促卵泡激素FSH
文件编号: DGCPH-IMN-SOP-02-24
版序:2005-1
页码:第1 页,共4 页
用途:
用免疫学方法定量测定人血清或血浆中的促卵泡激素(FSH)含量。电化学发光免疫测定试剂,适用于罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪。
概述:
促卵泡激素(FSH)与促黄体生成激素一样同属促性腺激素家族。二者协同调
节和刺激性腺(卵巢和睾丸)的发育和功能。与LH、TSH和hCG一样,FSH也是糖蛋白,由二种亚单位(α-和β-)组成,分子量32kD。对于女性,该激素在下丘脑-垂体-卵巢调节环路中发挥作用,控制月经周期。FSH和LH从垂体的促性腺细胞中阵发性
释放。血中的浓度由类固醇类激素通过下丘脑的负反馈机制控制。在卵巢中FSH和LH一起刺激卵泡的成长和成熟,进而刺激卵泡中雌激素的生物合成。FSH水平在月经周期的的中期呈现一高峰,尽管不如LH明显。由于卵巢功能的变化和雌激素水平
的下降,绝经期FSH达到高水平。对于男性,FSH起诱导精原细胞发育的作用。FSH检测对查明下丘脑-垂体-卵巢系统的功能失常有作用。FSH和LH检测用于先天性的疾病,如染色体异常的先天性疾病、闭经(病因)、多囊性卵巢(PCO)和绝经期综合征等。男性低促性腺激素见于无精子症。Elecsys FSH测定方法采用二种抗人
FSH特异的单克隆抗体。与LH、TSH、hCG、hGH和hPL的交叉反应可忽略不记。 原理:
采用双抗体夹心法原理,整个过程18分钟完成。
? 第1步:40 µl 标本、生物素化抗FSH单克隆抗体和钌(Ru)标记的抗FSH单克隆抗体混匀,形成夹心复合物。
? 第2步:加入链霉亲和素包被的微粒,让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲
和素间的反应结合到微粒上。
? 第3步:反应混和液吸到测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质
被清洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。 ?检测结果由机器自动从
曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正,由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。
? Elecsys系统缓冲液/测量池清洗液预热杯(PC/CC-Cup)货号03023141试剂: M:链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖),1瓶,6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml,生物素结合能力: 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。
R1:生物素化的抗FSH单克隆抗体(灰盖),1瓶,10ml。浓度2.0mg/l,MES缓冲液0.05mol/l,pH6.0。含防腐剂。
R2:Ru(bpy)32+标记的抗FSH单克隆抗体(黑盖),1瓶,10ml,浓度0.8mg/l,MES缓冲液0.05mol/l,pH6.0。含防腐剂。
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储存和稳定性:
存放在2-8度,切莫倒置。
未开封,可稳定至标明的保质期。
开封后,2-8度12周;
放在Elecsys2010,8周;(使用后放回2-8度;如置20-25度,约20小时)。
? Elecsys测量池清洗液(CleanCell M)货号12135027 标本采集和准备:
血清:按标准常规方法采集。
血浆:肝素锂、钠、铵;EDTA-K3 抗凝均可。如采用柠檬酸盐抗凝的血浆,测定结
果较用血清的约低20%,用氟化钠/草酸钾抗凝的约低14%。标本在2-8度可稳定14
天,-20度可稳定6个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。不要使用加
热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 ? Elecsys系统缓冲液(ProCell M)货号12135019 检测步骤:
提供的
:
货号:11775863,100人份的Elecsys FSH试剂盒包含: ? M 链霉亲和素包被的微粒
? R1 生物素化的抗FSH单克隆抗体
? R2 三联吡啶钌标记的抗FSH单克隆抗体
需要的材料(未提供):
? Elecsys FSH定标液(CalSet II)货号03032680 ? Elecsys 通用质控品(PreciControl)货号11731416 ? Elecsys2010分析仪
? Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号11662988 ? Elecsys 测量池清洗液(CleanCell)货号11662970 ? Elecsys 添加剂液(SysWash)货号11930346 ? Elecsys 系统清洗液支架(Adapter for SysClean) )货号11933159
? Elecsys 2010反应杯(Assay Cup) 货号11706802 ? Elecsys 2010吸样头(Assay Tip) 货号11706799 ? Elecsys 系统清洗液(SysClean) 货号11298500 方法:
按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。
仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数,不需手工输入。如果
特殊情况下仪器无法阅读条形码,可以手工输入15位数字。
将冷藏试剂预温到20癈后放置于仪器的试剂盘上,避免产生泡沫。仪器自动控
制试剂温度和开/关试剂瓶盖。
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定标:
每批FSH试剂有一条形码标签,含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用
FSHCalSetII 定标液定标。
定标频率:
每批试剂必须用新鲜试剂(试剂经仪器注册24小时以内)标定一次,如再次标
定即根据下列要求:
? 一个月(同一批号试剂)
? 7天(放置仪器上的同一试剂盒)
?根据要求进行标定:如质控结果超出范围时。
质控:
Elecsys通用质控品(PreciControl )1和2或其它合适的质控品。各浓度区域
的质控至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具
体要求。检测值应落在确定的范围内,如出现质控值落在范围以外,应采取校正措
施。
计算:
对每一个标本,仪器会自动计算FSH含量,单位是mIU/ml 干扰因素:
该方法不受黄疸(胆红素<64mg/dl)、溶血(血红蛋白<1g/dl)、脂血(脂质1900mg/dl)和生物素<60ng/ml干扰。接受高剂量生物素(>5mg/天)治疗的病人,至少要等最一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰(7000U/ml)的干扰。FSH浓度高达2000mIU/ml也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内
诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。Elecsys FSH测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。 检测范围:
0.100-200.0mIU/ml
稀释:
检测范围足够宽,标本不需稀释。
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测定对象 例数 百分位数
50 5 95
男性 319 4,6 1,5 12,4
女性
• 卵泡期 376 6,9 3,5 12,5
• 排卵期 56 12,3 4,7 21,5
• 黄体期 349 3,6 1,7 7,7
• 绝经后 181 67,0 25,8 134,8
LH/FSH比值(从育龄期妇女的标本中测算出来):
卵泡期: 0.82(n=315)
黄体期: 1.12(n=279)
如有必要各实验室应自己测定一个参考值范围。