脊柱黄韧带骨化中血管生成的作用和临床意义

脊柱黄韧带骨化中血管生成的作用和临床意义 脊柱黄韧带骨化中血管生成的作用和临床 意义 临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2006Feb;22(1)?69? 脊柱黄韧带骨化中血管生成的作用和临床意义 秦德安,张佐伦,刘峰,崔新刚 摘要:目的探讨血管生成在脊柱黄韧带骨化中的作用和临床意义.方法3例胸腰椎骨折,10例退变性腰椎管狭窄和14例 胸椎黄韧带骨化的后路手术黄韧带标本,分别作为正常组(N),退变组(D)和骨化组(0),均做HE染色和血管内皮生长因子 (VEGF),环氧化酶2(COX2)和CD34免疫组化染色,测定微血管密度(MVD),BI-2000定量分析VEGF,COX2积分光密度值 (IOD).结果正常组纤维母细胞VEGF,COX2达阴性,退变和骨化组纤维母细胞增生并表达阳性,两组IOD值t检验,骨 化组阳性率高于退变组.微血管在正常组稀少,在韧带与骨化移行区增生明显,可见大量CD34阳性表达的血管内皮前体细 胞.3组MVD值q检验,骨化和退变组阳性率高于正常组,骨化和退变组无差异.微血管内皮细胞间距增大,管壁缺乏基膜 和平滑肌层,管周见阴性染色的细胞聚集.结论脊柱黄韧带纤维母细胞异常分泌VEGF和COX2,促进局部血管新生.是骨 化必备条件. 关键词:脊柱;新生血管;黄韧带骨化;血管内皮生长因子;环氧化酶2 中图分类号:R681.5;R331.2文献标识码:A文章编号:1001—7399(2006)01—0069—04 Functionandclinicsignificanceofangiogensisinspinalossificationofligamentumflavum QINDe-all,ZHANGZuo-lun,LIUFeng,CUIXin-gang (DepartmentofOrthopeadics,ShandongProvincialHospital,ShandongUnive=ity,Jinan25 0021,China) Abstract:PurposeTodiscussthefunctionandclinicsignificanceofangiogensisinspinalossificationofligamentumflavum.Meth- odsTookligamentumflavumsamplesfromthoracolumbarve~ebralfracture(3cases),degenerativelumbarspinalcanalstenosis(10 cases)andthoracicossificationofligamentumflavum(14cases)duringspinalposterioroperationsandclassifiedaSnormal(N),de- generative(D)andossification(0)grouprespectively.HEstainingandVEGF,COX2andCD34immunohistochemicalstainingwere performed.Microvesseldensity(MVD)wascountedandVEGFandCOX2'SintegralOD(IOD)werequantifiedbyB1-2000software. ResultsFibroblastsofgroupNexpressedVEGFandCOX2negativelyandgroupD, 0multipliedandexpressedpositively.IODgt testsdemonstratedtherewerestatisticallydifferencebetweengroupOandgroupD,MicrovesselswererareingroupNandabundanton thetransitionalzonesofligament?ossification,ThereexistedabundantCD34+endothelialprogenitorceHs.MVD'sqtesIsdemonstra. tedgroup0andgroupDdifferedfromgroupN,buttherewerenostatisticallydifferencebetweengroup0andgroupD.Gapsbetween endotheliacellsenlarged,ThebasilarmembraneandsmoothmusclelayerwerevoidandCD34?stainingpericytescongregatedaround microvessels,ConclusionsThespinalligamentumflavumfibroblastsexcreteabnormallyVEGFandCOX2.Bothpromotevasculogene. sislocally.whichisindispensabletoossification, Keywords:spinal;neovascularization;ossificationofligamentumflavum;vascularendothelialgrowthfactor;cvclooxygenase2 黄韧带骨化(ossificationofligamentumflavum. OLF)最早由Polgar报道.最近研究表明,导致OLF 的关键因素是各种生长因子或细胞因子,其中,骨形 成蛋白(BMP)和转化生长因子B(TGFI3)在OLF的 发病中具有重要作用.研究证实,OLF初期有丰富 的血管增生,对骨化有重要意义?.我们从血管生 成的角度,利用免疫组化方法研究血管内皮生长因 收稿日期:2005—03—13修回日期:2005—05—09 作者单位:山东大学山东省立医院骨科,济南250021 作者简介:秦德安(1974一),男,主治医师,博士研究生.Tel: (0531)8380693,E-mail:qindean.student@sina.corn 张佐伦(1936一),男,教授,主任医师,博士生导师 子(VEGF)和环氧化酶2(COX2)在OLF中的作用. 1材料与方法 1.1材料3例急性外伤性胸腰椎椎体骨折,平均 年龄43岁,术前影像学检查黄韧带无增生肥厚,术 中取黄韧带测量平均厚3.5mm;10例退变性腰椎 管狭窄症,平均年龄58岁,术前影像学检查见黄韧 带增生肥厚,术中取材测量平均厚6.5mm,未见黄 韧带钙化与骨化;14例胸椎黄韧带骨化症,平均年 龄5l岁,术前影像学检查黄韧带共53个节段不同 程度增生骨化,与椎板常融合成一整块骨板,骨板最 厚处平均19.1mm.手术均为椎板截骨,于椎板间 取黄韧带. 1j与寓验璃理枭0/13in』l'mh~g20(}6h;22 I2方法 12-染色,水均经…%:林定,化 卦ll5嘴EDT,眦钙f觇脱jK进蚶包埋4『? 连锁{脱蜡水.常规IIE色sP浊免碴纰 汜包j为鼠机人VE(,II21,t')X2(11)34.牡 机SI'-9000试制龠均却t]lJJIJ.浓缩D%B也刑 均{rlli物披术有限公-产l板|兑}』fJI;搽 作3qII,O审黼肯l5nilll_热修复抗原处l0 --x2'rfill清行?miii分圳r八抗,4.过 他iiIJll凡ll拗采化一机ISl试制.37c各 r-lill_I)AII!乜.木l复染川乳腺蝻切片n 刘IqIS代替执怍I l22w.II'和{lllx2分析f?BI-20(10免疫?H化 分忻轼.录川地圳帆选取化,i』尊 Vc'IN2鲍疫组化c生口分把密性值(101)) I23微血管密度(MV…的测定按eidn~i 浊:?]4{l佰镜拽CD34…染包浓集的区 域.Iq:200俯觎野HI敬成栋包帕fill胞和做 管敬l_任何染色I_r{j,J,Ifill性或IA]戍圳胞簇 微lm竹崆f1如I1,lm钎汁戡仃较叭幢帕火什 几F个心细他形成的竹Il数,m'幢 IqI:~II川乜魁砷定做m椅的一-蛆格H汁数 觎野帕平均作l蛊片"vlVl1fft 124统计学万法,.l震以…示.SPSS1【】[】 轼圩圳比较vIIIX2的lIl_J趟坚组}化 组的圳,幂JII1JliI汁I啪洋水均数,榆骑;MvI' 采』11h尊行?于绀什小墩IE鞍榆骑 2结果 2.IHE染色镜随IH卅JJr维排州舰则. 纤维圳肚?恤体较小.也,管敞分 部分为鞍几J『'帐僻L数}l{,彩;缔fl【织 』泛J髓透Iri】"越F埔断裂,排列杂乱. "?ZfE/:Jz~ll川世增ll_;忠多样.f_幢J,大多珀形,他 f杠较凡胞幔刺.,?恢较大I椭形;?化【【 J旅以|_k外蚰状化埘墁J许多纤维软H flFIrj~.,细胞,化仃jr…缸垃机J}_{ I=_u坩fJ汁他的定处Jrf管增_卜(lI1 2.2VEGF,COX2表选JI常州圳丧业( 2).i[!H化Mlvl?I?'rI.I)X2.纤维件 圳胞胞幔…州I『粑{34)-fl【_娩 .(?F)=805.,f【:【)X2】=3589,』Lf_ f/'(0__5),掘1』,化-衍于巡蕾【 23CD34表选I?阳【^I.世蕾钏t化 I啦选,可大靖irl染乜血管内皮前体_~llf胞 cemhtthelialprogerlitorcel1.El'C)和Fly1个少数儿 个m'色的内皮细舰成们做血管.做1flL管在 与骨化侈秆ix:址川拈.rq皮圳抱m】I隙增大管擘缺 少膜千?r滑JIJLJ~.管采集丰南阿染色的细胞 (5)一绀检验v(Nl1)=322,P(005, (N—I1)=485,P<u.05,q(D一0)=234,P> [J05,认,化相i哩组H宰高卜_L常,化和 c坚【帮肄无{菩{?(丧i) i各VEGF,【'(,x2CD34免疫染自fJ? 蓑 '|l 目I*nr{化IIl骨埔目2 :『I*堆堆,?,lI}x:色1 l1目11他订il;=ff雏??)X2 :J ? - , 临自,骢痛理学杂志j(PIfm6F~.h;22( 雾|?0?…. 鬻囊毒主 3讨论 31新生血管原因fIIlF阳的血管增?,志瞢 化』佝开始,管皮川I大,皿暖增』J【』址翩带 巾大Hl】性表选的朱舒化阀允匝细胞软骨 细胞的来源cI常酋韧带的竹养血管俘任于柞 概也缘的中线部及笼突的前部.骨化【i=在J 成时.可其边缘发大缱l…管绑织伴随符增 生悼不州,[1k-?la等认山反微小刨伤导If_【 管形成?究带E发生J黄韧带退变基 础.囡此推测御特堪肥厚敛营养血管中H州减少, 管性爱止闭锁.局部缺氧或反复微小创伤等刺激韧 带纤维细胞.增生什开常舒泌vn,l和COX2,促 世血管成 311纤维母蛔盹韧带巾最j要卸f胞.出胚腑 叫}【lJ的川克匝分化而1靶通伟IhJ克质细胞以来 分化的彤式,存于许阎…,刨fjJ修复等情况 FIrf增殖舒化为纤维母池一旦空靖韧带维母细 咆训}增多,分足由纤堆州细胞通过分裂增殖 I(IJ来.善址巾邻近帕宽质细胞纤维n胞秆毛细 m符心细胞等演变J-l芯J}研究发州,绯母细 化nq蚺中.前许多r竹新牛帝田相关 缺氧等州激『可导}r维绑咆vH,FC{~X2f_勺表 达 3l2f对骨化的作用I】llF水质属下制带 件戚骨,然仆彳『管成秆IVE{F内錾., VE(,F是种『啦H也々一H-赞裂吼和血管新生强 烈帕l制激叫子,能增拙m管r透悱娃最重要的_『n 管成j物质.旺JlbJJf~发育rl泛玉正常成年 【,I小丧歧f吒水半是I,成年凡VIc}水平51 商仅址于肿,伤口愈风湿是1捉等病J 敏礁女州=经j?:F址]111钳应前体胞lEP<) 7 增站与分化的必需诱导冈子.VE(-促进ElC动员 与巢到缺组织内.参与新生管形戍"本研 究{m过(.【}34染色也I正叨世蛮相I骨化带rp有大量 m怍染色的EPCCD34机原在新生书内应巾表 达远大J非新血管内皮,选择性地丧选J'不成熟 的造血下细胞,血管内皮细胞Bouletreau等认为 缺氧和VEGI"岛袁达-lf能促进局部内皮细胞丹泌 lIMP2从而健进损伤愈?,挫币VEGF的成骨作用 最终是l;?Ps米介导 3l_3(.()x2对骨化的作用L.()x址催化花生l 烯酸转化为1i{『列腺索2的限述牌.有CI}XI和 COX2种业苒叶?COX2秀导型脯.一般1 表达或低表达.在受到荇种刺激如损伤缺氧时.表达 j速上捌,参与多种病垃氍一{]OX2的转 求蒯是骨代坩的强力峒节因子.在丹折愈合过程 fl?I能是必不可少的.选择性(()X2抑栅剂可完 彤JCOX2的增加IlI促进VEcF的表 达,从【『_『l叫促进局部管牛成 32新生血管临床意义 321影像学鑫()IF常用的影像学榆盘法 是CI和MPd如("r丑骨化边缘小光滑,化 织内南旺,均匀.提盱化不完.有倚或哥髓 旱低密厦影像i若骨化边缘光滑.日化组织内密 度均匀,提I-日完全骨化.呈离密度影像MI{I与 韧带病理比较研究发观.低信号【^位于铷带 旨{tB',l增牛酃位,提示骨化j!I腱等信号医为肥厚韧 带},增J上的小血管,表侣化开始,无佶区为韧 一的短骨,皮质骨朴结构丝钙化组织.说叨召化成 熟综/,分析()LIP的CT刊M表.刘完全化 不造成越扦If17J除,对来充争化?造成 迫暂应切陈,告尢9l0城箨=切舰察阡比进脞" 322保守浩听的可能t11|属于韧组织的开 化骨化,异位丹化临眯较多0非衙体洲炎曲 (NS.MDSJ足川前最有效的预胁位.曰化形成的药 物,这捉"i采用NSAIDS拄制t)LF进腱干I1防止 术后复发r1]_选择性C(}X2抑制剂已I泛用于 治疗关炎,娄风湿戈炎强件秆柱炎.它 通过抑制1x瓶性,减少局部叭符生成而发挥作 l1.推洲COX2抑制弃lJ埘廿J制管牛成埘I)IF 何预防和拄复发的忭)1t州样,【血管内出抑制袭 为trf]~UJ}疔选择rl阿已有20多种札符生成 抑制荆进人或即将址八临床试验f-O1}一阿啦 脊髓坦I【n=F水能解决州题J择尘cox2抑制 荆或血管线{【1]制索位能用于扮制氍牺筻屣或防止 ? 72?临床与实验病理学杂志JClinExpPathol2006Feb;22(1) 术后复发. 本研究利用免疫组化方法在组织水平初步证实 黄韧带纤维母细胞在受到各种刺激时异常表达 VEGF和COX2,促进局部血管生成,导致韧带骨化, 为防治OLF提供研究方向和途径. 参考文献: [1]王哲,王全平,张俊华,等.骨形成蛋白在黄韧带骨化中的表 达定位[J].第四军医大学学报,2002,23(4):341—343. 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[11]周方,党耕町.胸椎黄韧带骨化影像学与病理学对照研究 [J].中华骨科杂志,2004,24(6):346—349. 伴有嗜酸细胞的成人乳头状肾肿 瘤 LefevreM,CouturierJ,SibonyM,eta1.Adultpapillaryrenal tumorwithoncocyticcells:Clinicopatholoc,immunohisto— chemical,andcytogeneticfeaturesof10cases.AmJSurg Pathol,2005,29(12):1576—1581. 最新的WHO分类根据形态学,免疫组化和遗传学特征 将肾脏肿瘤分为12种类型,其中包括嗜酸细胞瘤和乳头状 肾细胞癌.这2种肿瘤形态学上分别具有一定的特征性,二 者的鉴别并不困难.然而,有一些肾脏肿瘤病理特点为真性 嗜酸细胞组成,同时具有广泛的乳头状构型,这类肿瘤是否 为嗜酸细胞瘤或乳头状肾细胞癌的一个亚型还不清楚.为 了探讨该种伴有嗜酸细胞的成人上皮性乳头状肾肿瘤的临 床病理学特征,作者分析了10例具有这种形态的肿瘤的临 床,形态学,免疫组化和细胞遗传学特征.l0例患者均为男 性,年龄44—80岁,平均71岁.肿瘤大小平均为3.3cm,均 位于肾内,境界清楚,无肾外扩散.组织学上肿瘤由细的无 ? 国外期刊文摘? 纤维的乳头组成,乳头表面被覆单层的嗜酸细胞,胞质内含 有致密的嗜酸性颗粒,核圆形,核仁位于中央(Fuhrman分级 除了1例为?级外,余均为?级).大多数病例可见局灶性 坏死.所有病例免疫组化表达AMACR,vimentin和CDIO,4 例表达肾细胞癌抗原,3例表达CK7;5例进行了细胞遗传学 检查,其中4例有核型结果,3例表现为染色体Y,1和14同 时性缺失,1例为3号染色体三体,1例比较基因组杂交显示 为l1号染色体长臂部分缺失.所有病例均行肾切除术,并 进行了随访,随访时间平均为62个月,均无复发和转移.乳 头状结构,坏死,免疫组化表型不支持嗜酸细胞瘤的诊断,而 支持为乳头状肾细胞癌的一部分,然而,这些病例由于有嗜 酸细胞,无l7号染色体三体以及预后较好,不同于l型和2 型乳头状肾细胞癌.这些结果表明伴有嗜酸细胞的成人乳 头状肾肿瘤可能是乳头状肾细胞癌的一个特殊的亚型. (黄文斌,陈洁宇摘译,周晓军审校/南京军区南京总 医院病理科,南京210002)