HPLC法测定阿归养血颗粒中阿魏酸的含量
科技交流
HPLC法测定阿归养血颗粒中阿魏酸的含量
张颖 蒋俊春 陈艳梅 (商丘市食品药品检验所 河南商丘476000)
摘 要 目的:建立 HPLC法测定阿归养血颗粒中阿魏酸含量的方法。方法:采用HYPERSIL OSD2 Cl8色谱柱(150mm×4.6
mm,5Ixm),乙腈一1%冰醋酸(30:70)为流动相;流速 1.0ml·min~;检测波长 320nm。结果:阿魏酸在 2.2~15.4lxg·rain 范围
内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.7%,RSD=0.9%(n=5)。...
科技交流
HPLC法测定阿归养血颗粒中阿魏酸的含量
张颖 蒋俊春 陈艳梅 (商丘市食品药品检验所 河南商丘476000)
摘 要 目的:建立 HPLC法测定阿归养血颗粒中阿魏酸含量的方法。方法:采用HYPERSIL OSD2 Cl8色谱柱(150mm×4.6
mm,5Ixm),乙腈一1%冰醋酸(30:70)为流动相;流速 1.0ml·min~;检测波长 320nm。结果:阿魏酸在 2.2~15.4lxg·rain 范围
内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.7%,RSD=0.9%(n=5)。结论:方法简便,专属性强,结果准确,可用于阿归
养血颗粒的质量控制。
关键词 阿魏酸;高效液相色谱法;含量测定;阿归养血颗粒
中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2009)01-0130-02
阿归养血颗粒是由当归、阿胶、党参、白芍等药材加工制
成的颗粒剂,具有补养气血之功效,用于面色萎黄,头晕乏
力,月经量少色淡⋯。现行质量标准中未收载含量测定项
目,不能有效的控制药品质量。当归为方 中主药 ,阿魏酸是
当归的主要有效成分之一 ,本文以阿魏酸为指标成分,建
立了阿归养血颗粒中阿魏酸的 HPLC 测定法,为该制剂的
质量控制提供了客观的含量评价方法。
1 仪器与试药
1.1 仪 器
Watersl515型高效液相色谱仪 ,Waters2487紫外检测器
AUW一220D电子分析天平,5210DT超声处理器(功率 250W,
频率 33kHz)
1.2 试 药
阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所 ,批号 :0773—
9809;乙睛为色谱纯,水为重蒸馏水,其余试剂为分析纯。
阿归养血颗 粒 (市 售:河南 辅仁 制药 有 限公 司,批 号:
20070502 20071201 20060106,平均袋重:10.0012g)。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:HYPERSIL OSD2 Cj8色谱柱(150mm×4.6mm,
5I,zm),流动相:乙腈一1%冰醋酸(30:70);柱温:30%,流速
1.0 ml·rain~;检测波长320nm,进样量20txl。
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表 2 样品测定结果(n=4)
3 讨论
3.1 HPLC法测定齐墩果酸的含量,采用紫外检测器时,需
正确选择检测波长。通过对齐墩果酸紫外吸收的测定并通
过多次试验,以选取 210nm作为检测波长测定效果最佳。
3.2 有报道选用 甲醇一水一冰醋酸一三乙胺 (47:53:0.04:
2.2 线性关系考察
精密称定阿魏酸对照品约 10.995mg,置 50ml棕色量瓶
中,加甲醇适量,使完全溶解后,稀释至刻度,摇匀。精密量
取 1、2、3、5、6、7ml,分别置 10Oral棕色量瓶中加甲醇稀释至
刻度,摇匀。按照“2.1”项色谱条件,分别进样201xl,记录阿
魏酸峰面积值,以峰面积积分值(Y)对对照品浓度(x)进行
线性 回归,回归方程:Y=9.42×10 +5.18×10 ,r=
0.999 9。结果表明,阿魏酸对照品浓度在 2.2~15.4txg·
rain 范围内与峰面积呈 良好的线性关系。
2.3 对照品溶液 的制备
精密称定阿魏酸对照品 10.995mg,置 50ml棕色量瓶
中,加甲醇适量,超声处理使完全溶解后,稀释至刻度,摇匀,
作为对照品贮备液。精密量取贮备液3 ml置100 ml棕色量
瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2.4 供试品溶液的制备
取本品细粉约3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加5%0
碳酸钠溶液20ml,超声处理30min,提取液移至离心管中,离
心(3 000r·rnin )10min,取上清液,置分液漏斗中,沉淀用
5%碳酸钠溶液洗涤3次,每次20ml,洗液并人同一分液漏斗
中,用2%氯化钠饱和的乙醚液洗涤3次,每次 20ml,弃去乙
醚液,水溶液用盐酸调 pH为 1—2,再用2%氯化钠饱和的乙
醚液振摇提取4次(25,25,2O,20m1),合并乙醚液,回收乙醚
至干,残渣加甲醇 10ml溶解,定量转移至25ml棕色量瓶中,
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0.02)作为流动相,采用 HPLC法测定中药材中齐墩果酸的
含量 ,笔者采用此法对二至丸进行了测定,显示对照品及
样品的齐墩果酸峰与相临峰不能有效分离,因此,该流动相
对测定二至丸中齐墩果酸含量不能取得满意效果。
3.3 样品制备时可采用回流提取法与超声提取法 ,经过
试验,回流提取法回收率较高,因此采用回流提取法。
参 考 文 献
1 中国药典[s].2005年版.一部.43
(2008-06-03收稿 2008-07.15修回)
中国药师 2009年第12卷第1期 china Pha册acjst 2009,Vo1.12 No.1
加甲醇至刻度,摇匀。
2.5 精密度试验
取同一对照品溶液,重复进样5次 ,每次201xl,记录峰面
积 ,RSD=0.9%(n=5),表明精密度 良好。
2.6 稳定性试验
取同一样品溶液分别在 0、1、2、3、4、5、6h进样 20p,1测
定峰面积,RSD:0.9%(n=7),供试品溶液在6h内稳定。
2.7 重复性试验
取同一样品6份,按“2.4”项下方法制备供试品溶液,
进样20 l测定含量,结果RSD=0.9%(n=6),表明本方法
的重复性良好。
2.8 加样回收率试验
分别精密称取 已知含量 为 0.096mg/g的样 品 (批号
20060106)5份 ,另取对照品 13mg,置 50ml量瓶中,加甲醇
稀释至刻度 ,分别精密量取 1ml加入每份样品中,按供试品
制备方法制备,分别精密量取3ml,置 10ml量瓶中,按照“2.
1”项色谱条件,分别测定,结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
2.9 样品测定
取 3批样品,按 “2.4”项 下方 法制备 供试液 ,各进样
20tzl,按外标法(峰面积)计算阿魏酸的含量,结果见表 2及
图 1。
表2 样品阿魏酸的含量
样品批号 样品含量(mg/袋)
2o07o502
20o71201
20o601O6
1.O
1.1
0.96
2 4 6 8 10 2 4 6 8 10 2 4 6 8 10t/min
A B C
A.对照品 B.样品 C.阴性样品 1.阿魏酸
图1 HPLC色谱图
3 讨论
本制剂处方中成分复杂,为了将阿魏酸与其他成分较好
的分离 ,我们采用了不同的流动相,试验结果表明乙腈一1%
冰醋酸(30:70)为流动相,效果最佳。阿魏 酸对光稳定性
差,操作需避光。本方法操作简便 ,具有较强的专属性 ,回收
率好,能够更有效的控制该制剂的质量。
参 考 文 献
1 卫生部药品标准中药成方制剂[s].第十二册.79
2 袁丽霞,王红.HPLC法测定当归苦参丸中阿魏酸的含量[J].中国药事,
2008,22(1):61-62
3 中国药典[s].2005年版.一部.89
(200806-03收稿 20084)9—12修回)
高效液相色谱法测定妙打狼颗粒中黄芩苷的含量
孙延萍 (哈尔滨医科大学附属第一医院 哈尔滨150001)
摘 要 目的:建立测定妙打狼颗粒中黄芩苷含量方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱:Diamonsil C (150mm×4.6
mm,5 m);流动相:甲醇一水一冰醋酸(50:50:1);流速:1.0ml·min~;检测波长:278nm。结果:妙打狼颗粒中黄芩苷与其他组
分分离良好。线性范围为 0.17~1.701xg,r=0.999 9,平均回收率 99.72%,RSD为 0.70%。结论 :本方法操作简便、灵敏度
高、结果准确,可用于妙打狼颗粒中黄芩苷的测定。
关键词 妙打狼颗粒;黄芩苷 ;高效液相色谱法
中图分类号:R927.2 文献标识码 :A 文章编号:1008-049X(2009)01-0131-02
妙打狼颗粒是自主研制的国家级六类新药,纯中药制
剂,由黄芩、水牛角、大青叶、赤芍、白芷等十多味中药组成,
具有清热解毒、凉血化瘀之功效,临床用于治疗系统性红斑
狼疮,热毒炽盛之证,症见发病急,高热不退,面部蝶形红斑
或手足或全身皮肤红色斑疹,或伴口腔溃疡,咽痛,烦躁,舌
质红,苔黄腻,脉滑数或浮数。本颗粒疗效显著,无毒副作
用,为广大狼疮患者解除病痛,受到广大患者的一致好评。
黄芩为处方中君药,收载于《中国药典)2oo5年版一部,含有
多种有效成分,其中黄芩苷为主要有效成分,测定其含量可
作为控制该品内在质量的指标。本研究建立了HPLC法测
定妙打狼颗粒中黄芩苷的含量 J,能有效地控制该药的质
量。
1 仪器与试药
Agilent l100 Series高效液相色谱仪(美国安捷伦公
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