妊高征患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平及其临床意义
妊高征患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水
平及其临床意义
第31卷第5期
2003年1O月
临床军医杂志
口』mCAL】0lURNAL0FMEDICALOFFICER?4l?
妊高征患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平及其临床意义
马景德.齐秀芬.安慧蔓.高云.王叶杰
(解放军第106医院.山东济南250022)
摘要:目的探讨妊高征患者血浆中氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)的水平及其在妊高征发病中的作用.方法用
EIJSA方法检测了44例妊高征患者(妊高征组)和34例同期正常孕妇(对照组)血浆中OX—LDL的含量.结果妊高征
轻,中,重度患者ox.LDL的含置分别为(O.42?O.21)mg/L.(O.54?0.33)=g/L和(0.68?0?37).明显高于对照
组的(O.35?0.12)(P<0.01).结论OX—LDL增加可能是妊高征患者血管内皮细胞损伤的原因之一.可作为妊高
征的监浏指标之一.
关键词:妊娠并发症;心血管;高血压;氧化修饰低密度脂蛋白
中圈分类号:R714.253文献标识码:A文章编号:1671-3826(2003)05-0041-03
ThePlasmaLevelofOxidativelyModifiedLowDensityLipoproteininPatients
withPregnancyInducedHypertensionSyndromeandItsClinicalSignificance
MaJingle,QiXiu—fen,AnHui—mei.GaoYun,WangYe-jie
(The106thHospitalofPLA.Jinan250022,China)
Abstract:ObjectiveToexploretheplasmalevelofo~ichfivelymodifiedlowdensityllpopmtein(OX—LDL)inpatientswithprig?
nancyinducedhypertension(PIH)anditsclinical8ignj6c8J1ce.Methods44caseswithPIHand34norm
alpregnancywiththe
蛐epregnancyweeksweredetectedforOX?LDLbyELISA.ResultsTheplasmalevelsofOX—LDLinmild,moderate.sever~PIH
i8(0.42?0.21)mg/L,(0.54?0.33)mg/Land(0.68?0.37)mg/L,respectively.significantlyhherthanthati
ncontrol
group(0.35?0.12)m?L(P<O.01).ConclusionThelli曲erox-LDLmaybeoneoftheC,SUSe8forendothelialcellrlamagein
PIHandcanbeused8.Sapredictingindex.
Keywords:pregnancycompllcafiom;cardiovascular;hypertension;oxidativelymodifiedlowdensityl
ipoprotein
妊娠高血压综合征(pregnancyinducedhypertension.
PIH)简称妊高征.是造成孕产妇和围产儿死亡的重要原因
之一.以往的研究发现,妊高征的发生,发展可能与患者
体内自由基产生清除平衡失调有关…,也有证据表明.高
血压动物内皮细胞功能失调.可产生过量的氧自由基J.
已知氧化修饰低密度脂蛋白(oxidativelymodifiedlowdemi.
tylipopmtein,ox-LDL)是天然脂蛋白受氧自由基攻击后在
体内发生氧化修饰的产物.与多种疾病有密切关系J.但
与妊高征的关系尚未见报道.为探讨妊高征患者OXLDL
的变化及其在妊高征发病中的作用,我们对44例妊高征患
者血浆中ox-LDL的水平进行了检测研究.
l对象与方法
I.I研究对象妊高征组:44例,分娩孕周为(38.59?
1.96)周.年龄24—28岁,其诊断标准按文献J.分为妊高
征轻度13例.中度18例.重度13例;对照组:34例.分娩
孕周为(39.32?1.1O)周.年龄22—29岁.为同期住院健
康孕妇.血压<130/90mmHg,尿蛋白阴性.无心,肺,肾等
病史,无高血压,妊高征家族史.上述病例均为我院2000
收稿日期:2003-08—11
作者简介:马景德(1964一),男,山东东营人.主管技师,讲师,中华检验医学会会员,中国免疫学
会终身会员,<中国医学检验杂志>常务编
委,发表i~:70余篇,主编和参编着作各l部.获军队科技进步奖5项.目前主要从事免发生化
的基础及其临床应用的研究工作.
?
42?临床军医杂志第31卷
年4月—2oo1年12月的住院初产妇,且均为单胎.
1.2方法采集所有对象空腹12h静脉血标本2,用
EDTA抗凝,立即以3000r/min,离心15rain分离血浆,置
一
20~C保存待测,依据EIJ.qA测定法的反应原理,用包被
O’lr.LDL与待测血清中的O’lr.LDL结合,加入酶标记抗体后
形成复合物,再与底物作用呈现显色反应,于492衄处用
芬兰雷勃公司产WeUseanMK3型酶联免疫检测仪按标准
曲线法测定O’lr.LDL的含量.试剂盒购自上海荣盛生物试
剂厂.
1.3统计学处理采用t检验及等级相关分析.
2结果
妊高征组轻度,中度和重度患者血浆O’lr-LDL的水平分
别为(0.42-t-O.21)mg,/L,(0.54-t-O.33)mg/L和(0.68?
0.37)mg/L,均明显高于对照组的(0.34-t-O.10)mg/L(P
<0.01),其水平高低与妊高征患者病情的严重程度呈正
相关(r=0.4293.P<0.01).
3讨论
有关妊高征的病因尚未完全阐明,目前主要存在四种
学说,即胎盘缺血学说,血管内皮损伤学说,免疫学说和遗
传学说.血管内皮损伤是目前普遍承认的妊高征发生的重
要中心环节.内皮细胞损伤的结果是造成血管内皮细胞的
联接破坏,使血管内的蛋白和液体外渗,激活凝血系统造成
DIC.并释放血管活性因子,增加血管收缩因子的生成与释
放.减少血管舒张因子的生成与释放.使血管活性因子失衡
并致收缩血管的因子占有优势,致使血压升高.有关内皮
细胞损伤的原因.曾有学者提出,产前妊高征患者的血清中
含有某种或某些细胞毒性因子,能诱导内皮细胞的损伤.,
然而有人推测,妊高征患者血清可能不直接损伤内皮细胞,
而是通过其他途径如活化中性粒细胞(PMN),间接对内皮
细胞造成损伤,而且这种损伤也主要是细胞功能的损伤,不
引起明显的细胞坏死J.业已证实,缺氧时.氧自由基产生
增加,可使微血管通透性增加J,而活性氧(ROS)可激发一
系列的细胞生物学变化引起高血压病发生和发展[1.已
知OX—LDL的生成与氧自由基及活性氧有关.而且OX.LDL
不具备与天然LDL受体结合的能力,但可被吞噬细胞表面
清道夫受体识别而被摄取,导致泡沫细胞形成,与动脉粥样
硬化性疾病的关系密切”.本组ox-LDL水平在妊高征时
显着升高的结果,提示妊高征患者机体存在脂质过氧化程
度增强,并有潜在合并动脉粥样硬化的危险.其升高机理
可能是:妊高征时,子宫蜕膜层和螺旋动脉肌段的螺旋动脉
发生急性动脉粥样化,纤维素样坏死及血管壁纤维性增生
肥厚,致使胎盘绒毛发生缺血缺氧性病理组织学变化,
由于组织缺血缺氧时,一方面直接影响线粒体氧化磷酸化
过程,细胞内ATP水平下降,并使氧自由基和活性氧的生
成置大增;另一方面,氧自由基对线粒体的损伤进一步加剧
了细胞能量合成障碍,由此影响了蛋白质的合成,可使母体
对胎盘的血液供应明显减少,严重影响胎儿的生长发育,此
有可能是造成妊高征患者妊娠丢失的一大诱因.也正是由
于氧自由基和活性氧的大量生成,致使循环中的天然LDL
受到攻击而形成OX—LDL,尔后OX—LDL则通过损伤血管壁内
皮细胞,使血管壁通透性增加,并刺激单核细胞游走进入血
管壁,形成巨噬细胞并泡沫化.反过来.血管内皮细胞的损
伤和病变可诱导产生OX-LDL,而OX?LDL产生后,又可加重
血管损伤,并因使前列环素(PGI2)合成减少和血小板聚
集,导致血栓形成.
至于妊高征时血浆OX—LDL水平与疾病严重程度呈正
相关的结果,反映了随着妊高征程度的进一步加重,患者微
血管痉挛加强.引起内皮细胞和胎盘组织缺血缺氧进一步
加强,自由基产生进一步增多,脂质过氧化程度进一步加
快.这种变化能够促使血管内皮细胞受损,导致血液呈高
凝状态,加重了缺氧程度,从而形成恶性循环,导致妊高征
的发生发展,尤其是某些遗传因素导致母体对胎儿滋养膜
抗原的低识别,造成防护性的免疫减弱和排斥反应的增加.
使滋养细胞功能受损和胎盘的浅着床,从而引起胎盘缺血
和代谢障碍,并进而造成血管内皮细胞损伤,血管活性物质
平衡失调,导致全身小动脉痉挛,最终发生妊高征.
综上所述,我们有理由认为,妊高征的形成可能是由于
多种原因引起氧自由基生成后,引起脂蛋白的氧化修饰,
OX—LDL本身的细胞毒作用可造成血管内皮细胞损伤,并导
致血管平滑肌细胞过度增殖,管壁肥厚,血管阻力增加.血
压升高.同时ox-LDL也可通过抑制内皮细胞和血小板合
成前列环素(PGI),促进血栓素(TXA:)形成,导致血小板
凝集;生成的氧自由基则通过灭活内皮细胞衍生的松弛因
子或使其基础分泌减少,导致血管舒张功能障碍.
总之,妊高征患者血浆中OX.LDL的含量增多可能与妊
高征时的内皮细胞损伤以及妊高征的发生,发展有关,也可
能是诱发动脉粥样硬化等并发症的主要原因.对于孕产妇
进行定期监测血浆中OX-LDL的变化,对进一步阐明妊高征
的发病机理,预测妊高征患者并发动脉粥样硬化以及进一
步阐明妊高征的病理生理过程具有重要意义.
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—
363.
快速冰冻切片组织的固定冻切与
新鲜冻切的比较
陈放彬,徐丽敏.部新潮’
(1解放军弟154医院检验病理科,河南信阳464000;
2河南省野生动物救护中心.河南信阳450044;
3河南省信阳市水利医院.河南信阳4464000)
关键词:快速冰冻切片;固定冻切;新鲜冻切
中图分类号:R36
手术中快速病理诊断以往在没有冷刀设备.尤其是没
有恒冷低温切片机的条件下,都采用先将送检组织固定而
后冷冻切片方法.近年来我们采用德国冰冻切片机
对50例送检标本分别进行加温煮沸固定冻切与新鲜冻切
做快速切片作了比较.
l方法
1.1取材与固定取材组织不能水洗.以免发生冰晶.取
组织块lcrn×1crn×0.2crn2块.放人三合一固定液
(95%乙醇150ml+10%甲醛40+冰醋酸l0),加热
煮沸固定l—rain左右,使组织迅速固定至白色变硬时,再用
冷水冲洗后,用干纱布沾干.
1.2速冻与切片将固定后的组织块与新鲜组织分别用
甲基纤维素作包埋剂,置切片机箱内按下PE键10rain左
右开始切片.组织进行速冻是为避免组织因缓慢冷冻形成
大的冰晶造成组织变性而产生人为假象.固定后组织与新
鲜组织冰冻切片温度一l8—2O?.切片时,进刀要慢.缓
慢摇转使切片平整.
2体会
固定组织的冰冻切片.因组织的黏液性物质己凝固.需
用蛋白甘油附贴烤片.否则染色时易脱落,所以浪费时间.
新鲜组织冰冻切片无需用蛋白甘油粘贴,组织本身的组织
液等粘性物质就能粘贴牢固,而且不用烤干.仅在常温下就
很快凝固.不但节省时间,而且组织的物质成分很少受到
影响,不易出现人为假象.
固定后的组织冷冻慢或混进水分等原因,易产生有害
的粗大冰晶.新鲜组织冰冻切片或切片融化后再行固定,
则冰晶很小甚至无显着影响.
我们配制的三合一固定液用于冰冻切片可提高染色效
果,但固定取材的组织块时,其穿透力,即固定的速度满足
不了紧急的要求.加温煮沸固定虽然可以加快固定速度.
减少固定时间,但往往造成组织严重收缩和硬脆等人为改
变.
所以.在条件有限的单位采用组织固定后冻切是非常
必要的.具备了恒冷低温切片机的单位应尽量采用新鲜组
织直接冻切.
(收稿日期:2003-06.11)