大鼠下丘脑内神经降压素对体温的影响

大鼠下丘脑内神经降压素对体温的影响 大鼠下丘脑内神经降压素对体温的影响 第27卷第3期 V0J.27.NO.3 济宁医学院 JOURNALOFjININGMEDICALCOLLEGE 2004年9月 Sep,2004 大鼠下丘脑内神经降压素对体温的影响 朱宝亮程小东张艳霞刘文彦陈家津 (济宁医学院生理学教研室济宁职业技术学院青岛大学医学院生理学教研室) 提要目的探讨下丘脑内神经降压素(Neurotensin;NT)对体温的影响.方法使用核团内微量注 射的方法向大鼠双侧视前区一下丘脑前部(PO/AH)和下丘脑后部(PH))分别注射 清,观察 NT和抗NT血 大鼠体温的变化.结果双侧PO/AH注射NT后大鼠体温下降(P<0.05),且呈明显的量效依赖关系,但 注射抗NT血清不能引起体温变化;下丘脑后部(PH)注射NT对体温无明显影响(P>0.05).结论下丘 脑内外源性NT可能参与机体的体温调节过程,其作用部位在视前区一下丘脑前部,内源性的NT对体温无 明显影响. 关键词神经降压素;下丘脑;体温 自1973年Carraway等l1J发现神经降压素位.注射完毕停留1分钟后拔出微量注射器. (NeurOtensin;NT)以来,已NT是一种脑一肠实验共分3个部分:第1部分PO/AH注射NT 肽.据文献报道,脑室内注射NT可使实验动物的对体温的影响:实验组大鼠于 PO/AH分别注射NT 体温降低,且呈明显的量效依赖关系L2J.由于下丘(美国Sigma公司生产)0.25btg,0.5g和1g(所有 脑是体温调节的中枢整合部位,且NT在下丘脑的剂量的NT均使用生理盐水稀释至21),观察体温 含量很高[,但下丘脑的NT与体温调节是否相关,变化,以注射2l生理盐水作为对照组.第2部分 迄今未见报道.本工作旨在探讨视前区一下丘脑前PH注射NT对体温的影响:实验组大鼠于PH注射 部(Preopticanteriorhypothalamns;PO/AH)和下丘NT1g(21),以注射等容量生理盐水作为对照组. 脑后部(posteriorhypothalamns;PH)的NT对体温第3部分PO/AH注射抗NT血清对体温的影响: 的影响.PO/AH内注射抗NT血清2l(兔血清制备,效价为 1材料和方法1:14000),以注射正常兔血清2l作为对照. 动物处理:实验选用体重为200,250g的健康组织学鉴定:每次实验完毕,经套管注射甲苯胺 雄性大鼠.实验组与其对照组大鼠,在实验前后均蓝染色,断头取脑,置于10%福尔马林溶液中固定. 放置于室温为22.00?1.0"C的实验室内,实验动物连续切片,50m厚,光镜下行组织学鉴定.定位不 分别于注药前和注药后的30,60,90和120min测肛准确者不记人统计. 温.采用PHILPS肛温计(精确度为0.01度),插入统计学处理:所得数据采用平均数?误( 直肠内4cm以观察记录体温.?SE)表示.实验组和对照组采用两样本均数比较 方法:动物以20%氨基甲酸乙酯(1g/kg)麻醉的t检验.取P<0.05作为判定显着性界限. 后,固定于江湾I型C脑立体定位仪上,头部正中2结果 切口,剥离骨膜,止血.参照George图谱,用牙科钻PO/AH注射NT对体温的影 响:PO/AH内注 在颅骨顶钻孔定位,定位坐标:PO/AH:前囟前射NT后30min,大鼠体温明显下降(P<0.05),在 1.4mm,旁开1.0mm;颅骨表面下8.5mm;PH:前囟注射60,90min时体温下降达到最高峰,以后体温 后1.0mm,旁开lmm,颅骨表面下8mm.将自制同逐渐回复,体温下降的时间持续2h以上.体温下降 心套管插入上述部位,套管外径0.7mm,内管外径的幅度呈明显的量效依赖关系,注射NTO.25btg,体 0.4mm,内管前端比外管前端长0.5mm.以502胶温的最大下降幅度为1.3"C,0.5g时为3.5?,1g 和自凝牙托粉固定同心套管,备作微量注射用.微时则达到4.2?(见表1).大鼠PO/AH内注射 量注射以11/min的速度分别通过套管注入上述部Saline2l,各时段体温无明显变化. 表1PO/AH内注射NT后的体温值 注:注药后的各时段的体温值均与注药前进行比较;'P<0.05;一P<0.01 PH注射NT对体温的影响:PH内注射NTI~g,1.20*(2,与注射前的36.90?0.90*(2相比体温无明 注射30,60,90,120min时的体温值分别为36.75?显改变(P>0.05,见表2). 1.00,37.00?0.50,36.85?1.00和36.87? ? 16? 表2PH内注射NT后的体温值 PO/AH注射抗NT血清对体温的影响:PO/ AH内注射抗NT血清2l,注射30,60,90,120min 时的体温值与注射前相比无明显差别;PO/AH内注 射正常兔血清也不能使体温产生改变(P>0.05,见 表3). 表3PO/AH内注射抗体NT血清后的体温值 3讨论 越来越多的文献报道,某些多肽参与体温的中 枢神经调节-2J.如肾上腺皮质激素(ACTH),a一促黑 激素(a—MSH),蛙皮素(BBS),胆囊收缩素(CCK),促 甲状腺激素释放因子(TRH)和精氨酸加压素 (AVP)等均有明显的降温作用. 脑室内注射NT对体温的影响自1976年以来 逐渐被科研工作者所重视.实验证明,脑室注射NT 可引起明显的体温降低,且呈量效依赖关系,注射 NT的剂量越大,体温的下降就越明显-4J.因为下丘 脑是体温调节的中枢部位,所以本实验于下丘脑的 不同部位注射NT,结果表明:NT影响体温调节的 中枢部位在视前区一下丘脑前部(PO/AH),而在下 丘脑后部(PH)注射NT对体温无明显影响,说明脑 室注射NT引起的体温下降可能是通过NT扩散人 下丘脑前部起作用的. PC)/AH注射NT的剂量与体温下降的幅度有关, 例如注射0.25tzg的最大下降幅度为1.9?,0.5tzg为 3.6?,1耀则达到4.20?.其量效依赖关系与Ne— meroff等-4相似,所不同的是两种实验的体温下降幅 度存在差异,后者脑室注射NT1.5g最大的下降幅度 仅为0.9?.可能的原因是NT经脑室扩散人PO 的量不足以引起更大的体温下降.本实验还对PO/ AH注射NT引起体温下降的持续时间进行了观察, 结果表明NT引起体温下降的持续时间在2h以上,其 中在注射60,90rain后体温的下降最明显,注射 90rain后体温逐渐恢复. 应该指出,PO/AH或脑室注射NT引起的体温下 降,均应认为是外源性NT的效应,为了探讨内源性 NT在体温调节中的作用,本实验于PO/AH内注射抗 NT血清,结果显示大鼠体温无明显改变,说明在生理 情况下内源性NT可能不参与对体温的调节. NT影响体温的部位可能在PO/AH,其机制尚 待探讨.有人向大鼠脑室同时注射NT和Ca鳌合 因子EGTA,NT的降温效应明显降低【;另有文献 报道,脑室注射微量的多巴胺,大鼠体温明显降 低J,因此认为NT的降温效应可能与Ca和多巴 胺的参与有关.分子生物学的研究表明,NT分子的 C端对NT降温效应起着关键作用,C端的6肽具有 和NT相似的生物学活性,而C端的5肽完全没有 降温效应.已证明,NT第9,11位氨基酸残基对 NT的活性尤其重要,此片断的任何改变都会影响 NT的活性【6l. 参考文献 1.王魏,陈家津.神经降压素.生理科学进展.1985,16(4):312 2.ClackWC,LiptionJM,Brainandpituitarypeptideinthermoregula. tion.phatmacolther,1983,22:246 3.MetcalfG,Detterpw,IsTRHanendogenousergotropicsubstancein thebrain,Lancet,1981,1:586 4.NemeroffCB,BissetteG,PrangeJr,eta1.Neurotensioncentralnervous systemeffectsofahypothalamicpeptide,BrainRes.1997,128:485 5.LeeTF,KeplerJR,MyersRD.Evaluationofneurotensiontheumolytic actionbyicyinfusionwithreceptorantgonistsandaCa2chelator. PharmacolBiochemBehav,1983,19(3):477 6.BrownMR,FisherLA,RiverJ,eta1.Coticotropin—rdeasingfactory: effectsonthesympatheticnervoussystemandoxygenconsumption. LifeSci,1982,30:207 (收稿日期2004—06—15) CHANGEINBoDYTEMPERATUREAFTERINJECTING NEURoTENSININToHYPoTHALAMNS ZhuBaoliang,ChengXiaodong,ZhangYanxia,etal (Departmentofphysiology,JiningMedicalcollege,Jining) AbstractObjectiveToobservethechangeofbodytemperatureafterinjectingNeurotensinintohypotha— lamns.MethodsInjectingNeurotensinandANTSintoPreopticanteriorhypothalamns(PO)andposterior hypothalamns(PH)ofratwithmicro— infusion,thebodytemperatureoftheratswasobserved,ResultsThe bodytemperatureoftheratsreducesafterinjectingneurotensinintodoublePO枷 anddoesnotafterinjecting neurotensinintodoublePH.InjectingANTSintodoublePO/AHcann'tchangebodytemperatureofrat.Con. clusionNeurotensininPreopticanteriorhypothalamnsmaytakepartinthermoregulationinthebodytempera— ture.Thisroleisnotendogenous. KeywordsNeurotensin;hypothalamns;Temperature ? 17?