从蚊子血中检测人DNA　

从蚊子血中人DNA　 从蚊子血中检测人DNA 【摘要】 目的 从叮咬人后的蚊子体内血中得叮到被叮咬到者的dna分型。 方法 chelex1000法提取叮咬人后的 蚊子血血dna,powerplex 16e试剂盒和identifilern试剂盒扩增增dna。 结果蚊子血中可可成功检测出被叮咬人的dnan基因 型。 结论可从蚊子血中检测到被叮咬人的蚊dnad数据,结果稳定性好。两种试剂盒的联合应用,。可可大大提高检测的 准确率和可靠性,对实际检案具有和很很大帮助。 【关键词】蚊子,人,子dna分型 【中图分类号】图19919,2,,(175 【文献标识码】】b 【文章编号】10077—9297(20xx)020—0138—02 实践中的法医践dna检验样品具有多样性、复杂性,且常具为为 微量、已部分降解的生物物证,例如蚊子血。本文物对蚊对子体内血 进行dna检测,成功得到被叮咬者检dnan数据,并进一步对dna a 分型结果的可靠性及如何何提高检测结果的准确率进行行研究。 材料和方法 1 / 5 一 、样本和试剂 (一)样本样 叮咬人血后不久被拍死的蚊子死1只。分别取血痕和和混杂有 蚊子残片的部位,,1名被叮咬志愿者新鲜静脉血作对照。脉 (二)试剂与仪器剂 抗人血红蛋白胶体体金测试剂条(e—boat dallast公司)。 powerplex 16 kit(promega 公司公)。ampflstr identifiler kit (abi公司))。9700型pcr仪(abia公司)。abi 3100gene6can1— alyzer(abi公司))。 二、方法 (一)dnad提取 样本于500 l 纯水中浸泡30 minn,抗人血红蛋白胶体金测 试剂条检验后,chdexx一100法提取dna。 (二)pcr扩增及检测测 2 / 5 powerplex 16 system 1复合扩扩增试剂盒、ampflstr tidentifil—— er system复合扩增试剂盒分别扩增样本合dnad,反应体系为20"ll ,abi 3100 genetic analgyzery检测。 表1 蚊子体内血扩增结果子(powerp~x 16 sysetem) t * 为一个基因座中,两个等位基因峰高比座值值99,99,。蚊子dnaa不影响检测结果。 dnaa分型结果的准确性很大程度取决于样品中模板度dna ? 139 ? 度度。一般来讲,str基因座中由于等位基因属小座的量和纯 片段 <400 bp,两个等位基因之间差异扩增不如小位卫星卫vntr显著, 等位基因峰高基本相同。但当模基板板dna极微量、dna降解解或有 抑制剂存在时,可能能导致某一个等位基因优先扩扩增,一个基因座 的两个等位基因峰高会出现不平衡等现现象。由于现场提取的蚊子 3 / 5 血一般较微量,同时蚊子体体内可产生某些酶类,易引起起dna降 dnad结果。本实验中,在用用powerplex 166解,从而影响 试剂盒 检测时,蚊子血痕痕1在penta e、csf1p0s、tpox基因座座上,出现 一个基因座中两两个等位基因峰高比值<500,,d16s539基因座座 上出现等位基因14丢失的现象,易导致错误判型失。而。identifiler r 试剂盒则无此类现象。因因此我们认为对此类样品必须,须1)重新 扩增,2)另另选试剂盒扩增以确定结果是是否有可重复性,提高判型 的准确性。本实验联合应用用identifiler试试剂盒对样品pcr扩增、 电泳检测后,得到以上几个基因座的正确个dna分型结果,结提高 了对微量、降解的样品解dna检测的可靠性性。 本实验研究结果表明,,通过对案件现场提取的蚊子子血进 4 / 5 行 dna检测,可以得出人以dna分型结果。为为避免模板量微、降解 引起起dna分型结果的误判,在在实际应用时,应用两个以上上试剂 盒进行扩增,对结果果进行综合分析、判断,将大大提高大检测的准 确率。 参考文献 芬,法医芬dna分析,北京,,中国人民公安大学 [1]郑秀 出版社,,20xx,201 [2]2伍新尧,高级法医学,郑郑州大学出版社,20xx,,251 (收稿,20xxx—09—02,修回,20xx2—11—23) 5 / 5