【word】 高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量
高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中
咖啡因含量
2010,VoI.27No.10亿与生物Z程
Chemistry&Bioengineering
高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量
闫海燕
(宝鸡文理学院化学化工系,陕西宝鸡721007)
摘要:建立了高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量的
.色谱条件如下:EclipseXDB-C(4.6
mm×l50mm,5rtm)色谱柱,流动相为甲醇一水(35:65),流速1.0mL?min,检测波长275nm,进样量20”L.咖啡
因浓度在I5,140mg?L_.范围内线性关系良好,回归方程为Y=64.556x+71.885,R=0.9991.平均加标回收率为
106.8,RSD一2.21.该法简便,快速,重复性好,可用于小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量的测定.
关键词:高效液相色谱法;小儿氨酚烷胺颗粒;咖啡因
中图分类号:O657.7文献标识码:A文章编号:1672—5425(2010)10—0092—03
d,Jg氨酚烷胺颗粒是由对乙酰氨基酚,咖啡因,扑
尔敏,人工牛黄组成的复方制剂,常用于儿童伤风感冒
引起的鼻塞,咽喉痛,头痛,发热等[1].咖啡因主要限
于配制复方制剂,常与对乙酰氨基酚合用,能增强镇痛
作用,用于治疗一般性疼痛.咖啡因具有刺激心脏,强
心利尿,提神醒脑,兴奋中枢神经,扩张血管,增强胃分
泌等生物活性,但一次服用过多会产生恶心,呕吐,烦躁
不安,肌肉震颧,抽搐,惊厥等症状,已被列入第一类精
神药品管制范围.对成人感冒药中咖啡因含量的测定
已有报道[3].作者在此建立了一种快速检测小儿感冒
药中咖啡因含量的高效液相色谱法,并取得满意效果.
1实验
1.1材料,试剂与仪器
小儿氨酚烷胺颗粒(批号:20100203,
60O579O141o01O3,10013153,0910052),购自药店.
咖啡因对照品,纯度>99,TLC检验为一单纯斑
点,由宝鸡文理学院化学化工系有机化学实验室提供.
甲醇,色谱纯,美国Methanex公司;娃哈哈纯水.
Agilent1200型高效液相色谱仪,G1328B型二级
管阵列检测器,美国安捷伦公司;KQ52OOE型超声波
清洗器,昆山市超声仪器有限公司;DZF-1型电热恒温
鼓风干燥箱,上海一恒科学仪器有限公司;ME254S型
电子天平,德国Sartorius公司;UV_255O型紫外分光
光度计,日本岛津公司.
1.2对照品溶液的制备
精密称取105?干燥至恒重的咖啡因对照品
0.0507g,置100mL容量瓶中,用水稀释至刻度,摇
匀,即为对照品溶液.
1.3样品溶液的制备
分别取4种批号的A,JL氨酚烷胺颗粒6袋,研细,
精密称取1/30袋,置50mL容量瓶中,用水稀释至刻
度,用微孔滤膜(0.45m)过滤,即为样品溶液.
1.4色谱条件
色谱条件为:EclipseXDB-C色谱柱(150mmx
4.6mm,5m),流动相为甲醇一水(35:65),流速
1.0mL?min,,进样量2OL,检测波长275nm.
2结果与讨论
2.1紫外吸收波长的确定
对咖啡因紫外吸收光谱进行测定,结果显示样品
溶液在275nm(图1)处有最大吸收.因此本实验选
择275nm作为检测波长.
2.2线性关系
分别量取对照品溶液0.75mL,1.5mL,3mL,4
mL,5mL,6mL,7mL,加入25mL容量瓶中定容,使
其定容后的浓度分别为15mg?L,,30mg?L_.,60
mg?L一,80mg?L一,100mg?L一,120mg?L一,
140mg?L,,每次进样2OL对照品溶液,得到色谱
流出曲线.以咖啡因浓度(mg?L-1)为横坐标,峰面
基金项目:宝鸡文理学院重点科研项目(zKO918)
收藕日期:2010—07—21
作者简介:闫海燕(1981一),女,陕西成阳人,讲师,主要从事天然药物化学及药物
.E-mail:hyyanll02@163.corn.
闫海燕:高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量/2010年囊10圈
图1咖啡因紫外吸收图谱
Fig.1Ultravioletabsorptionspectrumofcaffeine
积为纵坐标绘制
曲线,见图2.
恒
孥
一
;??__-_?
O2O40608O100120140
浓度,mg?L
图2咖啡因标准曲线
Fig.2Standardcurveofcaffeine
保留时间/rain
由图2可以看出,咖啡因浓度与峰面积在15,
140mg?L范围内有良好的线性关系.对其拟合回
归,得回归方程为一64.556x+71.885,R一0.9991.
2.3精密度
取同一种对照品溶液(100mg?L)重复进样6
次,每次20”L.测得其RSD一1.33(72—6),说明仪
器精密度良好.
2.4重复性
分别取4种样品溶液按色谱条件重复进样3次,
测得4种样品溶液中咖啡因色谱峰峰面积的’RSD值
分别为0.97,1.05,0.77,0.41(一3),表明
方法的重复性好.
2.5稳定性
分别取4种样品溶液,在不同时间0h,1h,2h,3
h,4h,5h按色谱条件进样,记录峰面积,计算其RSD
值.结果分别为1.85,3.35,1.83,2.98%(一
6),表明样品在5h内稳定.
2.6样品测定
取处理好的样品溶液进行测定,每次进样量为2O
pL,得到HPLC色谱图,见图3.
1200
lOOO
800
》
星600幽
400
200
0
【b)秤品
Ca脏ine
l
?0L51.0l52o2.53-0354.04.5
保留时间/min
图3咖啡因对照品(a)与样品(b)的色谱图
Fig.3HPLCChromatogramsofstandard(a)andsample(b)
由图3可知,咖啡因与其它组分分离较好,保留时
间约为3.6rain.含量测定结果见表1.
表14种样品中囊啡因的含量测定结果
Tab.1Determinationresultsofcontentsofcaffeineinfoursamples
注:批号1,4分别为20100203,6O0579Ol41O0103,10013153,0910052,
下同
2.7加标回收率测定
取已知含量样品,加入咖啡因对照品,进行回收率
实验,结果见表2.
表2囊啡因回收率测定结果
Tab.2Determinationresultsofrecoveryofcaffeine
闰海燕:高效液相色谱法测定小儿氨酚烷胺颗粒中咖啡因含量/2010
年一10?
由表2可以看出,该方法平均回收率为106.8%,
RSD为2.21.
2.8讨论
实验中尝试用甲醇一三氟乙酸,乙腈一水,甲醇一
水体系为流动相,其中甲醇一水(35:65)体系保留时
间合适,分离度高,峰形对称,故选定甲醇一水(35:
65)为本实验的流动相.
比较不同柱温2O?,25?,30?,发现柱温对咖啡
因的保留时间影响不大,最终选择柱温在25?下进行
测定.
3结论
利用高效液相色谱法检测小儿氨酚烷胺颗粒中咖
啡因含量,咖啡因浓度在15,140mg?L范围内线
性关系良好,回归方程为=64.556x+71.885,R.一
0.9991,平均加标回收率为106.8,RSD一2.21.
该法快速,简便,结果可靠,适用于小儿氨酚烷胺颗粒
中咖啡因的质量控制和监测.
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DeterminationofContentofCaffeineinChildPediatricParacetamoland
AmantadineHydrochlorideGranulesbyHPLC
?YANHai-yan
(DepartmentofChemistryandChemicalEngineering,BaoiUniversityofArtsand
Sciences,Baoji721007,China)
Abstract:AmethodfordeterminationofcontentofcaffeineinChildPediatricParacetamolandAmantadine
HydrochlorideGranuleswasdescribedusingHPLC.TheseparationwasperformedonacolumnofEclipseXDB-
C18(4.6minx150mm,5肚
m),withmethanol:water(35:65)asmobilephaseataflowrateof1.0mL?
min_..Thedeteetionwavelengthwas275nmandtheinjectionvolumewas20”
L.Theresultsshowedthatcaf,
feineof15,
140mg?L—hadagoodlinearrelationship,theregressionequationforcaffeine
was一64.556+
71.885,R:0.9991,theaveragerecoverywas106.8,andRSD一
2.21.Thismethodisconvenient,accurate,
andreproducible.Therefore,itcanserveasanovelwaytodeterminethecontentofcaffeineinChildPediatric
ParacetamolandAmantadineHydrochlorideGranules.
Keywords:HPLC;ChildPediatricParacetamolandAmantadineHydrochlorideGranules;caffeine
(上接第88页)
[53VifiasP,CampilloN,Martinez—CastilloN,eta1.Comparisonof
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紫外分光光度法测定双酚S
曹桂萍,王蓓蓓,丁其晨,宗玲艳
(常州工学院化工系,江苏常州213022)
摘要:建立了测定双酚S的紫外分光光度法.在pH值为6.0的磷酸盐缓冲溶液中,双酚S浓度在4.8×10,
4.0×10,5tool?L一范围内与其吸光度值呈显着线性相关,相关系数为0.9999,相对标准偏差为0.12,检测限为4.0
×10tool?L-..该方法快速,灵敏,可用于常见样品中双酚S的测定.
关键词:紫外分光光度法;双酚S;测定
中图分类号:TQ657.32文献标识码:A文章编号:1672—5425(2010)10—0086,03