21梅毒特异性试验( TPPA ) 东莞常平医院
免疫实验室
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-21
梅毒特异性试验( TPPA )
版序:2005-1
页码:第1 页,共2 页
[原理]
用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒,此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应。
[试剂厂家]
富士瑞必欧株式会社 日本东京
[试剂组成]
(1)“A”溶解用液
(2)“B”血清稀释液
(3)“C”致敏颗粒(冻干):用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀
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东莞常平医院
免疫
文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-21
梅毒特异性试验( TPPA )
版序:2005-1
页码:第1 页,共2 页
[原理]
用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒,此致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应。
[试剂厂家]
富士瑞必欧株式会社 日本东京
[试剂组成]
(1)“A”溶解用液
(2)“B”血清稀释液
(3)“C”致敏颗粒(冻干):用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀
(4)“D”非致敏颗粒(冻干):用前30分钟按规定量加“A”液溶解混匀
(5)“E”阳性质控血清
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内稳定。
[标本的收集与处理]
标本为无溶血血清。
[操作步骤]
孔 号 1 2 3 4
血清稀释液“B”(ul) 100 25 25 25
------》 ------》 ------》 -----》弃去25ul
血清标本(ul) 25 25 25 25
标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40
加非致敏颗粒“D”(ul) --- --- 25 ----
加致敏颗粒“C”(ul) ----- ----- ----- 25
血清最终滴度 1:40 1:80
置微型振荡器振荡30秒,放在湿盒里,室温2小时后观察结果。
[结果判断]
颗粒凝集覆盖于整个孔底,可呈多边形膜状,边缘粗糙......阳性2+--4+
颗粒凝集呈多边形粗糙大环状 ...... 阳性1+
颗粒浓集呈边缘光滑的小环状 ...... 可疑+-
颗粒聚集在孔中央,光亮,边缘光滑 ...... 阴性-
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文件编号:
DGCPH-IMN-SOP-01-21
梅毒特异性试验( TPPA )
版序:2005-1
页码:第2 页,共2 页
[吸收试验]
孔内标本与非致敏和致敏颗粒均产生凝集者,标本需作下列重吸收试验
(1)加 0.95ml 非致敏颗粒溶液于小试管内.
(2)加入50ul血清,充分混匀,置室温吸收30分钟以上.
(3)离心2000rpmX 5分钟,吸取上清液50ul加入孔3.
(4)自孔4--孔10各加血清稀释液"B"25ul.
(5)自孔3吸25ul至孔4,混匀后吸入25ul至孔5......如此稀释至孔10,弃去25ul.
(6)按定量试验法加入"D"和"C",振荡30秒,置有盖湿盒室温2小时,观察结果.
[质量控制]
为确保测试结果准确可靠,每批测试均应放置阴阳性质控血清与被检样品同时测试,用以检查试剂性能。
[临床意义]
该试验用于检测人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体的存在与否,对评估受检人是否曾经感染过梅毒螺旋体有较高的特异性。但由于该抗体可在被感染人的机体中存在较长的时间(长达五年),故不适宜用于疗效的观察。
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