益智仁盐炙对豚鼠膀胱逼尿肌活动影响的研究

益智仁盐炙对豚鼠膀胱逼尿肌活动影响的研究 作者:黄勤挽，胡昌江，李兴华，李文兵，余 凌英，谢秀琼，杨婧 【摘要】 目的观察益智仁盐炙后对豚鼠膀胱逼尿肌收缩活动的影响 并探讨其作用机理。方法将膀胱逼尿肌肌条置于灌流肌槽内，采用分别 加兴奋剂和累计加药物的方法, 观察肌条的收缩活动。结果益智仁和盐 益智仁剂量依赖性对乙酰胆碱引起的膀胱逼尿肌兴奋具有显著的拮抗作 用，可降低肌条收缩的平均张力，且盐炙品效果优于生品。结论益智仁 和盐益智仁作用膀胱的靶点可能是膀胱逼尿肌的M受体，具有类似M受 体阻断剂的作用，盐炙后作用更强。 【关键词】 益智仁; 盐炙; 膀胱逼尿肌; 收缩活动 Abstract:ObjectiveTo study the effect of the crude Alpiniae oxyphyllae Fructus(CAOF)and the stir-heated Alpiniae oxyphyllae Fructus(SAOF)on contractile activity of isolated bladder detrusor muscle strips of guinea pigs and it's possible mechanism. Methods Bladder detrusor strips were suspended in tissue chambers,the CAOF and the SAOF and stimulant drug of varied concentration were added accumulatively in them. Observed the contractile activity of bladder muscle strips. ResultsBoth of the CAOF and the SAOF stimulated the bladder detrusor strips via acetylcholine antagonism with an increasing dosage,which could increase the resting tension, and SAOF showed a stronger effect.ConclusionThe CAOF and the SAOF influence on the M- receptor of bladder smooth muscle as M-receptor inhibitor thus decreasing the construction of bladder smooth muscle. Key words:Alpiniae oxyphyllae Fructus; Stir-heated with salt solution; Bladder detrusor muscle strips; Contractile activity 益智为姜科山姜属植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟 果实，药用部位为种仁。临床上常用有生品和盐炙品，生品辛温而燥， 主要归脾经，以温脾止泻、收摄涎唾力胜，多用于腹痛吐泻、口涎自流 等症;盐炙后可缓和辛燥之性，主要归肾经，专行下焦，长于固精、缩 尿，用于肾气虚寒的遗精、早泄、尿频、遗尿、白浊等症，如清?张仲 岩《修事指南》指出:“益智仁盐炒，止小便频数”。益智仁盐炙后增 强“缩尿”作用，可能与影响膀胱逼尿肌的活动有关。本文观察了益智 仁生品和盐炙品对豚鼠离体膀胱逼尿肌活动的影响，报道如下。 1 材料与仪器 1.1 动物豚鼠，英国种，一级，体质量250,300 g，雌雄不拘，由四川省动物专委会饲养场提供。质量合格证:川实动管质第99-12号。 1.2 药材益智，产地海南省琼中市，购于海南省中药材公司，经本校中药标本中心卢先明教授鉴定，为姜科山姜属植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟果实。 1.3 仪器与试药AS-HJ-?型恒温平滑肌槽(成都遨生 电子 有限公司);JH-2型肌张力传感器(北京航天医学工程研究所);BL-420E生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司)。氯化乙酰胆碱(化学纯，上海三爱思试剂有限公司，批号:20061130)，BaCl2(分析纯，成都化学试剂厂，批号:721231)，磷酸组胺(生化试剂，上海伯奥生物科技有限公司，批号:070107)。 2 方法 2.1 预处理将益智药材去壳制成益智仁饮片，并将净益智仁盐灸后制成盐益智仁饮片。分别粉碎，过2号筛，用75%乙醇回流提取两次，减压回收乙醇，制备成1 g生药/ml的药液，备用。Krebs液配制:称取NaCl 6.92 g，KCl 0.35 g，KH2PO4 0.16 g，MgSO4?7H2O 0.29 g，NaHCO3 2.10 g，CaCl2 0.28 g和无水葡萄糖2.00 g，加水溶解定容至1 000 ml。 2.2 离体实验猛击豚鼠头部致昏，快速取出膀胱，用Krebs液漂洗干净，置于盛有低温krebs液的培养皿中。从三角区下横切，将膀胱主体部分沿一侧面纵向切开，沿肌纤维走向切取两条纵行肌条(8 mm×3 mm)。将肌条安置在盛有50 ml的(37?0.5)? Krebs液的平滑肌槽中，持续通以氧气。肌条的一端固定在肌槽底部的不锈钢弯钩上，另一端与肌张力传感器连接，后者接生物机能实验系统记录肌条收缩时的平均张力(g)和频率(次/min),1,2,。肌条负荷1 g张力，温育30 min，待肌条自发活动平稳后，记录2 min正常收缩曲线，分别给予生品和盐炙品药液50，50，100，100，100，100，100 μl，每个剂量记录2 min曲线;用krebs液冲洗膀胱3次，待豚鼠肌条自发活动平稳后，记录2 min正常收缩曲线，然后加入终浓度为1.0×10-5的Ach溶液，记录2 min曲线，分别累积给予上述7个体积的生品和盐炙品药液。操作同前，依序再完成拮抗BaCl2(终末浓度4.1×10-4mol/L)和磷酸组胺(终末浓度1.0×10-5mol/L)引起膀胱逼尿肌兴奋的实验。