牛奶和奶粉中八种镇定剂残留量的液相色谱串联质谱测定

·514· J—our—nalo～fQiqiharUniversityofMedicine,2011,Voi．!!：型!：! 牛奶和奶粉中八种镇定剂残留量的液相色谱 一串联质谱测定 苏海滨 李百舸 吴鹏飞 娄振涛 赵 静 周 寅 宋文斌 【摘要】采用液相色谱一串联质谱仪，建立了牛奶和奶粉中乙酰丙嗪cetopromaizine、氯丙嗪ehlor- promazin、氟哌啶醇haloperidol、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪propionylpromazine、甲苯噻嗪xylazine、阿扎哌 隆azaperone及其代谢物阿扎哌醇azaperol和咔唑心安carazolol残留量的液相色谱～串联质谱测定方 法。结果明八种镇定荆在牛奶中添加水平0．10～0．50／zg，／kg到0．80～4．00t-g／kg，其回收率在 86．29％～92．49％之问，相对偏差在8．99％～20．56％之间；在奶粉中添加水平0．80～2．00pg／kg 到2．O～8．00pg／kg，其回收率在81．59％～97．49％之问，相对标准偏差在1．76％～16．70％之闻。八 种镇定荆在确定的添加范围内线性关系良好。八种镇定荆在牛奶中的方法检出限为0．1～O．5pg／kg， 在奶粉中的方法检出限为0．8～4．0肛g／kg。 【关键词】液相色谱一串联质谱牛奶奶粉 乙酰丙嗪氯丙嗪 氟哌啶醇 丙酰二甲氨基丙 吩噻嗪甲苯噻嚷 阿扎哌隆 阿扎哌醇咔唑心安残留量 Determinationofeighttranquillizersresiduesinbovinemilkandmilkpowder—LC—MS—MS SUHal—bin。eta1．(LiaoningQuarantineTreatmentGroupCo．Ltd．，Dalian，Liaoning116033，the P．R．China．) [AbstractlLC—MS～MSmethodwasestablishedforthedeterminationofeetopromaizineehior- promazin，haloperidol，propionylpromazine，xyiazine，azaperone，azaperolandcarazololresiduesinbo— vinemilkandmilkpowder．Theresultshowedthattheaveragespikedrecoveriesofeighttranquillizersat thespikedlevel0．10～0．50gg／kgtO0．80～4．00rtg／kgwerefrom86．29％～92．49％withrelative standarddeviations(RSDS)of8．99％～20．56％forbovinemilkandatthespikedlevel0．80～2．00肛g／ kgtO2．0～8．00}tg／kgwerefrom81．59％～97．49％withrelativestandarddeviations(RSDS)of 1．76％～16．70％formilkpowder．Theresultshowedagoodlinearelationship．Thelimitsofdetermina— tionofmethodforeighttranguillizerswerefrom0．10#g／kgto0．50肚g／kgforbovinemilkand0．8,g／ kgto4．0／．￡g／kgformilkpowder． [KeywordslLC—MS—MSMilkMilkpowderCetopromaizineChlorpromazineHaloperi— dolPropionylpromazineXylazineXylazineAzaperolResidue 乙酰丙嗪、氯丙嗪、氟哌啶醇、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、甲 苯噻嗪、阿扎哌隆、阿扎哌醇、咔唑心安是一类广谱镇定剂药 物，该类药物作为麻醉剂，止痛、肌肉松弛作用，抗精神病、抑 制躁狂、兴奋、跳动、镇吐作用而广泛地用于动物。大量的药 物成份潜伏于牛奶和奶粉中o-z]并被人吸收，而这类药物有 副作用，可导致过敏性反应，引起体位性低血压、心悸、运动障 碍、肝损害、恶性综合征，诱变致癌。因此，在世界各国对食用 动物中镇定剂类药物残留量均有严格的限量要求。所以，建 立一种高灵敏度的溯定牛奶和奶粉中镇定剂类药物的残留定 量和定性方法是十分必要的。 测定镇定剂类药物在动物组织中的残留的分析方法比较 多．分析方法主要有以下几种：高效液相色谱法、气相色谱法、 气榴色谱一质谱法、液相色谱一质谱法、液相色谱一串联质谱 法、薄层色谱法、分光光度法、放射免疫测定法、毛细管电泳法 等。丽测定牛奶和奶粉中镇定剂类药物残留的方法较少，主 要只限于高效液相色谱法Ea-s]。该研究采用r高效液栩串联 质谱法方法，其灵敏度高．选择性好，操作简单、快速，结果准 确。八种镇定剂在碱性和酸性条件对特丁．基甲醚的不同特 作者单位：辽宁检疲处理集团有限公司f大连) 邮 编116033收稿日期2011--01--07 性，进行提取和净化，样液蒸干后，用流动相定容，液相色谱～ 串联质谱测定。 阿扎囔● G 甲苯一嚷 嘧观，各，哦r 鼻骧睫■ 肺瞳心安 帚 ，o《呲oo吖&矾 弼扎囔一(两扎眶曩代谢物) 丙曩=甲氟基丙吩●嚷 ． il1八种镇定荆的结构式 ◇ p 万方数据 壹壅堕筌堡堂堡堂堡!!!!篁簦丝鲞箜!塑 1 实验部分 1．1 仪器 液相色谱一串联四极秆质谱仪，配有电喷雾的离 子源；电子天平：感蹙0．1mg和0．01g}离心机：最大转速为 10000r／min；离心管：锥形底玻璃离心管；15Inl和IOml具 塞；锥形底聚丙烯离心管；50ml具螺旋盏；过滤器：聚四氟乙 烯过滤器；0．2丛m×13IIIlTI、尼龙薄膜过滤器}0．2tLm× 47mm、液体分配器；1～10ml和5～50ml、微量移吸器；10～ 100弘l和100～1000弘l、流动相过滤装置；氮气浓缩仪；高速 涡流混合器；振荡器；一次性移液管；酸度计：浏量精度为士 0．02unit；超声波仪；一次性注射器：1ml}试样瓶：2．0ml。 1．2试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯。承 为GB／T6682规定的一级水。 乙腈：色谱纯；甲醇：色谱纯；无水乙醇：色谱纯；盐酸：优 级纯；特丁基甲醚；氢氧化钠；氢氧化钠溶液：5mol／L；磷酸二 氢钾；甲酸铵；甲酸：色谱纯；磷酸二氢钾溶液：1mol／L，pH：： 3；甲酸铵缓冲液：0．1mol／L，pH=4}甲酸铵缓冲液： 0．01mol／I。。pH=4；流动相A：o．01mol／L甲酸铵缓冲液， pH=4，通过0．2弘m过滤器过滤；流动相B：乙腈通过0．2弘m 过滤器过滤；流动相C：甲醇通过0．2“m过滤器过滤；混合流 动相?将70m1流动相A，15ml流动相B以及15ml流动相C 混合。 镇定剂标准物质： 乙酰丙嚎·马来酸，纯度≥99％；阿扎哌隆，纯度≥99％； 昨唑心安，纯变：99％；氯丙嗪·盐酸，纯度：99％；氟哌啶醇， 纯度≥99％；丙酰二甲氨基丙吩噻嗪·盐酸，纯度：98％；甲苯 噻嗪·盐酸．纯度：99％；阿扎哌醇，浓度10．0fJg／ml(甲醇)。 八种镇定剂标准溶液 乙酰丙嗪、阿扎哌隆、咔唑心安、氯丙嚷、氟哌啶醇、丙酰 二甲氨基丙吩噻嗪、甲苯噻嗪标准储备溶液：0．10mg／ml。称 取适量的上述标准物质，分别用无水乙醇，配成0．10mg／ml 的标准储备液。储备液避光在2～4℃条件下贮存。每年配 制一次。 阿扎哌醇标准储备溶液：1．0弘g／m!。准确移取1．0ml阿 扎哌醇标准液于loml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混 匀，配成1．0g／ml的标准储备液。储备液避光在2～4℃条 件下贮存。每年配制一次。 八种镇定剂混合标准工作溶液 根据每种镇定剂及其代谢物的灵敏度和仪器线性范围用 空白样品提取液配成不同浓度(ng／m1)的混合标准工作溶 液。在2～4℃条件下避光贮存。 注：称取标准物的质量是按纯度和含盐量修正过的质量。 1．3测定步骤 1．3．1提取1)牛奶样品，称取牛奶试样2．oog(精确到 0．01g)．放入50ml聚丙烯离心管中。加入200pl乙腈进行涡 流混合。混合后加入400pl5mol／L氢氧化钠溶液，并进行涡 流混合30s。在(80士5)℃水浴中放置1h。在此期间，要对 每个测定样品进行两次涡流混合。1h后，将样品狄水浴中取 出并冷却至室温。加入12ml特丁基甲醚，置于振荡器上高 速振荡15rain，离心15rain(转速为6000r／rain)。吸出上清 ·515· 液，将特丁基甲醚定鼍转移列干净的15m1的玻璃离心管内， 待净化。2)奶粉样品，称取纯奶粉样品0．25g(精确到 0．01g)，放入50ml聚丙烯离心管中，加入1．75g水超声溶 解得到复原乳，加入200扯l乙腈，以下步骤同牛奶样品。 1．3．2净化在上述15ml离心管中加入1mol／L磷酸二氢 钾溶液(pH=3)3ml，振荡10mln，离心10min(6000r／rain)。 将特丁基甲醚层吸出弃去。在磷酸盐溶液中加入2ml特丁 基甲醚，振荡5min，离心5rain(6090r／rain)，吸出特丁基甲 醚层弃去。然后再在磷酸盐缓冲溶液中加入2ml特丁基甲 醚重复上述步骤。加入1ml5mol／L氢氧化钠溶液摇匀后加 入10ml特丁基甲醚．振荡15min，离心5rain(6000r／rain)。 定量吸取特丁基甲醚转移到一个干净的10ml的离心管中。 在40℃条件下用氮吹仪蒸发至干。在浓缩至干的提取物中 加入i000站I混合流动相溶液，进行涡流混合，超声处理 10rain。用0．z似m×13mm的聚四氟乙烯注射式过滤器过滤 样液，将样液转移列试样瓶中，供液相色谱一串联质谱测定。 1．3．3色谱条件1)液相色谱条件。色谱柱：Inertsil0DS --3，5“m150mm×2．1ram(id)，或相当者；柱温：35℃；进样 量：20扯l；色谱柱总流最：200pl／min流动相及梯度见表1。 裘1流动相及梯度 2)质谱条件。离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子 扫描；检测方式：多反应检测(MRM)；电喷雾电压(IS)： 5000V；雾化气压力(CASI)：482．6kPa气帘气压力(CUR)： 68。9kPa；辅助气压力(CAS2)：482．6kPa；离子源温度 (TEM)：700℃；接口加热(ihe)：ON；定性离子对、定量离子 对，采集时问(Dwell)，去簇电压(DP)、碰撞气能量(CE)、入口 电压(EP)，及碰撞室出口电压(CXP)见表2。 1．3．4液相色谱一串联质谱测定1)定性测定。按照液相 色谱一串联质谱测定条件进行样品溶液测定。如果检出的色 谱蜂的保留时间与綦质标准中物质相一致，并且所选择的离 子均出现，选择1个母离子和2个以上子离子，样品谱图中定 性离子的相对丰度与浓疫接近的基质标准溶液谱图中对应的 定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表3规定要的范 围，则可判定为样品中存在对应的待测物。 2)定量测定。用混合标准工作溶液分别进样，以峰面积 为纵坐标，工作溶液浓度为横坐标，绘制标准工作曲线，用标 准工作曲线对样品进行定髦．样晶溶液中镇定剂及其代谢产 物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述的色谱条 件和质谱条件下，八种镇定剂的参考保留时间见表4。八种 镇定剂的标准总离子流图见图2。 万方数据 ·516· JournalofQiqiharUniversityofMedicine,2011,Vo[．32,No．4 表2八种镇定剂的质谱参数 名称 定性离子对amu定量离子对amu采集时间／ms 去簇Eg压／V碰撞气能量／V人口电压V出口电压V ---__-——-___-_-—_●●_____________-____-———————————-—-_—————————————————————————————————————————————H__-_-__-__-—-————-——————__--_———_-————————————●_———————————————__●一——’——————-—_—_一 乙酰丙嗪 327．40／58．20327．40／58．20200 ， 61 68 5 10 (aeetopromaizine) 氯丙嗪 (chlorpromazine) 氟哌啶醇 (haloperid01) 丙酰二甲氨 (propionylpromazine) 甲苯噻嚷 (xylazine) 阿扎哌隆 (azaperone) 阿扎哌醇 (azaper01) 咔唑心安 (carazol01) 327．40／86．20 319．30／58．20 319．30／86．20 376．40／165．40 376．40／122．90 341．20／58．20 341．20／86．30 221．30／90．10 221．301164．40 328．40／121．00 328．4／147．10 330．30／121．oo 330．301149．10 330．30／312．20 299．50／116．20 299．50／222．40 327．40186．20 319．30／58．20 319．30／86．20 376．40／165．40 376．401122．90 341．20／58．20 341．20／86．30 221．30／90．10 221．30／164．40 328．40／121．00 328．4／147．10 330．30／121．00 330．30／149．10 330．30／312．20 299．50／116．20 299．50／222．40 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 68 66 30 35 57 59．8 30 33 38 30 30 35 40 25 30 30 5 lO 10 11 11 10．0 10．6 11 11 11 11 11 11 11 11 11 15．6 10 7 11 ll 9．7 15 8 13 10 10 12 12 10 11 6 裹3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 (％) 表4八种镇定剂参考保留时问 名称 气曼i时n)问 名称 紫望～mlnJ 甲苯噻嗪 5．12 氟哌啶醇 15．90 阿扎哌醇 9．21 乙酰丙嚷 16．56 咔唑心安 11．38 丙酰二甲氨基丙吩噻嗪 18．84 阿扎哌隆 13．01 氯丙嗪 19．74 图2八种镇定剂标准物质总离子流圈 甲苯噻嗪5．12min，阿扎哌醇9．21min，咔唑心安 11．38min，阿扎哌隆13．01min，氟哌啶醇15．90min，乙酰丙 嗪16．56rain，丙酰二甲氨基丙吩噻嗪18．84min，氯丙嗪 19．74min。 1．4结果计算试样中每种镇定剂及其代谢物残留量利用 数据处理系统计算或按式(1)计算： X=cxVx而而1000⋯“(1) 式中： X--试样中被测组分残留量，单位为微克每千克(pg／kg)； C一从标准曲线上得到被测组分溶液的浓度，单位为纳克每 毫升(ng／m1)； V一样品溶液定容体积，单位为毫升(m1)； m一样品溶液所代表试样的质量，单位为克(g)。 注：计算结果应扣除空白值。 表5八种镇定剂添加浓度及其回收和净化结果裹 【n=10) 名称嚣，翠篡翠 氯丙嚷 氟哌啶醇 丙酰二甲氨基 丙吩噻嚎 甲苯噻嚷 阿扎哌隆 阿扎哌醇 咔唑心安 1 2 4 0．5 1 2 4 0．1 0．2 0．4 O．8 0．5 1 2 4 0．25 0．5 1 2 0．2 0．4 0．8 1-6 0．15 0．3 0．6 1．2 0．5 1 2 89．2 89．93 91．94 89．61 86．29 89．39 90．29 87．6 89．28 86．9 90．72 88．5Z 91．39 92．37 90．38 89．9 91．38 92．12 90．59 89．35 88．15 90．07 90．26 91．44 91．45 87．11 87．42 89．72 88．58 92．49 8 91．68 12 90．3 16 94．13 4 90．71 8 83．68 12 84．II 16 88．61 O．8 88．79 1．6 93．52 2．4 88．02 3．2 87．91 4 92．18 8 90．41 12 87．24 16 87．54 2 90．62 4 86．98 6 87．52 8 81．59 1．6 90．8 3．2 85．89 4．8 86．05 6．4 94．65 1．2 85．15 2．4 89．98 3．6 93．36 4．8 97．45 4 92．87 8 91 12 88．04 1 11：!! !! !!：!! 钉∞∞阳∞“以跖踮∞∞∞∞∞昭昭 万方数据 壹壹堕签匿堂堕堂亟!!!!笙筮!；鲞蔓!墅 2结果与讨论 2．1提取净化条件的选择本研究方法，在萃取净化方面主 要参照文献HHADeterminativeandConfirmatoryMethodfor TranquillizerResiduesinPorcineKidneyandMuscleTissues byLiquidChromatography——MassSpectrometry”2004／09 VersionTRNQ—SP01CanadianFoodInspectionAgency SaskatoonLaboratoryCentreforVeterinaryDrugResidues． 的方法。本研究方法在萃取和净化方面选择采用5mol／L氢 氧化钠溶液消化样品．特丁基甲醚萃取八种镇定剂，加入 pH=3的磷酸二氢钾溶液使镇定剂反萃取到酸性介质中，使 用特丁基甲醚与酸性介质多次液一液分配达到净化目的，再 次加入5mol／L氢氧化钠溶液使肇取液变为碱性，再用特丁 基甲醚萃取，浓缩，定容。这样一个萃取净化的操作流程方法 简单、快捷、不易丢失。我们选用了牛奶和奶粉空白样品．分 · 517· 别选定了4个水平添加实验。其测定结果见表5。说明提取 和净化的回收率良好。 2．2奶粉样品的处理对于奶粉则按照奶粉与水的比例调 制成复原乳后与牛奶一样进行测定操作C9-zo]。 2．3质谱条件的优化采用注射泵直接进样方式，以5tAi rain将每种100ng／ml的八种镇定剂标准溶液分别注射入离 子源中，在正离子检测法方法下对每种八种镇定剂进行一级 质谱分析(Q1扫描)，得到每种八种镇定剂的准分子离子峰进 行二次质谱分析(子离子扫描)，得到碎片离子信息，然后再对 得到的每种八种镇定剂的二级质谱对去簇电压(DP)、碰撞气 能量(E)、电喷雾电压、雾化气和气帘气压力进行优化．使每 种八种镇定剂的分子离子与特征碎片离子产生的离子对强度 达到最大时为最佳，得到每种八种镇定剂的二级质谱图。见 图3。 ●o■一—I d■。Ⅵ●_一 圈3八种镇定剂二级质谮图 从图3中选择每种八种镇定剂的定性离子对和定量离子 对，将液相色谱仪和串连四级杆质谱仪联机，再对离子源温 度，辅助气流速度进行优化。使样液中每种八种镇定剂的离子 化效率达到最佳。八种镇定剂选定的质谱条件如下。 a)扫描方式： 正离子扫描； b)检测方式： 多反应检测(MRM)f c)电喷雾电压(IS)： d)雾化气压力(CASI)： e)气帘气压力(CUK)： f)辅助气压力(CAS2)： g)离子源温度(TEM)： h)碰撞气(CAD)： i)监测离子对、碰撞气能量和去簇电压： 5000V； 482．6kPa； 68．9kPa} 482．6kPa； 700℃： 8．00N2f 2．4线性范围和测定低限根据八种镇定剂的灵敏度，用空 白样品按照分析方法配制成一系列基质标准工作液，在选定 的色谱条件和质谱条件下进行测定，进样量20弘l，用峰面积 对基质标准工作溶液中被测组分的浓度作图．其线性范围，线 性方程和线性相关系数见表6。 牛奶中氟哌啶醇的最小检出限(LOD)为0．10pg／kg，阿 扎哌醇的最小检出限(LOD)为0．15pg／kg，阿扎哌隆的最小 检出限(LOD)为0．20pg／kg，甲苯噻嗪的最小检出限(LOD) 为0．25pg／kg，乙酰丙嗪、氯丙嗪、丙酰二甲氨摹丙吩噻嚎、咔 唑心安的最小检出限(LOD)为0．50弘g／kg。氟哌啶醇的定量 限(LOQ)为0．30弘g／kg，阿扎哌醇的定量限(LOQ)为 o．45pg／kg，甲苯噻嗪的定量限(LOQ)为0．75gg／kg，阿扎哌 隆的定量限(LOQ)为0．60pg／kg，咔唑心安、乙酰丙嗪、丙酰 二甲氨基吩噻嚷、氯丙嗪的定量限(LOQ)为1．50gg／kg。 奶粉中氟哌啶醇的最小检出限(LOD)为O，80弘g／kg，阿 扎哌醇的最小检出限(LOD)为1．20gg／kg，阿扎哌隆的最小 检出限(LOD)为1．60弘g／kg，甲苯噻嗪的最小检出限(LOD) 为2．00弘g／kg，乙酰丙嗪、氯丙嗪、丙酰二甲氨基丙吩噻嗪、咔 唑心安的最小检出限(LOD)为4．00gg／kg。氟哌啶醇的定量 限(LOQ)为2．40pg／kg，阿扎哌醇的定量限(LOQ)为3．60 gg／kg。甲苯噻嗪的定量限(LOQ)为6．0099／kg．阿扎哌隆的 定量限(LOQ)为4．80pg／kg．咔唑心安、乙酰丙嚷、丙酰二甲 氨基吩噻嚎、氯丙嗪的定量限(LOQ)为12．00肛g／kg。 2．5 方法的回收率和精密度用不含八种镇定剂的牛奶和 奶粉样品进行添加回收率精密度实验，样品添加不同的浓度 标准溶液后，摇匀，放置2小时，使标准品被样品充分吸收，然 后按本方法进行提取和净化，用液相色谱一串联四级杆质 谱测定。本方法在牛奶中添加水平0．10～0．50肛g／kg到 0．80～4．00gg／kg，其回收率在86．29％～92．49％之问， 相对标准偏差在8．99％～20．56％之间；在奶粉中添加水 平0．80～2．00弘g／kg到2．0～8．00pg／kg，其回收率在 万方数据 -518· 舒血宁对严重创伤病人外周血中CD4、CD8、CD。52 活性的影响 周 峰 汪明星 李洪飞 【摘要】目的 研究舒血宁对严重创伤病人外周血中CD．、CD8、CD。s2活性的影响，探讨CD4、 CDh、CDm的活性变化在严重创伤转归、预后判断及干预治疗方面的意叉。方法研究时象为我院 2008年7月以来收治的严重创伤病人117例，对照组64例给予常规治疗，试验组53倒加用舒血宁 20ml／d治疗。于3d、7d两个时间点上，采用S—P(链亲和素一过氧化物酶)一步法测定患者外周血中 CD4、CD8的活性；应用酶联免疫吸附法和流式细胞仪检测外周血中CD。。。的表达水平。结果试验组 较对照组患者的CD4细胞数明显增多(P<0．01)，C耽细胞数无明显变化(P>0．05)，CD4／CD8比值 明显增加(尸<0．05或P25分)，年龄、性别和体重不限。舒血宁 购自江苏扬子江药业集团，淋巴细胞亚群检测试剂盒购自南 作者单位：徐州医学院第二附属医院骨科(江苏) 通讯作者：周峰，E--mail：xztigerzhoufeng@163．corn 邮 编221006．收稿日期201I--01～11 京建成生物工程研究所；酶联免疫检测仪(华东电子管厂)；流 式细胞仪(FCM)(BeckmanCoulter)。 1．2方法将117例病人随机分为对照组64例、试验组53 例。对照组患者入院后给予常规治疗，试验组患者在常规治 疗的基础上加用舒血宁，剂量为20ml／d，疗程为7天。于3 天、7天两个时间点抽取患者空腹外周血，用于检测。 1．3 免疫学指标的检测 1)外周血中CD4、CD8的活性测定 用S—P一步法；参照试剂盒说明书进行操作。2)T细胞表面 CDls：的检测：先在试管中加入2ml淋巴细胞分离液(上海试 剂二厂)，再将抽取的外周血等量缓慢加入到试管中，2000 rpm离心20min；用细长毛细吸管伸之呈云雾状的中间层细 胞轻轻全部吸取，即提取出所有单个核细胞，用10％FCS(杭 州四季青)和RPMll640调整细胞浓度为1×107／ml待测；准 备无菌塑料离心管，标记后分别加入CD‘单抗和CD8单抗各 81-59％～97．49％之间，相对标准偏差在1．76％～16．70％之间。 裹6八种镇定剂的线性范围、线性方程和相关系数 参 考文 献 113K·H·Blacker，B·J·Weinstein，G·L·EUman，AmJpsve— htair119(1962)178—179 [2]D·H·Wiles．M·W·Orr，T·K01．Kowska，BrJClinpharm， 5(1978)272—273 [3]C·S·Smith，S·L·Morgan，S·V·Greene，JChromatogra— phy，423(1987)207—216 [4]G·Tamai，H·Yoshida，H·Lmai，JChromatography，423(1987) 163一168 [5]TadashiOhkabo，RitsukoShimoyanaandKazunohaSugawara，J Chromatography，614(1993)328—332 [61。ADeterminativeandConfirmatoryMethodforTranquillizerResi— duesinPorcineKidneyandMuscleTissuesbyLiquidChromatogra— phy--MassSpectrometry"2004／09VersionTRNQ--SPOLCanadi— artFoodInspectionAgencySaskatooBLaboratoryCentreforVeteri— naryDr旭Residues． 万方数据