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尿液干化学分析仪及临床应用

2019-12-06 41页 ppt 4MB 3阅读

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尿液干化学分析仪及临床应用尿液干化学分析仪及临床应用检测项目8项检测项目包括蛋白、葡萄糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、隐血和亚硝酸盐9项检测项目增加尿白细胞检查10项检测项目增加尿比密检查11项检测项目增加维生素C检查一、尿液干化学分析仪测定原理  采用球面积分仪R(%)=Tm.Cs/TsCm×100%R(%)为反射率Tm为试剂垫对测定波长的反射强度Ts为试剂垫对参考波长的反射强度Cm为较准垫对测定疵长的反射强度Cs为校准对参考波长的反射强度  二、干化学试带测试   项目及原理尿pH  pH指示剂法在测试膜块中含有甲基红(pH4.6~6....
尿液干化学分析仪及临床应用
尿液干化学分析仪及临床应用项目8项检测项目包括蛋白、葡萄糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、隐血和亚硝酸盐9项检测项目增加尿白细胞检查10项检测项目增加尿比密检查11项检测项目增加维生素C检查一、尿液干化学分析仪测定原理  采用球面积分仪R(%)=Tm.Cs/TsCm×100%R(%)为反射率Tm为试剂垫对测定波长的反射强度Ts为试剂垫对参考波长的反射强度Cm为较准垫对测定疵长的反射强度Cs为校准对参考波长的反射强度  二、干化学试带测试   项目及原理尿pH  pH指示剂法在测试膜块中含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚草蓝(pH6.0~7.6)两种指示剂,适量配伍后可反映pH4.5~9.0的变异范围尿pH  结果有二重含义①反映体内酸碱代谢状态②对尿蛋白、尿比密的测定膜块区反应的干扰作用尿比密(SG)多聚电解质离子解离法尿比密的试纸中含有多聚电解质甲乙烯酰马来酐、溴麝香草酚蓝指示剂和缓冲液,试纸浸入尿液后高分子电解质的羧基与尿液中电解质反应,放出H+,使溴麝香草酚蓝指示剂变色。注意事项尿液标本必须新鲜,强酸强碱尿液都会影响试剂带测定尿比重。当尿液pH≥7.0时,应该在干化学法测定结果的基础上增加0.005作为补偿。01尿蛋白是两性蛋白质,对干化学法的影响最大02干化学法不宜用于新生儿尿比重检查。03只能用于过高或过低尿比重病人的筛选,对于病理性特别是系统观察的病例仍以折射仪法为佳。04尿液蛋白检查   健康成人尿液中的蛋白含量为30-130mg/24h  尿蛋白质(PRO)蛋白质误差原理膜块中主要含有酸碱指示剂(溴酚蓝)、枸橼酸缓冲系统和面活性剂,当pH3.2时,溴酚蓝产生阴离子与带的蛋白质(主要是白蛋白)结合后发生颜色的变化,这种颜色改变的幅度与白蛋白含量成正比。注意事项本法主要测定白蛋白,而对球蛋白不敏感。1尿液标本必须新鲜。当pH<3.0或pH>9.0时,可致假阴性或假阳性;病人服用奎宁、奎宁丁和嘧啶等药物引起强碱尿,从而导致假阳性。2青霉素对干化学法产生假阴性。3尿液存放时间过长而致细菌生长繁殖或标本内含有其他分泌物或含有较多细胞成分时可致假阳性。4尿葡萄糖(GLU)葡萄糖氧化酶法膜块中含有葡萄糖氧化酶(GOD)、过氧化物酶(POD)和色原色原①碘化钾②邻甲联苯胺葡萄糖氧化酶葡萄糖醛酸+过氧化氢H2O2过氧化物酶新生态氧色原(邻甲苯胺)邻甲苯胺蓝葡萄糖注意事项1测定的结果受时间和温度的影响。试剂带保存时应保存于阴凉、干燥处。3高浓度酮体尿可引起假阴性、高比重尿可降低试带的敏感性。2尿中含有还原性物质如维生素C可致假阴性。尿酮体检查(KET)亚硝基铁氰化钠,与尿液中的乙酰乙酸、丙酮发生紫色反应不与β-羟丁酸起反应。亚硝基铁氰化钠法注意事项尿标本必须新鲜,酮体的挥发或分解,结果偏低。1本法不与β-羟丁酸起反应。2存在个体差别。3尿胆红素测定(BIL)在强酸性介质中直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应呈紫红色偶氮反应法注意事项123尿标本避免阳光照射,否则胆红素可氧化成胆绿素。尿含高维生素C和亚硝酸盐时可引致假阴性。尿含氯丙嗪,盐酸偶氮吡啶的代谢产物时可致假阳性。尿胆原测定(URO)       尿胆原与重氮化合物的偶联反应在强酸条件下尿胆原和对二甲氨基苯甲醛发生醛化反应,生成樱红色的缩合物。注意事项尿标本避免阳光照射,否则尿胆原氧化成尿胆素。预先给患者服用碳酸氢钠碱化尿液,收集午后2-4h尿标本,可提高检出率。对阻塞性黄疸患者,不宜用本法测定。123(八).亚硝酸盐(NIT)               膜块中含对氨基苯砷酸和1,2,3,4-四氢苯喹啉-3酚。亚硝酸盐还原法硝酸盐亚硝酸盐细菌亚硝酸盐,可将对氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,后者与1,2,3,4-四氢并喹啉-3酚偶联产生红色*正常人尿液中含有硝酸盐,尿液中有大肠埃希菌感染增殖时,将还原为,可将膜块中对氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,后者与1,2,3,4-四氢并喹啉-3酚偶联使膜块产生红色。[注意事项]23高比重尿含大量维生素C,使用利尿剂,抗菌素可致假阴性陈旧尿、污染尿、色素尿,可致假阳性尿亚硝酸盐有三个条件1)尿路感染细菌必须有硝酸盐还原酶2)尿液中含适量硝酸盐3)尿液在膀胱中停留时间>4h  [临床意义]泌尿道感染常为阳性。结合显微镜检查和细菌培养可提高对泌尿道感染的确诊率。白细胞检查(LEU)       吲哚酚酯特异性酯酶吲哚酚重氮盐紫色缩合物+酯酶法膜块中含有吲哚酚酯和重氮盐注意事项尿液标本必须新鲜尿液中甲醛或胆红素或某些药物时,可产生假阳性尿蛋白>5g/L,先锋霉素等药物时,可致结果偏低。本法只能测中性粒细胞,不与单核细胞、淋巴细胞反应尿血红蛋白、尿红细胞检查(BLD)血红蛋白类过氧化酶法膜块中主要含有过氧化氢茴香素或过氧化氢烯枯和色原(如邻甲联苯胺)*其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茴香素或过氧化氢烯钴分解出[0],后者能氧化有关色原(如邻甲联苯胺)使之呈色。过氧化氢茴香素或过氧化氢烯钴血红蛋白过氧化氢酶样活性新生态氧色原显色注意事项尿中含有不耐热的酶、肌红蛋白或菌尿可引起假阳性。大量维生素C可产生假阴性。不同厂家或不同型号的试剂带敏感度不同,使用时必须注意批间差。干化学法既可与完整的红细胞反应又能测定游离的血红蛋白量。  123总结*正常人尿液中含有硝酸盐,尿液中有大肠埃希菌感染增殖时,将还原为,可将膜块中对氨基苯砷酸重氮化而成重氮盐,后者与1,2,3,4-四氢并喹啉-3酚偶联使膜块产生红色。*其原理为尿液中红细胞内的血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化氢茴香素或过氧化氢烯钴分解出[0],后者能氧化有关色原(如邻甲联苯胺)使之呈色。
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