【doc】碳酸锂对抗放化疗肿瘤患者遗传及氧化损伤作用的研究

【doc】碳酸锂对抗放化疗肿瘤患者遗传及氧化损伤作用的研究 碳酸锂对抗放化疗肿瘤患者遗传及氧化损 伤作用的研究 癌变?畸变-突变2002年4月第14卷第2期Carcn.gls.Teratogenesisand.MutagenesisVo]14No2Apt,2002 文章编号:1004—616X(2002)02—009803 碳酸锂对抗放化疗肿瘤患者遗传及氧化损伤作用的研究. ? 论着? 罗.鹏,张囊华,李军,拳笃才,任渝江,张碧霞,汪希兰,黄晓欣 (1贵阳医学院预防医学系卫生毒理教研室.贵州贵阳550004;2解放军第44医院肿瘤科,贵州贵阳550009) 【摘要】目的:探讨碳酸锂(Li2【))对放化疗肿瘤患者有无抗遗传及抗氧化损伤作用.;给予临床敲化疗肿瘤患者LicO 联合用药治疗.采用单细胞凝胶电濠试验,外周血淋巴细胞微棱试验及生化试验方法测定DNA损伤,微核率(MNF),超氧化 物歧化酶(SOD)和谷耽苷肽过氧化物酶(GSH-P~)活力,疏基(一SH)和雨j醛(MDA)含量.结果:随Li,COs疗程厦剂量的增 加.联合用药组与单纯放化疗组相比I)NA断裂分级,慧垦尾长,MNF显着降低(P<005j;SOD,GSH-Px活力,.SH占量, WBC总数显着增高(P<0O1).结论:Li20可降低肿瘤患者遗传损伤 程度,提高其抗氧化酶活性.降低抗癌药物的骨髓抑制 作用. f关键词】碳酸锂,肿瘤患者;淋巴细胞;遗传损伤;氧化损伤; 中髓分类号:R7336文献标识码:A INHIBITORYEFFECTOFLITHIUMCARBONATEONGENETICAND OXIDATIVEDAMAGEINCAN. CERPATIENTSWITHRADIOTHERAPYAND LUOPeng,ZFIANGAi-hua,LIJun,QINGDu-cai,PENYu—jiang,ZHAGN Bixia2,WANGXi,Ian, HUANGXiao—xin t1Dept.ofPrez~entiveMedicine,Guly2ngMedicalCollege,(hdyang550004.Chn?:244thHospital PLA,Ouis~ng550009,China) IAbstract】 Purpose:Toobservetheinhibitoryeffectoflithiumcarbonate(Li2CO,)Oilgeneticandoxidative damageincancerpatientsMethods:ThesinglecellgelelectmphoresisaSSay(SCGE),micmnucleustestwere usedtomeasureDNAandchFomosoma1damage.Atthesametime,SOD,GSH—Px,and-SHandMDAwerede. tectedbybiochemicaltestsResults:Thegeneticdamageofperiphera[bloodcellsincancerpatientswasrelieved graduallywithLi2C03treatment,andtheactivityandcontentoftheanti-oxida tivematerialandWBCnumber increasedsignificantlyConclusion:Li2003caninhibitgeneticdamage,incre asetheahili*yofantioxidationand relievethemyellogenicinhibition. ……=……一=i;………:;……;i::;;…-;…===…?:1;;==…:一;=………;;{……….;- 参考文献:s.China,1995,11[8-10):371 l】】Zh?zh粕,W帆D曲g.g.WeiLi-zhenAstudy饥mhodforI31ShahBE?ZekiKSugiuraT?alChineseme~dodherb.8COAl t】nthatagenicandmatagmkh讪-speed】c?8tEA]II.p虮蜢grac . ati 一 ~ty?iducl【l..{hun诅” Fhe10~幽aificCance一e…na … cell … sinv MA..:ademleP曲1991.332. m岫h{ungi[』]州』19.1:69 【2]ZbaoZe-zh,m,WangYu-qin,WdLi-ahenSttrvevor*mut0qgenlcit.vC51 ArId盯solD.B姆且nN,B【DwefsSD_rheeIrect.fa呲dants.n SOaairbornsuspendedp~tidesms】】L1agCityc】95bleo~*yema口n…ntiitH,andi?g帆omny?ys[] ShanghaiInternationa【Epidemio[ogieadAsso~hationCongre~M? ,Res1995.329(1):37,39 回收稿日期:2001.04-23;修订日期:2001.10—22 基盎项目:贵州省自然科学蓦金(G95a6表明其毒性低,无致突变作用_]?,具有抗 突变,抑瘤防瘤,增加白细胞(WBC)数目和增强免疫 调节,与抗癌药物联用可增效降毒等作用[3-71单 细胞凝腔电泳试验(singlecellgelelectrophoresisas- sav1SCGE)作为一种短期测试方法,在检测化学物质 引起的DNA损伤方面具有简便,快速,敏感性高等 优点,并可反映单个细胞的DNA损伤.为探讨碳酸 锂(1ithiumcarbonate,Li2CO3)对肿瘤患者有无抗遗 传,氧化损伤的作用,本研究采用SCGE及外周血淋 巴细胞微核试验对遗传损伤进行观察,并对其脂质过 氧化水平进行检测,以期为拓宽Li2CO的临床应用 范围提供科学依据. 1与方法 1.1对象临床组织病理学确诊的肿瘤患者(肺癌, 乳腺癌)38例,年龄35,65岁.对照组为健康献血 最41例,年龄30,60岁. 12分组及处理方法共设6组.对照组(A):41 例健康献血最;放化疗前组(B):38例未经任何治疗 的癌症患者;放化疗后组(C):20例经放化疗治疗(3 个月)的癌症患者{联合治疗I(D),11(E),1II组(F) 分别为癌症患者进行放化疗的同时,给予碳酸锂(上 海集成药广,片剂)1,2,3个疗程的3组(碳酸锂剂量 为每人每天750mg,3周为1个疗程,连续观察3个 疗程). 1.3观察指标及测定方法 1.3.1SCGE静脉采血0.5,1m1.措离心管管壁 滴加在等体积淋巴细胞分离液液面上,,3500r/rain 离心2min,吸取中间层淋巴细胞于10m1离心管中 加磷酸缓冲液(PBS)至5ml,1500r/min离心8mln, 如此重复洗涤细胞2次,再将细胞悬于PBS.置4? 待用.按文献8]检测及观察DNA断裂分级和DNA 慧星尾长. 132外周血淋巴细胞微核试验每人计数1000 个淋巴细胞出现微核的细胞数,计算微核率(mi cronucleusfrequency,MNF). 1.33脂质过氧化指标的测定血细胞超氧化物歧 化酶(SOD)活力测定采用邻苯三酚自氧化法,血细胞 谷胱甘肽过氧化物酶(GsH_Px)活力测定采用DTNB 直接法,血浆丙二醛(MDA)含量采用改良的八木国 夫法,血清琉基(SH)含量采用二盐酸一N一(1萘基)一 乙烯二胺比色法1 13.4外周血白细胞计数及血浆尿素氮(BUN) 分别用临床常规计数方法与生化测定法. 1.4统计分析实验数据用PEMS统计软件包进 行统计学处理(:检验和检验对DNA断裂分级及 慧星尾长进行显着性检验;检验对MNF,SOD, GSH-PX,MDA,一SH,WBC总数,BUN进行显着性检 验). 2结果 21Li2cO3对肿瘤患者体内遗传损伤的抑制作彤 表1可见,肿瘤患者各组与对照组,放化疗后组 与放化疗前组DNA断裂分级,DNA慧星尾长,外周 血淋巴细胞微核率(MNF)比较,差异均有显着性(P <[J01),DNA断裂分级在中,高级别的比例增加 联合治疗组与放化疗后组,联合治疗?,?组与I组 比较,差异均有显着性(P<0.I】1),DNA断裂分级在 中,高级别的比例逐渐减少. 表1.不同组别肿瘤患者血细胞DNA断裂分级,量量细胞尾长爰MNF 潮定结果 Table1ThegradeorDNAbreak?comettaillengthandMNrInbloodcellsorcaItcerI~atlents P<OO1comparedwithA.’’P<0.01comparedwithB.P<0.01comparedwithC, 口口P<001comparedwithDand? P<005comparedwithEZtestandttest —— 99—— 癌变?畸变?突变2002年4月第14卷第2期 Cardnoger,esls,Teram~enes:s_mdMmageneslsVol14No2Apr.2002 22Li2CO3对肿瘤患者体内氧化损伤的抑制作用 表2.Ll:o0,对肿瘤患者体内SOD,GSH-Px活力殛.sH,MDA含量影响 {j?l Table2-.Llmeffect0? SOD,GSH.Px,-SHandMDAincurI~aiemswithradiotherapyandchemotherapy ‘.尸<0.01comparedwithAandP<0.01comparedwithCby,standt’t 嘲 表2可见:放化疗前,后组与对照组比较,SOD, GSH—Px活力降低.一SH含量减少,MDA含量增加, 差异均有显着性(P<0O1).联台治疗I,?,?组 与放化疗后组相比SOD,GSH—Px活力,一SH含量均 有不同程度的升高或增加,差异有显着性(P< 001).MDA含量则减少. 23碳酸锂对抗癌药物骨髓及肾脏毒性的影n自结果 表3可见.放化疗后组WBC总数显着低于对照 组及放化疗前组(P<0O1).联台治疗?,?组 WBC总数显着高于放化疗后组(P<0.01). 表3不同组别癌患者WBC总数及BUN的溯定结果{;?} Table3.W??antlBUN%indiffereatgrolpsofapailents ‘P<0OlcomparedwithA.’’P<001?mpardwithBand P<001comparedwithCbyt’st 3讨论 SCGE试验是目前检测DNA损伤与修复的敏感 方法,近年来.被广泛应用于放射生物学的DNA损 伤与修复,DNA交联,遗传毒理,肿瘤治疗评价及细 咆凋亡等领域的研究..微核是国内检测放射损伤 的必测项目.亦是国际公认的筛选致癌,致突变物的 主要手段之一.随着对自由基研究的逐渐深入,人们 认识到氧化损伤与许多慢性疾病如衰老,肿瘤,突变 等密切相关. 一 100一 本研究观察到肿瘤患者各组的DNA断裂分级 中,高级别所占比俐,DNA慧星尾长和MNF均显着 高于正常对照组,提示肿瘤患者体内遗传物质DNA 和染色体已受到损伤;放化疗后组与放化疗前组相比 DNA断裂分级,DNA慧星尾长和MNF显着升高,表 明癌症患者遗传损伤程度加重;联合治疗?,?组与 联合治疗I组比较,差异有显着性(P<O.D1),DNA 慧星尾长减短,MNF降低,DNA断裂分级在中,高级 别的比例逐渐减少.由此推测碳酸锂可减轻肿瘤患 者遗传损伤程度. S0lI)是机体抗氧化系统中重要的金属酶类.它 能有效地清除生物氧化产生的02;GSH—Px则是机体 重要的含琉基抗氧化酶,主要GSH为基质催化过 氧化物的分解,从而起到抗氧化作用;MDA是体内脂 质过氧化的重要产物.本研究观察到,给子Li2co3 治疗的肿瘤患者体内SOD,GSH—Px活力和SH岔世 与联台用药前相比活力或含量增加.差异有显着性; MDA则有下降趋势,提示Li,cO对机体的酶促及非 酶促系统活力具有一定的诱导作用.间接清除体内自 由基,减轻氧化损伤的程度. 大多数临床抗癌药物都具有一定的骨髓抑制作 用,WBC及BUN是分别反映骨髓毒性及肾功能的常 用指标,通过测定WBC,]BUN含量可了解骨髓造血 系统及肾脏损害情况,指导调节临床用药.本研究结 果表明睫Li2CO3治疗疗程增加,WBC总数逐渐增 加,说明LiCO3能降低临床常用抗肿瘤药物的骨髓 毒副作用.在本研究用药条件下未发现患者肾毒性 建议临床用药在密切监测血锂浓度及尿素氮的条件 下,可酌情加大碳酸锂剂量或延长疗程. 练上,碳酸锂与抗癌药联合应用于临床癌症患者 治疗时,可减轻肿瘤患者遗传损伤程度,同时诱导患 癌变?畸变?突变2002年4月第l4卷第2期Carcinogenesis.Tera~enesls}mdMutagene~sVol14No2Apt2002 文章编号:1004616X(2002)02010106?论着? O.甲基鸟嘌呤.DNA甲基转移酶基因多态性与肿瘤易感性的关系 刘汝青一,庄志雄,何春华,何云 (1.中国预防医学科学院探圳研究中心.广东深圳510020;2中山医科大学学院环境卫生教研室.广东广 州510080;3中山医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室,广东广州510080) 【摘要1目的;探讨中国南方汉旗人群06一甲基鸟嘌呤一DNA甲 基转移酶(MGMT)基因5个外显子的多态性与肿瘤易感性的关 系.方法:采用聚合酶链式反应(P检测刊MG.UIT基固第5外显子第200位密码子的第2个碱基G被C取代.即GGC~GCC.所编 码的氨基酸由甘氨酸变为缬氨酸,这一多态不存在于正常对照中.结论:MGMT基固第3,4,5外显子上存在着多志性,其中 第3.4外显子的多志改变与肿瘤形成的关系较弱,而第5外显子的多态仅见于肿瘤患者,可能与肿瘤的形成有关. 【关键词】O一甲基鸟嘌呤一DNA甲基转移酶(MGMT);基因多态性;肿瘤 中图分娄号:R3943;?54文献标识玛:A RELATIONSHIPBETWEENGENETICPOLYMORPHISMSOFHUMA N06.METHYLGUANINE-DNA METHYLTRANSFERASE(MGMT)GENEANDSUSCEPTIBILITYT OTUMORS LIURu—qing一,ZHUANGZhi-xiong,HEChun-huat,HEYunJ 辛体内酶促及非酶促系统活力增强.间接清除体内自[4]张爱华,黄晓欣.罗鹏,等碳酸锂对荷瘸鼠的抑癣防瘤及托 由基,减轻氧化损伤程度,因此,Li2co3具有一定的氧化作用研l『_卫生研究,1998?2(2):,80 抗遗传,抗氧化损伤作用,同时可降低抗肿瘤药物的:理束进? 骨髓毒作用.Li2CO3临床应用前景广阔,其临床用[6】吴易元.蔡冬坡,畅旭皓,等锂对免疫系统的调节作Rj[j]中 药剂量,周期及远期疗效值有待于进一步深入研究.国肿痛,1996.5(7):32 致酣:参加此_】_=作尚有垒芳李炳福在此.井致谢[7]黄晓聩.张爱华.罗鹳.等碳酸锂对环6译酰胺的抑瘤防痼及 毒副作用的形响[J]癌变?畸变?突变,1998.10(2):85,89 参考文献[8]孟紫强?张连珍应用单细胞微凝歧电濠技术研究细胞DNA [1]扬教勇.张同东微量元索锂的生物学,药教学和毒性作用[J]伤的原理方法[j]墙变畸变’突变,1998,10(6):377”~382 国外医学.医学地理分册,1999.20(3):112,116[9】罗鹏?张爱华,洪峰?荨旗I煤染本!砷中毒患者体内氧 [2]张爱华.张桥锂铋镧3种盘扁化台绚的诱变作用研究[J]与抗氧化系境损伤的观察j]中国地方府学杂志?2000?19 微量无索与娃康研究.1995,12(5):3,5(1):10,l2’ [3]张爱华.黄晓欣,陆爽,等碳酸锂的抗诱变作用及抗癌作Rj[1O]张建真,街正昌,廖艳?等慧星试验掩测间接诱变制耐小鼠 机理研究[J]国外医学.临床生物化学与擒验学分册.1999,20睾丸细胞的DNA~IN[]]癌变畸变’赛变,2001?13(1):4, (增刊):l42,143.7 0收稿日期:2001—08.17修订日期:2001一10.12 作者简秆:刘汝青(1975.),女.广求省中山市人,助教.硕士,现中山医科大学任教.研究方向为毒理学 tel:020?8733I596,Emn{Liuruqing@163ne【 101