭双手以及超净台面。 4) 拆掉装培养基的锥形瓶的棉线，打开棉塞，将瓶口和棉塞置于酒精灯上方作灭菌杀毒处理， 迅速盖紧棉塞。把移液枪的量程调到10ul，用酒精棉球轻轻擦拭枪管，甩干酒精，取枪头 时，手侧面打开枪头盒子，迅速取出枪头并顺手关好盒子，注意手不能碰到枪头。 5) 取10ul卡那霉素，注意取的时候，用大拇指顶开pE管的盖子，不要让手接触到管口内。 取完后，迅速加入到锥形瓶内，注意加的时候，拿枪的那只 手的食指和中指的根部夹紧棉 塞，并且棉塞和锥形瓶口不要离开火焰太远，枪头要始终朝下。加完剃掉枪头。 6) 调节枪的量程到2ul，按上述方法取2ul菌液，加入到锥形瓶内，剃掉枪头，枪归还到架子 上，然后包好锥形瓶，做好标记。 7) 清理好超净工作台。把接种好的菌放在摇床上培养过夜。 从菌落中快速提取制备质粒DNA 1(取菌液置于 Ep管中，10000rpm离心1min。 2(弃上清，加入150μL GET缓冲液，在涡旋混合器上充分混匀，在室温下放置10min。 3(加入200μL新配制的/L NaOH，加盖，颠倒2,3次，使之混匀，冰上放置4min，最多不能超过5min。 4(加入150μL15min。 5(在10000rpm离心5min，上清液吸至另一干净的 Ep中，如上清液浑浊则需重新离心一次。 6(于上清液中加等体积酚/氯仿液，振荡混匀，12000rpm离心2min，小心吸取上清液，转移至另一 Ep管中，注意勿将两液相中间的白色蛋白薄层吸出。 7(向上清液加入2倍体积无水乙醇，混匀，室温放置3min。用离心机于12000rpm离心5min。小心吸去上清液，将离心管倒置于一张纸巾上，以使所有液体流出。 8(用 70,乙醇洗涤沉淀一次，10000rpm离心3min，除尽乙醇，室温自然干燥，备用。 9(用25uL含无DNA酶的胰RNase的TE重新溶解DNA，置于使用。贮存于-20?备用，可长期保存。 五(质粒的检测 1. 制琼脂糖凝胶; 2. 取1ul loading buffer和9ul上述提取的质粒，混合均匀后加样; 3. 在60V的电压下，跑胶50min，关闭电源，取出胶块放到EB中染色20min; 4. 取出后，在蒸馏水中清洗后，拿到凝胶成像仪下观测图谱; 5. 图谱结果: 1 2 3 4 5M 78 1.翟天龙2.贺选 3.徐鸿琛4.程锦明 5.李墨 7.胡慧 8.张良春 质粒电泳图