细胞凝集反应细胞凝集反应
生命科学学院
Life Science College
姓名:柳伟雄 班级:2013级生科一班
学号:201300140062 同组者:曾玮璠
山东大学实验报告 2015年4月19日
姓名,柳伟雄 系年级,生科一班2013级 同组者,曾玮璠
科目,细胞生物学实验 题目,细胞凝集反应
一、目的和要求
1、了解细胞的表面结构。
2、掌握细胞凝集的原理。
3、掌握细胞凝集实验的操作方法。
4、掌握普通光学显微镜的使用方法。
二、原理
1、在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成...
细胞凝集反应
生命科学学院
Life Science College
姓名:柳伟雄 班级:2013级生科一班
学号:201300140062 同组者:曾玮璠
山东大学实验
2015年4月19日
姓名,柳伟雄 系
,生科一班2013级 同组者,曾玮璠
科目,细胞生物学实验 题目,细胞凝集反应
一、目的和要求
1、了解细胞的
面结构。
2、掌握细胞凝集的原理。
3、掌握细胞凝集实验的操作方法。
4、掌握普通光学显微镜的使用方法。
二、原理
1、在细胞表面,组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链,形成细胞外被(糖萼)。目前认为,细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。 2、凝集素是一类含糖(少数例外)并能与糖专一结合的蛋白质,即糖蛋白,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的作用,从而凝集细胞。凝集素引起的细胞凝集,其细胞膜结构没有发生改变。与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。 3、竞争性抑制实验:凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。
三、试剂和器材
1、实验材料
家兔(或2%家兔红细胞悬液)、土豆块茎(或由土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液)、PBS缓冲溶液(磷酸缓冲溶液)、柠檬酸钠溶液、0.9%的氯化钠溶液(生理盐水)
2、实验器材
5ml注射器、酒精棉球、双凹片、载玻片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管
四、实验步骤
1、2%家兔红细胞悬液制备:以无菌方法抽取家兔耳缘静脉血液1ml(5ml注射器中先吸取3ml柠檬酸钠溶液),用0.9%的氯化钠溶液洗5次,3000r/s离心5min,最后按沉淀的红细胞体积用0.9%的氯化钠溶液配成2%的红细胞悬液。
2、土豆凝集素制备:称取去皮土豆块茎2g,切成薄片,加10mlPBS缓冲液,浸泡2h,浸出粗提液中含有可溶性土豆凝集素。
3、细胞凝集反应:双凹片土左侧滴土豆凝集素1滴,2%家兔红细胞悬液1滴;右侧滴PBS缓冲液1滴,2%家兔红细胞悬液1滴。在双凹片上混匀,摇动。
4、低倍镜下观察。
山东大学实验报告 2015年4月19日
姓名,柳伟雄 系年级,生科一班2013级 同组者,曾玮璠
科目,细胞生物学实验 题目,细胞凝集反应
五、实验结果
1、 实验结论
所加试剂 土豆凝集素1滴, PBS缓冲液1滴,
2%家兔红细胞悬液1滴 2%家兔红细胞悬液1滴
实验现象 发生了细胞凝集反应 未发生细胞凝集反应
2、 实验照片
加入土豆凝集素的红细胞 加入pbs缓冲液的红细胞
山东大学实验报告 2015年4月19日
姓名,柳伟雄 系年级,生科一班2013级 同组者,曾玮璠
科目,细胞生物学实验 题目,细胞凝集反应
加入土豆凝集素的红细胞5min 加入pbs缓冲液的红细胞5min
加入土豆凝集素的红细胞10min 加入pbs缓冲液的红细胞10min
?、低倍镜观察(10×4)
山东大学实验报告 2015年4月19日
姓名,柳伟雄 系年级,生科一班2013级 同组者,曾玮璠
科目,细胞生物学实验 题目,细胞凝集反应
实验组 对照组
加入土豆凝集素的红细胞10min 加入pbs缓冲液的红细胞10min
六、注意事项
1、在使用双凹片的过程中因操作不熟练,经常造成两个孔中的液体混合。在使用双凹片时要注意摇动的技巧,不可前后或左右单一地摇动,应该一手固定,一手成环形方向摇动,使凹槽内的液体转动起来。
本文档为【细胞凝集反应】,请使用软件OFFICE或WPS软件打开。作品中的文字与图均可以修改和编辑,
图片更改请在作品中右键图片并更换,文字修改请直接点击文字进行修改,也可以新增和删除文档中的内容。
[版权声明] 本站所有资料为用户分享产生,若发现您的权利被侵害,请联系客服邮件isharekefu@iask.cn,我们尽快处理。
本作品所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用。
网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽..)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。