葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
简介:
葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
Leagene葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其检测原...
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
简介:
葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
Leagene葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等,其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸,同时消耗溶液中的氧,产生过氧化氢,过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物,初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比,分光光度计进行比色测定。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定,但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量,其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
编号
名称
TC0713100T
TC0713200T
Storage
试剂(A): 酚试剂
50ml
2×50ml
RT 避光
试剂(B):
酶试剂
磷酸盐缓冲液(pH7.0)
50ml
2×50ml
-20℃ 避光
4-氨基安替比林
葡萄糖氧化酶
过氧化物酶
临用前,按酚试剂:酶试剂混匀,即GOD-POD工作液,4℃保存。
试剂(C): Glu标准(5mmol/L)
1ml
2×1ml
-20℃
试剂(D): ddH2O
1ml
2ml
RT
使用说明书
1份
自备材料:
1、 生理盐水或PBS
2、 离心管、小试管或96孔板
3、 水浴锅或恒温箱
4、 分光光度计或酶标仪
5、 全自动或半自动生化分析仪
操作步骤(仅供参考):
1、 样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围(25mmol/L),用生理盐水稀释后检测。
②细胞样本:
a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),离心,弃上清,留取沉淀。
b、用PBS或生理盐水清洗,离心,弃上清,留取沉淀。
c、加入 PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,间隔30s。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。亦可用Triton X-100冰浴,制备好的裂解液不可离心,待用。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。离心,取上清待用。
2、 普通分光光度计(2ml比色杯)Glu测定操作:
①按下表依次加入试剂:
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl)
20
Glu标准(5mmol/L)(μl)
20
待测样本(μl)
20
GOD-POD工作液(ml)
2.0
2.0
2.0
②充分混匀,水浴中孵育。
③分光光度计测定处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
3、 分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪Glu测定操作:
①按下表依次加入试剂:
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl)
10
Glu标准(5mmol/L)(μl)
10
待测样本(μl)
10
GOD-POD工作液(ml)
1.0
1.0
1.0
②充分混匀,水浴中孵育。
③分光光度计测定处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
4、 酶标仪Glu测定操作:
①按下表依次加入试剂:
空白孔
标准孔
待测孔
ddH2O(μl)
3
Glu标准(5mmol/L)(μl)
3
待测样本(μl)
3
GOD-POD工作液(μl)
300
300
300
②充分混匀,水浴中孵育。
③酶标仪测定吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
5、 全自动生化分析仪Glu测定操作:
①按下表依次加入试剂:
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl)
3
Glu标准(5mmol/L)(μl)
3
待测样本(μl)
3
GOD-POD工作液(μl)
300
300
300
②充分混匀,水浴中孵育。
③全自动生化分析仪测定处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。
机器参数:
主波长
505nm
反应类型
终点法
反应方向
升反应(+)
计算公式:
血清、血浆等液体样本(空白调零):
葡萄糖(mmol/L)={(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)}×5mmol/L
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪):
葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L
细胞、组织等样本(空白调零):
葡萄糖(mmol/L)={(待测管吸光度-空白吸光度)/(标准管吸光度-空白吸光度)}×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)
细胞、组织等样本(全自动生化分析仪):
葡萄糖(mmol/L)=(待测管吸光度/(标准管吸光度)×5mmol/L÷待测样本浓度(mg/ml)
参考区间:
健康成年人空腹葡萄糖:3.9~6.1mmol/L(70~110mg/dl)
备注:Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl
性能指标:
外观
无色至淡黄色澄清液体
线性范围
0~25mmol/L,r>0.990
变异系数
批内<2~5%,批间<5%
空白吸光值
<0.2(1cm光径)
稳定性
密闭,12个月
注意事项:
1、 上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量,但不能直接检测尿液中的葡萄糖含量,因为未经处理的尿液中含有还原性物质,影响过氧化物酶反应。
3、 待测样本如不能及时测定,应置于2~8℃保存,3天内稳定。
4、 本法线性范围可达25mmol/L,如果样本葡萄糖浓度过高,结果可能呈假性降低。应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
5、 配制好的GOD-POD工作液,4℃避光保存,一个月有效。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号
名称
DC0032
Masson三色染色液
DM0007
瑞氏-姬姆萨复合染色液
NR0001
DEPC处理水(0.1%)
PW0053
Western抗体洗脱液(碱性)
TC1243
甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP比色法)
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