线粒体乙醛脱氢酶2在心肌保护中的作用及可能机

线粒体乙醛脱氢酶2在心肌保护中的作用及可能机 线粒体乙醛脱氢酶2在心肌保护中的作用及可能机 线粒体乙醛脱氢酶2在心肌保护中的作用及可能机 目的:研究ALDH2对离体大鼠心肌缺血/复灌损伤的作用，进一步探讨ALDH2心肌保护作用是否与体内一氧化氮的生成有关，并分析线粒体通透性转换孔是否参与其中。方法:实验大鼠随机分为缺血/复灌组(Ischemia and Reperfusion, I/R)、酒精(ethanol, EtOH)干预组(I/R+EtOH)、氨基氰(cyanamide, CYA)干预组(I/R+CYA)及酒精+氨基氰干预组(I/R+EtOH+CYA);硝基L-精氨酸甲基酯 (NG-nitro-L-methyl arginine ester,L-NAME)干预组(I/R+L-NAME)及酒精+硝基L-精氨酸甲基酯干预组(I/R+EtOH+L-NAME);酒精+苍术苷(Atractyloside,Atr)干预组(I/R+EtOH+Atr)。采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30min和复灌120min复制局部缺血/复灌损伤模型,测定左室心功能指标;测量冠脉流出液中乳酸脱氢酶(lactatede hydrogenase，LDH)含量及心肌组织一氧化氮(nitric oxide, NO)含量; TTC双染法测定心肌梗死面积; RT-PCR技术检测心肌组织中ALDH 2、Bcl- 2、Bax的基因达。结果: 1.左室心功能指标:I/R组缺血后左室发展压(left ventricular developed pressure, LVDP)、左室内压最大上升速率/下降速率(?dp/dtmax)、左心室做功(rate pressure product, RPP)下降，心率(heart rate, HR)稍下降，左室舒张末压(left ventricular end diastolic pressure,LVEDP)抬高，复灌末LVDP、?dp/dtmax、HR和RPP均下降明显，LVEDP明显抬高。与I/R组相比，EtOH组抑制了LVDP、HR、?dp/dtmax及RPP的下降并抑制了LVEDP的抬高(P0.05~P0.01);CYA组促进了复灌期LVDP、?dp/dtmax、RPP的下降并抬高了LVEDP(P0.05~P0.01);EtOH+CYA组、EtOH+L-NAME及EtOH+Atr组的结果与CYA组类似(P0.05~P0.01)。 2.冠脉流出液中LDH含量:与I/R组相比，EtOH组、EtOH+L-NAME组明显降低了复灌初期冠脉流出液中LDH的释放(P0.01);CYA组和EtOH+CYA组明显增加了LDH的释放(P0.01)。与EtOH组相比，EtOH+CYA 组、EtOH+Atr组明显增加了LDH的释放(P0.01);EtOH+L-NAME组在复灌5min时明显增加了冠脉流出液中LDH的释放(P0.01)。 3.心肌梗死面积:与I/R组相比，EtOH组降低了心肌梗死面积(P0.05);CYA组、EtOH+CYA组及EtOH+Atr组明显增加了心肌梗死面积(P0.01)。与EtOH组相比，EtOH+CYA组、EtOH+L-NAME组、EtOH+Atr组均明显增加了心肌梗死面积(P0.01)。 4.心肌组织中的NO量:与I/R组相比，EtOH组、L-NAME组及EtOH+L-NAME组均明显降低了心肌组织中的NO含量(P0.01)。与EtOH组相比，EtOH+L-NAME组进一步降低了NO的释放。 5.RT-PCR:与I/R组相比，EtOH组心肌组织中ALDH 2、Bcl-2表达显著增高(P0.01)，Bax表达显著降低(P0.01);CYA组和EtOH+CYA组ALDH 2、Bcl-2表达显著降低(P0.05~P0.01)，Bax表达显著增高(P0.05);EtOH+Atr组ALDH 2、Bcl-2表达显著降低(P0.01)，Bax差异无显著性(P0.05)。与EtOH组相比，EtOH+CYA组、EtOH+L-NAME组、EtOH+Atr组ALDH 2、Bcl-2表达显著降低(P0.01)，Bax表达显著增高(P0.01)。结论:ALDH2活性增高起到保护心肌和抗凋亡的作用，ALDH2活性降低加重了心肌损伤，促进心肌凋亡。ALDH2心肌保护机制可能与降低缺血/复灌心肌组织中的NO有关; ALDH2可抑制线粒体渗透性转换孔道的开放。 中文摘要4-6Abstract6-8引言8-9第一部分 乙醛脱氢酶9-30前言9-10材料与方法10-17结果17-25讨论25-27小结27-28 参考文献 28-30第二部分 乙醛脱氢酶 2 心肌保护作用与一氧化氮关系的研究30-46前言30材料与方法30-32结果32-41讨论41-43小结43-44 参考文献 44-46第三部分 线粒体通透性转换孔在乙醛脱氢酶 2 心肌保护中的作用46-59前言46材料与方法46-48结果48-55讨论55-56小结56-57 参考文献 57-59结论59-60致谢60-61附录 A 英中文术语缩略语对照表61-62附录 B 发表论文62-63附录 C 综述63-69 参考文献 67-69