【doc】敌百虫·啶虫脒混配制剂的高效液相色谱分析方法研究

【doc】敌百虫·啶虫脒混配制剂的高效液相色谱分析方法研究 敌百虫?啶虫脒混配制剂的高效液相色谱分 析方法研究 河南农业科学 敌百虫?啶虫脒混配制剂的高效液相色谱分析方法研究 吴仁海,王恒亮,李秀杰,张永超,孙建伟 (河南省农业科学院植物保护研究所,河南郑州450002) 摘要:采用高效液相色谱法,以C18柱为固定相,甲醇+水为流动相,采用210nm检测波长,测定 敌百虫?啶虫脒混剂的有效成分含量.在此检测方法中,敌百虫?啶虫脒的标准偏差分别为 0.0162,0.0120;变异系数分别为0.08,0.12;平均回收率分别为98.87,100.2;线性相关 系数r分别为0.9999,0.99995. 关键词:敌百虫;啶虫眯;高效液相色谱 中图分类号:$48230657.72文献标识码:A文章编号:1004—3268(2009)09—0135—03 棉盲蝽属半翅目盲蝽科,是棉花上的主要害虫 之一.近年来,由于转Bt基因抗虫棉种植面积逐年 扩大,全球气候变暖,冬季气温普遍偏高,棉盲蝽的 越冬死亡率大大降低,加之苜蓿,豆类,蔬菜,果树等 其他寄主作物栽培面积不断扩大,棉盲蝽发生和危 害呈逐年加重的趋势[1].邱峰等研究发现,敌百 (acetamiprid)混配对棉盲 虫(trichlorfon)和啶虫脒 蝽有很好的增效作用,目前30敌百虫?啶虫脒乳 油已经由河南省农业科学院植物保护研究所农药实 验厂登记开发.有关敌百虫,啶虫脒单剂的检测方 法已有报道[3],但无二者混合制剂的检测方法的 报道.为了保证产品质量,简化操作手续,为敌百虫 与啶虫脒混配产品的生产提供质量控制方法,经过 反复研究,建立起敌百虫,啶虫脒混合试样反相高效 液相色谱检测方法,取得良好的分离效果,具有较高 的准确度和精密度. 1和方法 1.1仪器与试剂 Aglientli00高效液相色谱仪,具二级管阵列可见 紫外检测器,在线脱气;甲醇:色谱纯;水:2次重蒸水; 敌百虫标准品:98.39,6,国家农药质检中心(北京);啶虫 脒标准品:99.5,国家农药质检中心(北京). 1.2检测条件 色谱柱:AglientC一18,250mm×4.6mm;柱 温:25?;流动相流速:lmL/min,进样量:IO/~L.调 节检测波长和流动相比例,确定合适检测条件. 1.3溶液配制 1.3.1标准溶液配制称取敌百虫标样0.04g(精 确至0.0002g),置于lOmL容量瓶中,用甲醇溶解 并稀释至刻度,摇匀,用0.45/~m孔径滤膜过滤. 称取啶虫脒标样约0.Olg(精确至0.0002g), 置于lOmL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,用 0.45m孔径滤膜过滤. 1.3.2试样溶液的制备称取约含敌百虫0.1g(精 确至0.0002g)的试样,置于50mL容量瓶中,用甲醇 溶解并稀释至刻度,摇匀,用0.45/~m孔径滤膜过滤. 称取约含0.05g(精确至0.0002g)啶虫脒的试 样,置于100mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇 匀,用0.45m孔径滤膜过滤. 1.4样品的测定 在上述色谱条件下,待仪器基线稳定以后,连续 注入数针标准溶液,直至相邻两针峰面积相对变化 小于误差允许后,进行样品测定.将3次重复所得 峰面积平均值代人已经建立的标准曲线回归方程 中,分别计算出啶虫脒,敌百虫的含量. 2结果与分析 2.I检测波长选择 在同一流动相比例下,设定不同波长,分别对啶 虫脒和敌百虫标准液进行检测,啶虫脒和敌百虫的 液相色谱检测面积见表1.在205nm,210nm, 215nm,220nm,246nm检测波长下,啶虫脒的检测 面积逐渐增大,而敌百虫检测面积逐渐减少.啶虫 收稿日期:2009—06—1O 基金项目:郑州市金水区技术研究与开发经费支持项目(金科字E2oo8318号) 作者简介:吴仁海(1976一),男,河南信阳人,助理研究员,博士,主要从事农药应用技 术研究. ?135? 2009年第9期 脒检测面积远大敌百虫,表明各检测波长下啶虫脒 的敏感度远高于敌百虫,因此,首要考虑检测方法中 敌百虫的敏感性.虽然敌百虫在205nm下检测面 积最大,但考虑到甲醇的紫外吸收截止波长为 205nm,因此,将210nm设定为检测波长. 表1不同检测波长啶虫脒和敌百虫的液相色谱检测面积 2.2流动相的确定 在210nm检测波长下,以不同比例的甲醇和水 为流动相,调节啶虫脒和敌百虫出峰时间和分离效 果,结果见表2.随着甲醇含量的降低,啶虫脒和敌 百虫出峰时间逐渐推迟,二者的分离效果也越来越 好,在甲醇:水为35:65时,二者能够完全分离,保 留时间适中,分别为8.6min和9.2min,于是确定甲 醇:水为35:65为流动相,其色谱图见图1. 表2不同流动相啶虫脒和敌百虫的液相色谱分离效果 耀 出峰时间(rain) 1.啶虫脒;2.敌百虫 图1敌百虫?啶虫脒标样液相色谱分离效果 2.3线性相关性测定 准确称取啶虫脒和敌百虫标准品,以甲醇溶解 定容,并以甲醇稀释为不同浓度梯度.啶虫脒的标 准曲线浓度为:lg/L,O.5g/L,0.25g/L,0.1g/L, 0.05g/L;敌百虫的标准曲线浓度为:4g/L,2g/L, lg/L,0.4g/L,0.2g/L.在上述色谱条件下对啶虫 脒,敌百虫进行测定,分别以啶虫脒,敌百虫溶液的 浓度为横坐标,以测得的峰面积为纵坐标绘制标准 曲线,求得回归方程.啶虫脒的线性方程为:Y一 43.717x-13.847,r一0.99995;敌百虫的线性方程 为:Y—1.0668x一7.7339,r:0.9999. 2.4精密度和准确度 对同一敌百虫与啶虫脒混合样品,按照上述方法 平行检测5次,确定此检测方法中敌百虫,啶虫脒的 精密度,结果见表3.敌百虫的标准偏差为0.0120, 变异系数为0.12;啶虫脒的标准偏差为0.0162,变 异系数为0.08,说明方法精密度较高. 表3精密度试验结果 方法准确度检测结果见表4.对5个敌百虫与 啶虫脒混合样品进行检测,测得啶虫脒的平均回收 率为100.2%,敌百虫的平均回收率为98.87%,显 示出较好的准确度. 表4准确度试验结果 ? 136? (下转第154页) 2009年第9期 艺,1993.20(2):l67—170. [2j栗根义.高睦枪,赵秀山.高温处理对大白菜游离小孢子 培养的影响[J].实验生物,1993,26(2):165—169. [3]GaoMuqiang,LiC,enyi.Effectsofdifferenthightempera— turesandi~ubatmntimeperiodsonembryogenesisiniso— latedmicmsporecultureofChinesecabbage(Brassica campestrisL.ssppekinensis)[J].ActaAgriculturaeBore— ali-Sinica,1994,9(supp1.):16—18. [4]栗根义,高睦枪,杨建平,等.豫园一号大白菜[J].长江 蔬菜,1997(10):20. [5]栗根义,高睦枪,杨建乎,等.游离小孢子培养技术育成 豫白菜7号[J].中国蔬菜,1998(4):16—19. [6]高睦枪,栗根义,杨建平,等.通过游离小孢子培养育成 的优质大白菜新品种"豫白菜12号"[J].园艺, 2001,28(1):88. [7]张晓伟,耿建峰,原玉香,等.耐热大白菜豫早1号(豫白 1号)的选育[J].中国蔬菜,2002(5):l8—19. [8]张晓伟,耿建峰,原玉香,等.早熟大白菜新品种豫新3 号选育口].长江蔬菜,2002(6):39—40. [9]耿建峰,张晓伟,原玉香,等.利用游离小孢子培养技术 育成抗热大白菜新品种"豫园50"[J].园艺,2002, 29(1):89. [10]原玉香,耿建峰,张晓伟,等.利用游离小孢子培养技术 育成抗热大白菜新品种"豫园6O"[J].园艺,2004, 31(5):704. [11]蒋武生,张晓伟,原玉香,等.耐热极早熟大白菜新品种 "豫新5O号"的选育[J].中国瓜菜,2005(4):27—29. [12]栗根义,高睦枪,耿建峰,等.春秋适应型大白菜新品 种豫白菜ll号的选育[J].河南农业科学,1999(3): 24一Z6. [13]耿建峰,原玉香,张晓伟,等.耐热早熟大白菜豫新6o 及其栽培技术[J].河南农业科学,2003(5):43. [14] [15] [16] [17] [18] [19] [20] [21] [22] [23] [24] 耿建峰,张晓伟,原玉香,等.中晚熟高抗大白菜新品 种豫白菜l2号的选育[J].河南农业科学,2001(6): 41—42. 史宣杰,陈晓.反季节大白菜豫早1号高效栽培技术 [J].河南农业科学,2001(4):38. 徐小利,史宣杰,何太平.豫早1号大白菜在双高栽培 模式中的应用小麦,菠菜(黄心菜),西瓜,大白菜问 套作栽培模式[J].河南农业科学,2000(9);30. 蒋武生,原玉香,张晓伟,等.提高大白菜游离小孢子 胚诱导率的研究[J].华北农,2005,20(6): 34—37. 蒋武生,原玉香,张晓伟,等.小白菜游离小孢子培养 及其再生植株[J].河南农业大学,2005,39(4): 398——402. 田保明,蒋武生,张晓伟,等.提高油菜游离小孢子胚 诱导频率的研究[J].华北农,2007,22(1): 116—119. 蒋武生,张晓伟,原玉香,等.结球甘蓝游离小孢子培 养胚的形成和再生植株[M]?中国园艺学会十字花 科蔬菜分会.中国十字花科蔬菜研究进展.北京:中国 农业科技出版社,2008. 蒋武生,姚秋菊,张晓伟,等.活性炭和振荡培养对提 高大白菜游离小孢子胚诱导率的研究[J].中国瓜菜, 2008(4):】一4. 蒋武生,张晓伟,姚秋菊,等.活性炭对小白菜小孢子 培养的影响[J].华北农,2008,23(5):93—96. SatoT,NishioT,HiraiM.Plantregenerationfrom isolatedmicrosporecultureofchineseeabbage(Briss— icacampestrisssp.pekinensis)[J].PlantCellRe— ports,1989,8:486--488. SuansonEB.MicrosporecultureinBrassica[J].Plant CellandTissueCulture,1990.1l:159—169. (上接第136页) 3结论 本方法能同时测定啶虫脒和敌百虫的含量.通 过试验表明,采用本方法对啶虫脒和敌百虫混配试 剂进行同柱分析,具有定量准确,重复性好,分析速 度快,线性关系良好,操作简便等特点,能够满足产 品的常规分析和质控研究的要求. 参考文献: [1]牛庆国,申卫民,董中民.棉田棉盲蝽虫口回升的成因及 [2] [3] [4] [5] [63 治理对策[J].河南农业科学,2006(9):72—73. 邱峰,封峰强,阎文斌,等.敌百虫啶虫脒乳油复配农 药:中国,101057587[P].2oO7一o3—29. 张明国,邹鸿享,罩尼.敌百虫的液相色谱分析[J].湖 北化工,1999(5):32. 张建江,李茂青,高清.敌百虫高压液相色谱分析方法 的改进[J].现代农药,2003,2(5):18—20. 朱行善,郭维荣.敌百虫含量的气相色谱分析[J].化工 标准化与质量监督,1999(1):13—15. 汤富彬,罗逢健,刘光明,等.啶虫脒的高效液相色谱分 析[J].农药,2006,45(9):618,619.