肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素含量测定方法研究

肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素含量测定研究 肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素含量 测定方法研究 270?碍盟军药学学囊2O13O年tO月第16卷第5期,~harmJPL4?16舳5Oa2000 有关外,可能与它的三维结构有关云芝中这一组 分多糖尚未见报道,其细微结构和生物活性有待进 一 步研究. 参考文献 [1]陈海生,廖时萱,谭建枉,等.野生云芝中两种多糖的基本结构 J_第二军医大学.1996,17【1):83 2]严慧_芳,戴静芝,陆密棋,等彩云多精抗肿瘤及诞免疫功能研 究[】.上海实验动物科学,1995.15(2I):l46 [3.王汉诲,鲁进宇,田野萍.等云芝多楠对小鼠产生细胞因子的 促进作用:J_.中国药学杂志,1993,28(12):722 [4]鲁进字.王覆涛,田野萍,等云芝多槽对小鼠免疫曲能的影响 7]O一72-, 文章编号:1008-:#926(20o0)o5—270—03 [J中国药学杂志,1995,30(1):10 15]竺青,楚正绪谭建权,等.云芝多糖对环磷酰胺所致免疫功能 低下的影响J_.中成药,199o,12(1):29 [6李怀义,王新民,谭建权,等.云芝多糖对果蝇的繁殖力和寿命 的影响[J]中国药理.1993,14(su)s30 7JWelw印一,肌Jim一哪n,Ch印胁一she~g.et?.Effectsof 山~’ssimlorpdysaeehasSdes0nsttpercadded【锄taadi6in I?ice[J_.中国药理学于匣,1996,tT(12):174 [8:李铁韩,吴昌贤.张燕霞.糖和糖醇的气相色潜分析[J:分析化 学,1982,10(5):272 (收稿日期:1999—09—28;惨回日期:21)C0—04—24) (车文编辑魏萍) 肝复康丸中五昧子甲素和五昧子乙素含量测定方法研究 / 谭生建?,屈雪莲,杨成勇,闵庆旺,张玉清@,王喜个 R料 j之g占 (r.中国凡民解放军总装备部军事医学研究所北京t00101;0中国人民解放军总装备部指挥技术学院门诊部- 115g, 101407) 摘要目的:建立肝复康丸中五味子甲素和五味子乙素的含量测定方法.方法:样品用己烷超声提取,提取液过滤,蒸千.残 渣用甲醇溶解后,注入高效液相色谱仪分离测定.色谱条件包 括:LUNA—Cts分析色谱柱,柱温30oc.乙腈一水(68:32)混台液 (含0.2%磷酸,用三乙胜诃pm)作为流动相.检测波长为254rma.结果:/F/:复康丸中五味子甲素和五昧子乙素与其它戒份分 离良好.五昧子甲素峰和五味子乙素蜂保留时间分别约为16min和21rain.五味子甲素和五味子乙素峰与其相邻蜂的分离度 大于15.五味子甲素峰计算理论板数是6070.以五珠子乙素峰计算理论板数是7015.五味子甲素对照品线性浓度范围 35.00—140.q”g.ml-’,r=0.9999,平均回收率为100.5%,RSD为1.5%(=5).五睐子乙寒对照品的线性浓度范围巧.00 一 [00.0pg’ml-’,r=O.9999,平均回收率为102.4%,RSD为1.7%(=5).结论:车法灵敏度高,操作简便,结果准确,可用 于肝复康丸中五味子甲寒和五味子乙寒的吉量测定. 关键词:墨堕垄;堕!童;堕至至茎 中圈分类号:R927.2文献标识码:A StudyonthemethodformeasurementofDeoxyschizar~drinandSchisandrin B concentrationinGanfukangWan TANSher~一Ji.an~),QUXue—Lian,YANGCheng-Yong,MINQing-Wang,ZHANGYu —Qing~.WANGXi.Ge (.hmtituteofMilitaryMedicine.HeadquartersofGeneralEquipment. Beijing100101) (.OutpatientCllnicofConnnandTechnologyCollegeofGeneralEqui0mentofPLA. Bei101407) ABSIILg,CT:AhnTodevelopthemeodformeasurementofDeoxyschizan&inandSchisandrinBconeentrati0nin GmffukangWI皿 withHPLC.Methods31aemethodofHHCwasemployed.1hesamplewasextractedwith11一Hexane 吐?nu嚣 hsupersonicwave,thentheextractw/:/Nfiltmtedandevaporateddrying.1heresiduewasresolvedwithmethanoland inj~:tcdintosampleinletofHFLcf0rseparationandmeasurementofD璺嘎 chi翻ndriI1and鲥sand.,inBin coneentraffons.1kchromatographicconditionsareasfo~ows:u删 A—Cl8anal~cchromatographiccolumn(4.6rran× 250n,an,5Jwithcolumntemperatureof30?.Theratioofacetonitriletowater inmixturewas68:32(indude0.2% ?作者简介:谭生建(1956一).男,学士,主往药师 坪我军耪荦荦报2OOO年10月第l6卷第5期PharmmPbtVo/16i0 ,—【2—?231 phosphoricacid,modulatedtopH5withtriethylamine),andthe?Ii珈 reWaSusedasmobilephase.ewavelengthfor detectionw8s254nm.R嘲 epeakofDeoxyschizandrinandSchisandrinBappB邮 Oilabout16and21minutes. ResolutionsofbethDeoxyschizandrinandSchisardrinBweIm0fethen1.5.andtheirnumbersoftheoreticalolales calculatedwere6070and7015eparetelys.ThestandardcurvesofDeoxyschizandrinandSchisandrinBwerelinearinthe concentrationrangeof3500—140.0,ug’ml’.and25.00—100.0,ug’ml,.C orrelationcoefficientsofboth DeoxvschizandrinandSchisandrinBwere0.9999.naveragerecovelTofDcex~hizanddnandSchisandrinBre lo0.5%(H=5,RSD1.5%)and102.4%(n:5,RSD1.7%).CotwJn.~tm.ItIismethodwasfoundtobe sensitive.quickandaccuratefortheIneasunxnentofDeoxyschizandrinandSchisandrinBconcentrationsi11Gmffukang W蛐. 砌弹W0l砌Ds:Gan6lk8I】gWan;Deoxyschizandrin;SchisandrinB 肝复康丸收载于中华人民共和国卫生部药品标 准第七册(1993年),由五味子,太子参,白花蛇舌草 3味药材加工而成,具有收敛,益气,解毒,降谷丙转 氨酶等功能,用于治疗急,慢性肝炎,早期肝硬化和 肝功能不良等症.部颁中以性状,鉴别和丸剂 通则检查评价肝复康丸的质量,没有含量测定方法. 某些含五味子的中成药中五味子甲素,五味子乙素 等的含量测定方法已有报道l】J,肝复康丸中有效 成分含量测定方法未见报道.五味子甲素,五味子 乙素为肝复康丸中已知有效成分,具有保肝,降低转 氨酶的作用_4-.本研究建立了HPLC测定肝复康丸 中.五味子甲素和五味子乙甲素含量的方法. 1仪器和试药 LC-6A液相色谱泵,SIL-6B自动进样器,SPD一 6AV紫外一可见分光光度检测器,GR6AV色谱数据 处理机,ER一182A电子分析天平(日本岛津制作 所). 五味子甲素对照品,五味子乙甲素对照品(购自 中国药品生物制品检定所).甲醇(南开大学精细化 学实验厂,批号990318),乙腈(南开大学精细化学 实验厂,批号951118)为色谱纯. 对照品贮备液为175.0,ug?ml五味子甲素和 125.0,ug?ml’.五味子乙素的甲醇溶液.实验用样品 为自制的3批肝复康丸(批号200(]0216—1, 2O000216—2,2O000216—3). 2方法与结果 2.1色谱条件LUNAClg分析色谱柱(4.6mmID× 250mm,粒径5,um),北京分析仪器厂ODS保护柱 (5mmID×50ram,粒径5tma),柱温30?,流动相为乙 腈.水(68:32)混合液(含0.2%磷酸,用三乙胺调 pH5),流速1ml/min,检测波长254nm,进样量10, 纸速lmm/min. 2.2样品溶液的制备取肝复康丸10g,研细.精 密称取肝复康丸细粉1g(约相当五味子0.5g),置 50盯d具塞三角瓶中.精密加正己烷25ml,精密称 定,超声10rnin.精密称定,补足损失量的正己烷, 摇匀.滤过,取滤液15ml,置50ml烧杯中水浴加 热,挥干.残渣用甲醇10ml少量多次提取,提取液 置10ml容量瓶中定容.摇匀.用微孔滤膜(0. 45ttm)滤过.弃去初滤液,续滤液备用. 同法制备不含五味子的阴性样品溶液备用. 2.3系统适用性分别取样品溶液,阴性样品溶液 和对照品溶液各10ta,按以上色谱条件分别进样测 定,绘制色谱图,结果见图1. 由图1可知,五味子甲素峰和五味子乙素峰的 保留时间分别约为16wXn和21min,理论板数分别为 6070和7015,分离度均大于1.5. 2.4线性关系取不同浓度的对照品溶液10分 别重复进样,按上述色谱条件测定,记录峰面积.分 别以五味子甲素对照品峰面积均值和五味子乙素对 照品峰面积均值x对其进样量Y()线性回归,得 回归方程: 五味子甲素:Y()=0.0590+0.2090×10 X.r=0.9999 五味子乙素:Y()=0.0363+0.2847×10 X.r=0.9999 2.5仪器精密度和方法重复性取样品溶液置自 动进样器中,重复进样5次,以五昧子甲素和五昧子 乙素峰面积积分值计算RSD分别为1.6%和1. 3%. 同一批样品,分别按样品制备项下方法操作,制 备样品溶液5份.进样测定.计算两成分峰面积积分 值的RSD,分别为3.1%和1.2%. 272t并放羊苟学20?年lO月第16卷第5题』!也 0-iD300,-i n 300miD30 围1五昧子甲素,五昧子乙素色谱田 1五昧于甲素2五昧于乙煮 2.6加样回收率取同一已知五味子甲素和五味挥干,再经甲醇提取,可将肝复康丸中的五味子甲素 子乙素含量的肝复康丸样品细粉,精密称取5份(每和五味子乙素提取完全. 份约相当五味子0.25g),分别准确加入对照品适量,3.2经光谱扫描,五味子甲素,五味子乙素的最大 各份均依样品测定项下方法测定,计算平均回收率吸收波长在254nm左右,本文选用254nm吸收波长 和船D分别是100.5%,1.5%和102.4%,1.7%(为测定波长,可排除干扰,且灵敏度能达到定量测定 =5).要求. 2.7样品测定3.3经稳定性试验可知,五味子甲素,五味子乙素 2.7.1对照品溶液制备浓度分别为45腭?ml五的甲醇溶液至少在一周内稳定. 子甲素和8o’五味子乙素的对照品甲醇溶参考文献 : }便c 2.7.2样品溶液制备按样品溶液制备项下方法:1]吴健敏,张启明一严克东}吼c测定生脉粉针中五昧子有效成 制各样品溶液.分五昧于醇甲的含量[J]药物分析杂志,1993r13(5):328 2_7l3测定法取对照品溶液和样品溶液各lop1妇 . ‘中五睬子乙煮 注入高效液相色谱仪,记录色谱峰面积,外标法计[3]王慕郜.孚白龙. 北五味于有效成分的高教藏相层析测定[J]药 算,即得.学.1983,I8(3):209 测定了3批样品,五味子甲素的含量分别是0.[4i汤臣康五昧子的化学和药理研究新进展[J].西北药学杂志, 4474,0.4516和0.4787mg?g-0;五味子乙素的含量0994,(9)6:278 分别是o.748,0.7902:~10川4mg.一 3讨论 3.1经提取试验,正己烷为溶剂,超声10mln, 刁一 文章编号:1008—9926(2【x】0)05—272—03 RP—HPLC法测定人血清中醋酸甲地孕酮浓度 坦墨墼?,趣整基/康琨,张凤霞,刘会臣 (中国人民解放军白求思国际和平医院临床药理室河北石家庄o5oo~) R7; 摘要:目的:建立高教液相色谱法测定人血清中醋酸甲地孕酮浓度:方法:分析柱为YWG—cl8(1Obtm,4.6mm×250ram);流动 相为水一乙睛(40:60);流速为1.Oral/rain;紫外检测渡长为288nm;用乙酸乙酯作为提取液:结果;血清中醋酸甲地孕酮浓度在 1,128ng?ml..范围内线性关系良好(r:O9997);醋酸甲地孕酮高,中,低 3个浓度的日内,日间变异系数分别小于10%和 ?作者简介:胡玉钦(1968一).男,主管药师