铁盐催化比色法测定丽诺养颜片中原花青素含量

铁盐催化比色法测定丽诺募颜片【l】原花青素含量 孙丽华 江月仙 王巧懿 (浙江省医学科学院保健食品研究所 杭州 3l0013) 摘 要 应用铁盐催化比色法测定了丽诺养颜 片中原花青素的含量，其样品线性范围为28．4～ 410．0 g／ml，平均加标回收率为95．74％，相对标 准偏差为2．77％。该法操作简便、快速、准确，能 够用于本产品的质量控制。 关键词 铁盐催化 原花青素 原花青素 (简称PC)是植物王国中广泛存在 的一大类黄烷-3-醇衍生物的总称，因其抗氧化、 保护心血管、抗突变、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、皮肤保 健、改善视力等多种生理保健功能而备受关注 ⋯。 丽诺养颜片就是以原花青素为其功效成分，配以西 洋参、红花等而开发的一种具有美容祛斑、抗疲劳 之功效的新型保健食品。本试验采用铁盐催化比色 法 【2 对其含量进行了测定，以期为产品质控标准 提供依据。 1 材料与方法 1．1 仪器与材料 754型紫外可见分光 光度计 (上海第三分析食 品厂)；DKS—l2型恒温 水浴锅 (上海伊欧斯实业 有限公司中新电器厂 原 花青素对照品 (由抗州金 盟保健品有限公司、上海 金门生物工程有限公司提 供)；丽诺牌养颜片 ((由 抗州金盟保健品有限公 司、上海金门生物工程有 限公司提供 )。 2％NH F e(SO ) ’ 12H，O溶液：称取2 g NH F e(SO )，-12H，O溶 液于2mol／L盐酸溶液中定容至 100ml。 酸性正丁醇溶液：量取95ml正丁醇，加人5ml 浓盐酸，混匀即可。 1．2 对照品溶液的制备 精密称定原花青素对照品l2．3lmg于100m]容 量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀即得。此 对照品溶液浓度为0．1231mg／ml。 1．3 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液0、0．2、0．4、0．6、0．8、 1．0m1分别于 l 0ml具塞试管中，加人 0．2ml 2％NH F e (SO )，·l2H，O溶液和6ml酸性正丁 醇溶液，盖塞，摇匀，于95℃的水浴中加热反应 40min取出，于冰水中迅速冷却，溶液显红色，以 空白管作对照，于754型紫外可见分光光度计上 维普资讯 http://www.cqvip.com 550rim处测定其吸光度，用最小二乘法作原花青素 浓度 ～吸光度线性回归。 1．4 样品的测定 取l0片样品于研钵中充分粉碎 昆匀后，精确称 取 1．O00g左右，于 l00ml容量瓶中加入适量 甲醇 超声处理 lOmin，定容，离心，备用。 精密吸取上述样品待测液 Iml于 10ml具塞试 管中，按标准曲线制作项下依次加人 12％NH F e (SO )，·12H，O溶液等操作进行，测其吸光度。由 标准曲线回归方程算出含量，按其稀释倍数求得样 品中原花青素总含量。 2 结果与讨论 2．1 测定原理 原花青素在酸性条件下加热可发生一种氧化还 原反应，转变为红色的花青素，而花青素与硫酸铁 铵反应可生成较深颜色的化合物 【3’引，该化合物在 550ram处有最大吸收峰，而Fe +在整个反应体系 中则起到一个催化的作用，且其含量达到一定水平 时，反应才能够完全，比色测定其吸光值与原花青 素标准品对照便可定量计算样品中原花青素含量。 2．2 显色稳定性 溶液显色后，在30min内吸光度基本稳定，其 变化小于 1％，以后随时间的延长吸光值下降。因 此，测定时应在显色后30min内完成比色过程。 2．3 标准曲线及线性范围 溶液中原花青素浓度在28．4～4l0．0“g／ml 范围时，与吸光度呈线性相关，以最小二乘法计算 得其含量与其吸光度的线性回归方程为 Y：3． 9074x+0．0057，相关系数r=0．9997。 2．4 最低检出限 以扣除空白值后吸光值为0．0 l时相对应的浓 度值为最低检出限的计算方法，计算得最低检出限 为5“g，反应溶液总体积为10ml时，溶液的最低 检出浓度为0．05“g／ml。 2．5 精密度试验 为了考察方法的精密度，对同一批号样品进行 了l2次测定，其相对标准偏差为2．77％，说明本方 法具有较高的精密度，完全可以用于本产品的质量 控制。 2．6 样品实际测定和回收率试验 在三个批号样品中添加3个浓度水平的对照品 溶液，测其回收率，结果见表 l，由表 l可以看出 本方法对原花青素的平均加标回收率为95．74％， 说明在本产品实际测定中原花青素基本上能够定量 回收。 表 1 样品回收率试验 样品批号 试液测定值 加标量 样品加标后测定值 回收率 平均回收率 本法测定操作简单、经济、准确、稳定，能够 满足本产品质量控制的需要。 参考文献 1．赵超英，姚小曼．葡萄籽提取物原花青素的 营养保健功能．中国食品卫生杂志，2000，12(6)： 38～41． 2．Q／JM00l-2001． 3．GeorgeAS，ROna1dEW ．Phenolics of apple，pear and white grape juices and their changes with processing and storage—Areview．JAgr ic Food Chem．，l992，40：l478一l487． 4．吴卫华．苹果综合加工新技术．北京：中国轻 工业出版社，l996． 维普资讯 http://www.cqvip.com