iQ200AIM尿沉渣分析仪检测尿红细胞的性能评价

JiangxiJ.MedLabSci.June2007,Vol25,No3 ·实验研究· 目前国内使用较多的尿沉渣分析仪主要有两 大类,即流式细胞尿沉渣分析仪和影像式尿沉渣分 析仪。iQ200AIM尿沉渣分析仪 (美国Iris公司产 品,简称iQ200)是依据影像式尿沉渣分析仪的原理 ,结合平面流式细胞技术和高速摄影成像技术 的新型尿沉渣分析仪。由于iQ200在中国投入临床 使用仍属于起步阶段,国内关于仪器的性能评价和 临床应用价值的文献报道比较少。为初步了解 iQ200检测尿沉渣的性能,探讨仪器对泌尿系统疾 病诊断、鉴别诊断和预后分析的临床应用价值,以 及对提高尿常规检验水平所起的作用,本实验采用 仪器检测临床标本和质控品中红细胞的精密度、携 带污染率、稀释效果和与NB板法的一致性等五个 方面性能进行评价,结果如下所述。 1与方法 1.1对象 采集本院住院患者和体检者日常送检的尿液 标本共 325例。其中,采自男性尿样 175例,女性 150例;年龄范围在1岁至94岁之间。采自泌尿内 科患者尿样 13例,泌尿外科 26例,肾移植科 14 例,其他疾病患者240例,健康体检者32例。 1.2主要仪器与试剂 1.2.1仪器 iQ200AIM尿沉渣分析仪 (美国Iris 公司生产),AUTIONMAXAX-4280尿干化学分析 仪 (日本ARKRAY公司生产),Miditron尿干化学分 析仪(德国BoebringerMannheim公司生产),CX21光 学显微镜(日本 Olympus公司生产),牛鲍氏细胞计 数板(NB板)(上海市求精生化仪器有限公司生产)。 1.2.2试剂 iQControl/FocusSet尿红细胞质控试 剂盒 (美国 Iris公司生产),AUTIONSticks10EA尿 干化学试纸条 (日本 ARKRAY公司生产),Com- bur10Test! M尿干化学试纸条 (瑞士 Roche公司生 产)。 1.3实验方法 iQ200与 NB板镜检之间以双盲方式判读。镜 检方法按照 《中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 2292002尿液物理学、化学及沉渣分析》[1]进行,取尿 量 10ml,水平离心 400g(1500r/min,离心半径 16cm) 5min,弃上清液,留沉渣 0.2ml,混匀后充入 NB板, 静置2～3min后镜检计数。 1.3.1批内精密度试验 取新鲜尿样充分混匀后 分装10支试管,每支试管用 iQ200各作一次计数, 求均值(x)、标准差(s)、变异系数(CV)。 1.3.2批间精密度试验 取质控悬液 10ml,每天 随送检标本检测,连续测定 20个工作日,求 x、s、 CV。 1.3.3稀释效果试验 采集富含红细胞的尿样,取 红细胞低值、中值、高值范围,用正常尿上清液作 6 ～10个稀释度系列稀释,以稀释计算值为理论值 (X)。各稀释尿样用iQ200重复计数3次,取均值为 实测值(Y),作线性回归分析。 1.3.4携带污染率试验 连续 3次红细胞高值尿 样计数(H1、H2、H3),立即作连续3次红细胞低值尿样 (L1、L2、L3),按公式[(L1-L3)/(H3-L3)×100%]求携带污 染率。 1.3.5与 NB法的一致性评价试验 采集临床日 常送检的尿液标本,分别用iQ200和NB法作红细 iQ200AIM尿沉渣分析仪检测尿红细胞的性能评价 郑小玲 1 霍 健 2 钟秋颖 3 中图分类号R446.12+1,R169.39 文献标识码A 文章编号1008-0023(2007)03-0236-03 [摘要]目的 评价 iQ200AIM尿沉渣分析仪的性能,探讨其临床应用价值。 方法 使用 iQ200和 牛鲍氏细胞计数板对 325例尿液样本进行红细胞计数并进行统计分析。 结果 iQ200的批内精密度为 3.6%,批间精密度为 0.6%;对红细胞低、中、高值尿样的相关系数分别为 0.998、0.997、0.998;携带污染率 在 0～0.24%之间,平均为 0.16%;与牛鲍氏细胞计数板(NB法)计数红细胞的一致度为 0.77。 结论 iQ200 可用于过筛检查和治疗监控,具有较高的临床应用价值。 [关键词]iQ200;性能评价;尿红细胞 作者单位:510260 1、广东省广州医学院第二附属医院检验 科;广州医学院荔湾医院检验科;3、广州市罗岗疾病预防控 制中心 作者简介:郑小玲,1954年出生,女,主任技师,主要从事医学 检验工作。 236· · 江西医学检验 2007年6月 第25卷 第3期 Ai、Bj:边际值;ai、bj:边际率 3讨论 胞计数,方式为xx/μl。以NB法为参考方法,对 iQ200检测尿红细胞性能进行一致性评价试验。红 细胞计数自低值至高值分为8个级别,样品分别由 iQ200和 NB计数板镜检计数。凡结果相互在同一 级别作为相互符合,应用加权Kappa一致度统计法 计算一致度(Kw)。分级标准和评价标准分别见表 1 和表2。 2结果 2.1批内精密度 iQ200对10例不同红细胞浓度 的尿样进行检测,测得红细胞的CV在1.2%～7.4% 之间,平均为3.6%,见表3。 2.2批间精密度 质控品标记的红细胞浓度为 1205/μl,连续20个工作日用iQ200对其进行测定, 求得x为1206.6/μl,SD为7.4/μl,CV为0.6%。 2.3稀释效果 采集富含红细胞的尿样,取红细 胞低值范围 0～1900/μl,中值范围 0～3600/μl,高值 范围 0～6800/μl;分别作 6、8、10个稀释度测定,以 稀释计算值为理论值(X),实测值为(Y),应用 SPSS 11.0统计学软件作线性回归分析,见附图,求得斜 率(a)、截距(b)和相关系数(γ)如表4所示。其中,低值 样本在16.7%～100%稀释度范围的P>0.05;中值样 本在12.5%～100%稀释度范围的P>0.05;高值样本 在10%～100%稀释度范围的P<0.05。 2.4携带污染率 共作16对红细胞高、低值尿样 携带污染率试验。镜检红细胞高值范围在 590～ 18250/μl之间,平均6229/μl;低值范围在0～2/μl之 间,平均为1/μl。iQ200携带污染率在 0～0.24%之 间,平均0.16%。 2.5与NB法的一致性评价试验 iQ200和NB法 分别对281例尿样进行红细胞计数,应用加权Kap- pa一致度统计法(见表 5)求得 iQ200对 NB法的一 致度(Kw)为 0.77,说明 iQ200在检测尿红细胞方面 与标准化的常规方法有极好一致性。 表1尿红细胞计数级别设定 级别 NB法 iQ200法 1 2 3 4 5 6 7 8 <1 <3 <5 <10 <20 <50 <100 ≥100 <5.5 <16.5 <27.5 <55 <110 <275 <550 ≥550 表2 Kw值的参考评价原则 Kw 评价 (0.75,1] (0.4,0.75] [0,0.4] 一致性极好 一致性好 一致性差 表3 iQ200检测尿红细胞的批内精密度评价 标本 重复次数 x s CV(%) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 15.7 67.9 86.5 106.9 310.8 539.4 700.8 1039.3 266.3 3457.6 1.3 3.3 1.9 4.2 12.6 18.1 30.9 14.6 56.9 41.2 7.4 4.9 2.2 4 4.1 3.4 4.4 1.5 2.8 1.2 表4 iQ200检测尿红细胞的稀释效果 标本 范围(/μl) 斜率(a) 截距(b) 相关系数(γ) 1(低值) 2(中值) 3(高值) 0～1900 0～3600 0～6800 1.051 0.974 1.093 -59.931 -110.464 -242.867 0.998 0.997 0.998 附图 iQ200检测尿红细胞的线性回归分析 (单位:/μl):(1)低值;(2)中值;(3)高值 (1) (2) (3) 表5 iQ200与牛鲍计数尿红细胞一致性比较 iQ200 牛鲍计数板 Ai ai 1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8 Bj bj 55 27 2 1 0 0 0 0 85 0.3025 34 35 4 7 2 0 0 0 82 0.2918 7 8 9 7 2 0 0 0 33 0.1174 2 7 6 4 0 0 0 0 19 0.0676 0 2 2 8 1 0 0 0 13 0.0463 0 0 1 2 0 0 0 0 3 0.0107 0 0 0 0 0 0 1 7 8 0.0285 0 0 0 0 0 0 2 36 38 0.1352 98 79 24 29 5 0 3 43 281 0.3488 0.2811 0.0854 0.1032 0.0178 0.0000 0.0107 0.1530 237· · JiangxiJ.MedLabSci.June2007,Vol25,No3 (上接第 286页)ESBLs明显高于整体水平,占所有 ESBLs大 肠埃希菌的49.82%(136/273),比熊自忠等报道的64.3%低[1]。 3讨论 泌尿系感染是临床最常见感染性疾病之一,也是院内感 染的重要疾病。大肠埃希菌既是泌尿系感染的主要病原菌, 又是ESBLs主要代表菌。控制和治疗大肠埃希菌感染可有效 控制泌尿系感染,降低院内感染发生率,控制产 ESBLs菌株 的扩散与流行。 由于各种抗菌药物的药代动力学各有特征,NCCLS根据 其特性特别列出了部分抗菌药物治疗泌尿系感染。我们的结 果也显示萘啶酸、诺氟沙星、呋喃妥因等可用于治疗单纯尿 路感染;磷霉素用于大肠埃希菌所致的单纯尿路感染。呋喃 妥因和磷霉素对大肠埃希菌高度敏感,在无药敏试验时可作 为单纯泌尿系感染首选药物。在产ESBLS大肠埃希菌中,上 述两药仍保持高度敏感,大概与这两种药物较少用于其它感 染性疾病有关。据严智昌等报道,大肠埃希菌对头孢他啶、头 孢噻肟的敏感率分别为 73.5%、69.2%[2],与我院 61.11%、 50.00%相差比较大,这可能与各地用药习惯有关。我院从 2002年开始严格执行抗菌药物分级#管理#,有效控制抗菌 药物规范化使用,尤其是三代头孢菌素的使用,有效遏制了 细菌耐药性的产生,并控制了产ESBLS菌株的扩散。喹诺酮 类药物常用于治疗泌尿系感染,但其耐药率已非常高,不宜 作为经验用药的选择。 对于产 ESBLs菌株的选药十分有限,卢月梅等人报道只 有亚胺培南、阿米卡星对产 ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克伯 菌的敏感率大于90%[3]。亚胺培南价位高、广谱杀菌可引起二 重感染、最好不作口服给药,不宜作为产 ESBLs菌株所致单 纯泌尿系感染的首选。在肾功能正常又无其它禁忌的患者, 选择口服呋喃妥因、磷霉素治疗产ESBLS大肠埃希菌所致的 单纯泌尿系感染是最为经济有效的。 参 考 文 献 [1]熊自忠,朱德妹,张元婴,等.临床分离的克雷伯菌和大肠埃希菌中 超广谱 β-内酰胺酶检测[J].中华医学杂志,2002,21(10):1476～ 1479. [2]严智昌,于庆萍,孟昭彦,等.2001～2004细菌耐药性监测分析[J].中 华医院感染学杂志,2005,15(10):1169～1173. [3]卢月梅,张阮章,何 林,等.泌尿系感染产 ESBLs株耐药基因分型 及药敏试验[J].中华医院感染学杂志,2005,15(8):950～952. 实验结果说明,iQ200能对尿液中的红细胞进 行灵敏而精确的鉴别和计数,具备极高批内及批间 精密度和极低的携带污染率,可在相当大的范围内 对红细胞进行准确计数,作出定量报告。仪器的批 内精密度性能CV在1.2%～7.4%之间;携带污染率 在0～0.24%之间;对富含红细胞的低值和中值尿样 有良好的线性关系,而对高值尿样在10%～90%稀释 度范围仍没有偏离线性,只有在10%～100%稀释度 范围呈非线性相关。国内5家大型医院对已经广泛 使用的 UF-100流式细胞尿沉渣分析仪进行评价, 通过比较,iQ200仅在对红细胞高值尿样的稀释效 果性能稍逊于 UF-100,而低、中值尿样相当,在精 密度和携带污染率方面优于 UF-100[5],充分反映了 iQ200的优良性能。iQ200与NB板镜检计数尿红细 胞的一致度为0.77,说明仪器和标准化手工操作具 有极好的可比性。在评价实验中,评价者注意到日 常常规操作与标准化操作有较大的差距,由此反映 了尿沉渣检查标准化的重要性和必要性。 在本组实验中,研究发现iQ200尚有以下不足 之处。受检测原理所限,iQ200未能将尿红细胞区分 为均一性、非均一性等形态,不能判断泌尿系统出 血部位。仪器的成像部件CCD像素较低,对白细胞 的细胞核情况未能完全识别,未能清晰区别分叶核 细胞和单个核细胞。受系统的尿液有形成分数据库 容量限制,在实际应用过程中会出现对尿沉渣成分 复杂的尿样错判,此时操作人员应通过识别软件进 行二次筛选,以免造成漏诊或误诊。 综上所述iQ200受检测原理和技术所限,仍未 能完全取代传统的标准化显微镜检查,但作为一种 高效率、高精密度、低携带污染率,具有良好的线性 范围和敏感度、特异性的尿沉渣分析仪,可用于过 筛检查和治疗监控,具有较高的临床应用价值。 参 考 文 献 [1]卫生部卫生监督中心卫生标准处,临床检验标准汇编[S].北京:中 国标准出版社,2004.5:232～237. [2]丛玉隆,马骏龙,李云莲等.尿沉渣测定四种方法的参考值范围调 查[J].北京:中华医学检验杂志,1997,20(4):229～231. [3]马斌荣.医学统计学[M].第4版,北京:人民卫生出版社,2005. [4]王洁贞,韩 兢,刘言训,等.Kappa统计量在一致性和重现性检验 中的应用[J].济南:山东医科大学学报,1994,34(3):209～212. [5]金大鸣.UF-100型尿沉渣全自动检测仪评价[J].北京:中华医学检 验杂志,1998,21(3):190～191. 更正:本刊2007年第2期第186页《检验尿液pH值对院内尿路感染指导性用药的应用》漏排第二作者 陈灵敏(330008,南昌市洪都中医院),特此更正,并向作者致歉。 本刊编辑部 238· ·