研究维生素C测定方法2

研究维生素C测定方法2 十六、L-抗坏血酸(维生素C)测定试剂盒(酶学方法) 1、应用于食品，饮料及生物制品检测。此方法用于检测水果和蔬菜(如马铃薯)，水果和蔬菜产品(如西红柿酱、泡菜、果酱、果汁)，婴儿食品，啤酒，饮料，流食，粉状和烘烤剂，肉产品，乳制品，葡萄酒，还有动物饲料，医药品(如维生素配制、阵痛药、退烧药)和生物样品中的L-抗坏血酸(维生素C)。 3、分析物 L-抗坏血酸不定量的分布于动物和植物中。人类不能自身生产L-抗坏血酸，因此必须由外源(vitamin C)提供。一般情况下来源于水果和蔬菜中，出于技术原因，L-抗坏血酸曾被用于食品工业中的抗氧化剂。它是一种相对敏感的物质，L-抗坏血酸的检测非常适用于从原始水果和蔬菜中加工食品的质量评定。 L-抗坏血酸用于医药品生产中的组成部分，如维生素产品和阵痛药，另外，它还用于动物饲料添加剂中。 4、原理 L-抗坏血酸 (x-H2) + MTT+ PMS—> dehydroascorbate (x) + MTT-formazan + H+X L-抗坏血酸 + ? O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX 5、特异性 在给定的条件下，此方法特别针对于L-抗坏血酸。合成的D-阿拉伯抗坏血酸/阿拉伯糖型抗坏血酸能作为抗氧化剂，也能反应，但反应速度较慢。 6、灵敏度 测定灵敏度为0、005个吸亮度单位，样品体积为1、600ml，此相当于0、1mg/l样品溶液中的L-抗坏血酸浓度。0、015个吸亮度单位的差异能造成0、3 mg/l检测限，样品最大体积为1、600 ml、。 7、线性 测定的线性范围为0、5 ugL-抗坏血酸(0、3mgL-抗坏血酸/l样品溶液体积为1、600ml)到20 ugL-抗坏血酸(0、2gL-抗坏血酸/l样品溶液体积为0、100ml) 8、精密度 在用一个样品做重复实验时，可能会产生0、005-0、010个吸亮度单位的差异。标准的相对偏差(变异系数)大约为1-3%。当分析检测数据时，要考虑到L-抗坏血酸的水溶液稳定性较差，尤其是重金属离子或氧存在时。 9、干扰及错误来源 粮食的成分不经常干扰实验。高浓度的酒精和D-山梨酸醇能降低反应速度，大量的亚硫酸盐必须通过添加甲醛来去除。醋酸抑制酶AAO。金属和 亚硫酸盐离子可以导致L-抗坏血酸的自发分解。 十八、库仑滴定法 1、原理:库仑滴定法属于恒电流库仑分析。是在特定的电解液中，以电极反应产物为滴定剂(电生滴定剂，相当于化学滴定中的标准浓液)与待测物质定量作用，借助指示剂或电位法确定滴定终点。 2、基本依据,,法拉第电解定律:电解时，电极上发身化学反应的物质质量与通过电解池的电量Q成正比 即: m=MQ/zF = MI t /zF 3、化学反应:阴极反应: 2H+2e-=H2 阳极反应: 2I-=I2+2e- 4、终点指示: (1)化学指示剂,,I2;(2)电位法;(3)双铂极电流指示法 5、计算式:Wvc=MvcQ/zFm样式中: F——法拉第常数(96487C) Z---电极反应中转移的电子数注意:使电解效率100, 6、优点: 1)无需标准化的试剂溶液，免去了大量的标准物质的准备工作(配制，标定) 2)只需要一个高质量的供电器，定时器，小铂丝电极，且易于实现自动化控制 3)若电流维持一个定值，可大大缩短了电解时间 4)电量容易控制及准确测量;方法灵敏度，准确度较高 5)滴定剂来自电解时的电极产物，可实现容量分析中不易实现的滴定过程，如Cu，,Br2,Cl2产生后立即与待测物反应。 7、缺点(难点): 电解过程没有副反应和漏电现象，即使电解电极上只进行生成滴定剂的反应，且电流的效率是100, 8、注:电流效率,I样?I总,I样?(I样，I容，I杂) 因为:实际电解过程中存在影响电流效率的因素，如，杂质，溶剂，电极自身在电极上的反应等) 除此之外，还有双光束剩余染料差减比色法，2，6—二氯靛酚钠动力学分光亮度法、聚中性红修饰电极方法、示波溴量法、流动注射化学发光抑制法、磷钼钨杂多酸作显色剂快速检测方法、溶氧测定装置测定水果蔬菜中抗坏血酸含量的方法等。