呼吸道真菌感染和药敏结果分析

呼吸道真菌感染和药敏结果分析 呼吸道真菌感染和药敏结果分析 220中国医学检验杂志2009年8月第lO卷第4期ChineseJournalofMedicalLaboratoryTechnology,Aug2009一Vo1.10No.4 【检测】 【DetectionReport】 呼吸道真菌感染和药敏结果分析 ANALYSISONRESPIRATORYTRACTFUNGUSINFECTIONANDRESU1S 0FANTIFUNGALSUSCEPTIBILITYTEST 伍海英 (永州职业技术学院附属医院检验科,湖南永州425006) 摘要[目的]了解我院下呼吸道真菌感染和药敏测试情况.[方法]收集我院呼吸道标本1020株,对其检出的271株真 菌进行5种常用抗真菌药的体外敏感性检测.[结果]通过痰液涂片结合分离培养,菌种分布以白色念珠菌为主,占59.6%.对 5种常用药物(5氟胞嘧啶,,氟康唑,伊曲康唑,伏立康唑,两性霉素B)进行耐药性分析,发现除克柔念珠菌外,其他真菌对5氟胞 嘧啶,两性霉素B和唑类比较敏感,克柔念珠菌对氟康唑耐药.f结论]对痰液标本进行涂片和培养,发现真菌感染仍以白色念珠 菌为主,除克柔念珠菌外,其他真菌对5氟胞嘧啶,两性霉素B和唑类比较敏感,克柔念珠菌对氟康唑耐药,重视真菌分离鉴定和 药敏测试. 关键词呼吸道感染;真菌;痰涂片和培养;真菌药敏试验;白色念珠菌 Analysisoilrespiratorytractfungusinfectionandresultsofantifungalsusceptibilitytest WuHaiying.DepartmentofLaborarytoryTests,AffiliatedHospitalofYongzhouVocational —techCollege,Yongzhou425006,China Abstract[objective]Toanalyzetherespiratorytractfungusinfectionandtheresultsofantifun galsusceptibilitytestinourhospita1. [Methods]Wecollected1020samplesfromrespiratorytractandanalyzedfiveantifungalsus ceptibilitytestsfor271fungalisolates.[Re? suits]Throughsputumsmearandculture,theprevalencerateoffungalinfectionwasmainlyC albieans(59.6%).Resultsofantifungal testinvitroshowedthat5FC,AMB,FCA,ICZ,VRC,AMBweresensitive.Candidakruseiwa sresistanttoFCA.[Conclusion]Combi— nationofsputumsmearwithcultureshowsthatCalbicansisthemajorstrainforfungalinfectio n.Itisimportanttoconductdrugsensitive test. KeywordsRespiratorytractinfection;Fungus;Sputumsmearandculture;Antifungalsuscep tibilitytest;Calbicans [中图分类号]R379[文献标识码]B[文章编号]1606—8025(2009)04—220-02 随着医疗技术的发展,近年来广谱抗生素,免疫抑制剂, 介入性检查治疗手段的广泛应用,肿瘤化疗,放疗,器官移植 和社会老龄化等因素引起的免疫功能低下人群比例增高,临 床真菌感染近年呈上升趋势,尤其是近年来抗真菌感染的治 疗或者预防性治疗,导致真菌感染菌株及耐药趋势发生变化. 而下呼吸道最常见继发真菌二重感染,因此对痰液标本真 菌分离和正确鉴定和药敏试验指导用药显得尤为重要,现将 本院2007年2008年呼吸道感染患者痰培养念珠菌分布及药 敏试验结果报道如下. 1材料与方法 1.1标本来源收集2007年,2008年住院患者痰标本1020 例,有呼吸道感染后使用抗生素史,年龄40,85岁 1.2材料血平板,麦康凯和沙保罗培养基(由法国梅里埃 公司);念珠菌显色培养基(CHROMAGARCANDIDA);真菌 鉴定及药敏板条FUNGUS(由法国梅里埃生物公司). 1.3方法 1.3.1标本留取嘱患者清水漱口后用一次性无菌痰培养 杯留取自下呼吸道清晨咳出的第一口痰,并叮嘱护理部及时 送检. 1.3.2真菌分离和鉴定 1.3.2.1标本接种前处理按照《全国临床检验操作规程》 将痰消化去污后直接涂片镜检J,取镜下白细胞数>25每高 倍视野,上皮细胞<10每高倍视野并伴有出芽酵母样菌菌丝 的痰液进行接种. 1.3.2.2分离培养分区划线接种血平板,中国蓝和沙保罗 培养基,分别放置在含5%一10%CO:和普通环境和35?培 养18,24h,真菌培养48h,沙保氏平板检有奶油色,面光 滑,类酵母型,有酵母味,中量或大量. 1.3.2.3涂片镜检观察培养好的细菌菌落特征并涂片行革 兰染色.如镜检到革兰阳性球菌,瓜子形态等特征立即进行 细菌分纯. 1.3.2.4细菌鉴定芽管形成试验;氯化三苯四氮唑(rlTC 还原);显色鉴定;梅里挨真菌鉴定试剂条. 1.3.2.5药物敏感试验按ATBFUNGUS真菌药敏试剂条 说明进行操作,对5种抗真菌药物(5氟胞嘧啶,氟康唑,伊曲 康唑,伏立康唑,两性霉素)进行敏感测试. 1.3.2.6临床真菌感染确认如实验室分离出真菌,嘱患者 再次进行痰标本真菌培养,两次均有同种真菌生长者,方认为 患者真菌感染. 2结果 2.1真菌分布从1020例住院患者的痰标本中,分离出271 例为真菌感染,占26.6%,各种真菌分布见表1. 中国医学检验杂志2009年8月第1O卷第4期 ChineseJournal0fMedicalLaboratoryTechn0lo.Aug2009,Vo1.10N0.4221 表1下呼吸道真菌分布情况表 Tab1Distributionoffungiinthelowerrespiratorytract 2.2细菌药敏试验271例住院患者痰培养念珠菌对5种抗 真菌药物的药敏试验结果见表2. 3讨论 真菌广泛存在自然界和人体表面,是一种条件致病菌特 别是在严重基础疾病,免疫力低下,长期(或联合)使用抗生 素,激素及免疫抑制剂的广泛使用,导致机体功能低下,菌群 失调,是念珠菌感染的危险因素,尤其呼吸道感染的患者长期 使用抗生素,机体抵抗力下降及菌群失调时,而继发真菌性感 染.在我院2007年,2008年1020份呼吸道标本中,按照痰 液培养的规程操作,尤其是注重接种前标本控制处理,进 行涂片观察白细胞和上皮细胞以及细菌和真菌情况,结合培 养结果进行下一步鉴定和药敏工作.微生物工作者对呼吸道 标本的处理都比较难以达到一致,对于这个难题我科注重直 接涂片观察,发现有真菌孢子和菌丝痰液接种沙保氏真菌培 表2271例痰培养念珠菌感染药敏试验结果 Tab2Drugsensitivetestinthe2271cases 药物 白色念珠菌(2o6) 株数敏感率 热带念珠菌(25)克柔念珠菌(21? ———-——-————----'__-_H-HH——'—?—一 (11)其他(8) 株数敏感率株数敏感率株数敏感率株数敏感率 5氟胞嘧啶 氟康唑 伊曲康唑 伏立康唑 两性霉素 11100% 1090.91% 1】l0O.oo% 11100.OO% ll100.0HO% 养基,提高了真菌的分离率,对结合培养结果进行一致性分 析.建议微生物工作者都注重直接涂片观察这一步质量控 制. 在2007年,2008年1020份呼吸道标本中共检查出真菌 271例,占26.6%,主要为白色念珠菌,占总株数中76.0%,这 与白色念珠菌本身就是口腔,上呼吸道的正常寄生菌有关,当 机体受外界影响,如长期使用抗生素,免疫状态下降时,成为 致病菌,而发生内源性感染.其次是热带念珠菌,为9.2%. 这与文献报道一致.对于呼吸道容易继发性真菌感染,提 示临床医生及患者重视微生物检测和药敏结果,合理有效使 用抗生素,以减少真菌二重感染. 随着抗真菌药物的使用,耐药现象也明显多起来,因此对 真菌检查后不仅仅是经验性抗真菌治疗,而应谨慎合理进行 用药.我院采用CLSI真菌稀释法药物敏感试验,测定其五种 抗真菌药物(5氟胞嘧啶,氟康唑,伊曲康唑,伏立康唑,两性霉 素)MIC作为临床用药指导.在药敏测试中,除克柔念珠菌 外,其他念珠菌对抗真菌药物敏感性都很好,都>85%,对 于唑类3种唑类药物(氟康唑,伊曲康唑,伏立康唑)耐药性比 两性霉素B,5氟胞嘧啶稍高,但是因为于5一FC易发生耐药, AMB的肾毒性大,而氟康唑因其肝,肾毒性低,抗真菌谱广,半 衰期长,口服生物利用度高,临床上趋于使用唑类抗真菌药 物,但其耐药性有增多的趋势,尤其是有交叉耐药的特性, 因此对于真菌的药物敏感测试显得尤为重要.在对克柔念珠 菌的药敏测试中,我们发现其对氟康唑的敏感性只有19.5%, 文献报道其对氟康唑有天然耐药的特性,由此我们知道对 真菌的鉴定有助于临床用药,而临床用药又需依赖于药敏测 试,这使得微生物工作者需加强真菌的检测,与临床医生一起 共同应对呼吸道真菌感染的治疗和控制. 参考文献 [1]辜金莲,陈劲龙,刘朝晖,等.老年患者肺部真菌感染临床分析 [J].实用医学杂志,2003,19(9):989—990. [2]叶应妩,编.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大 学出版社. [3]高素平,高东田,史衍席.深部真菌的鉴定和药敏试验对抗真菌感 染的作用[J].中国麻风皮肤杂志,2002,18(2):134—135. [4]罗蔬薇,曹何,夏云,等.482株念珠菌感染病原菌调查和药敏结 果分析[J].四JII医学,2002,23(1):34—35. [5]张之烽,夏永泉.152株白色念珠菌药敏分析[J].临床检验杂志, 1999,17(3):1711. [6]DupontB,GraybillJR,AmstrongD,eta1.FungalinfectionsinAIDS patients[J].JMedVetMycol,1992,30:19—28. (收稿日期:2009-06—17) %%%% O0OO呼 5555O 7777l 8888 %%%% 啪 4"加 %%%%% %38% %%%%% ? 舛粥 2O753加加