兽用灭活疫苗设计浅析.doc

兽用灭活疫苗设计浅析.doc 兽用灭活疫苗设计浅析 摘 要:用微生物(细菌、病毒、衣原体、钩端螺旋体等)、微生物代谢产物、原虫、动物血液和组织等，经加工制成，作为预防、治疗、诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂称之为兽用疫苗。因某些疫苗活性会对人体产生有害影响，用物理方法或化学方法将其灭活后制成的疫苗称之为灭活疫苗。 关键词:兽用疫苗 灭活 工艺 设备选型计算 中图分类号:S852 文献标识码:A 文章编号:1674-098X(2014)04(b)-0225-01 1 灭活苗简述 疫苗:凡是具有良好免疫原性的病原微生物，经繁殖和处理后制成的制品，用以接种动物能产生相应的免疫力者。除一般活菌(毒)疫苗、灭活疫苗外，还包括类毒素、类毒素与菌体混合疫苗、亚单位组份苗、基因缺失疫苗、活载体疫苗、人工合成疫苗、抗独特型抗体疫苗等。 灭活疫苗:用物理方法或化学方法将其灭活后制成的疫苗。 2 各种动物疫苗工艺示例 (1)灭活苗生产工艺过程简述 灭活鸡胚苗:采用国内成熟的鸡胚培养病毒的技术。将种毒接种于9,11日龄非免疫鸡胚，接种后的鸡胚放在孵化箱中继续孵化，弃去接种后24 h内死亡的鸡胚，培养好的鸡胚取出，放在2,8 ?冷库中冷藏，之后 收获鸡胚尿囊液等。收获的鸡胚尿囊液等加入甲醛等灭活剂灭活，灭活后的鸡胚尿囊液等置2,8 ?冷库冷藏备用。 (2)灭活细胞苗:将配制好的细胞培养液加入转瓶，将转瓶置于温室中培养，待转瓶内长成单层细胞后，将毒种接种入转瓶中，之后在温室中继续培养，收获病毒原液。收获的病毒原液加入甲醛等灭活剂灭活，灭活后的病毒原液置2,8 ?冷库冷藏备用。 (3)灭活细菌苗:采用发酵罐发酵培养细菌和固体培养细菌两种技术。将菌种接种于培养液中，经发酵罐培养或接种在琼脂平板上培养，收获菌液(苔)。收获的细菌加入甲醛等灭活剂灭活，灭活后的菌液置2,8 ?冷库或储液罐中冷藏备用。 (4)乳化配灭活苗:在乳化罐中加入佐剂，灭菌冷却后，按配比加入从冷库中取出的抗原液，经乳化后分装入疫苗瓶，分装后的产品待检验合格后，包装入库。 3 灭活疫苗工艺设备计算示例 灭活疫苗车间的计算 A.前孵化箱计算 根据生产大纲，若年产鸡胚灭活疫苗10000万mL，疫苗水相与油相的配比为25%:75%，折合水相(病毒原液)2500万mL。 每枚非免疫鸡胚可生产病毒原液10 mL，鸡胚前孵化成功率为90%，后孵化成功率为90%，疫苗分装成品率为90%，则年需鸡胚量为: 2500万mL/年?10mL/胚?90%?90%?90%?342.9万胚/年 鸡胚前孵化10天计，每年生产日数为300天，则全年可孵化30批。 每批需孵化鸡胚 342.9万胚/年?30批/年?11.4万胚/批 前孵化采用6台19200蛋位的孵化箱可满足生产的需要。 B.后孵化箱计算 本项目鸡胚接毒后采用孵化箱继续孵化，年孵化量为 2500万mL/年?10mL/胚?90%?90%?308.6万胚/年 鸡胚后孵化时间以3天计，每年生产日数为300天，则全年可孵化100批。 每批需孵化鸡胚 308.6万胚/年?100批/年?3.09万胚/批 本项目配置3台19200蛋位的孵化箱作为后孵化箱，可以满足生产的需要。 C.转瓶机计算 年产细胞灭活苗2000万ml， 灭活苗水相(病毒原液):油相=25%:75% 则年需病毒原液 2000万ml/年×25%=500万ml/年 采用容积为3000ml的转瓶，转瓶的装量为转瓶容积的10%，即300ml/转瓶，细胞培养的成功率为90%，病毒培养的收获率为90%，疫苗分装成品率为90%。 全年需培养细胞: 500万mL/年?90%?90%?90%?685.9万mL/年 细胞培养的时间为4天，全年生产日数为300天每批需培养细胞: 685.9万mL/年?75批/年?300mL/转瓶?305转瓶/批 需配置3000mL、40瓶位转瓶机 305转瓶/批?40瓶/台?8台 全年需培养病毒: 500万mL/年?90%?90%?617.3万mL/年 病毒培养时间为2天，全年生产日数为300天，每批需培养病毒: 617.3万mL/年?150批/年?300mL/转瓶?137转瓶/批 需配置3000mL、40瓶位转瓶机 137转瓶/批?40瓶/台?4台 D.发酵罐计算 根据生产大纲，年产细菌灭活疫苗650万mL，灭活苗水相(细菌原液):油相=25%:75% 则年需细菌原液 650万mL/年×25%=162.5万mL/年 年工作日按300天计，细菌液每5天可培养一批，全年可培养60批，每批需培养细菌原液(细菌培养的成功率为90%，细菌液的收获率为90%，疫苗分装成品率为90%。) 162.5万mL/年?60批/年?90%? 90%?90%?3.7万mL/批 细菌发酵罐装量为罐容积的70%，则发酵罐的容积为: 3.7万mL?70%?5.3万mL=53L 故配置100L发酵罐一套，可满足生产的要求，并预留一定的生产能 力以满足扩产的需要。 E.乳化分装工序设备计算 根据生产大纲，灭活疫苗年产量为12650万mL，共分为120批进行配苗乳化，则每批需配苗 12650万mL/年?120批/年?100万mL/批 配置一套1500L的乳化设备(含油佐剂制备罐1台，乳化罐1台，储液罐1台，高压匀浆泵1台)，可满足生产的需要。 液体灌装机: 每批疫苗需分装的瓶数为 100万mL/批?100mL/瓶=10000瓶/批(以100mL/瓶计) 选用2台ZD-?型全自动液体灌装机，该机灌装速度为60瓶/min，每小时可灌装3600瓶，2 h可完成全部灌装量，满足生产的需要。 轧盖机、贴签机、热风循环烘箱、脉动真空蒸汽灭菌器、细胞瓶洗瓶机等设备按生产能力配套设置。 参考文献 [1] 中国兽药典委员会.中国兽药典[M].中国农业出版社，2010. [2] 中国建筑科学研究院.生物安全实验室建筑技术[M].中国建筑工业出版社，2004. [3] 洁净厂房设计规范[M].中国计划出版社，2001.