06血清总胆红素和直接胆红素测定

06血清总胆红素和直接胆红素测定 标:血清总胆红素和直接胆红素测定 版本号:A 修订号:0 文件编号CJYYLAB-SH-SOP-006 发布日期:2006年06月06日 生效日期:2006年07月01日 发布部门:管理层 编制人:何顺卿 审核人:钟尊勇 批准人:张范 页码: 共 3 页 一、目的 胆红素是血红蛋白的代谢产物～来源有三:,1,人体内胆红 素的3/4源于循环血液中衰老红细胞崩解后所释放出的血红蛋 白辅基血红素降解而产生,,2,骨髓中的红细胞原位溶血所释放 的血红蛋白,,3,含卟啉的血色蛋白如肌红蛋白和其他非血红蛋 白性的正铁血红素分解后产生极少量胆红素。 血红蛋白被单核-巨噬细胞系统破坏后分解成胆绿素～再还 原成胆红素进入血与血浆白蛋白结合而被运转～称为非结合胆红 素或间接胆红素,间接胆红素难溶于水～不能由肾脏排出而进入 肝脏～受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合～形 成葡萄糖醛酸酯～称为结合胆红素或直接胆红素。 结合胆红素由肝随胆汁排至肠道～被还原成粪胆原,尿胆原, 再经氧化变成粪胆素,尿胆素,～大部分随粪便排出体外,小部 分经门脉吸收回肝～复经肝肠循环～其中一小部分进入血循环～ 经肾排出～称尿胆原。当肝细胞损伤～胆管阻塞～红细胞破坏增 加或寿命缩短时～胆红素代谢发生异常～临床上即出现黄疸。 二、测定方法 改良J-G法 三、原理 血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂混合后～加入偶氮苯磺 酸～生成紫色的偶氮胆红素。其中醋酸缓冲液用以保持偶氮反应 的PH～咖啡因、苯甲酸钠加速偶氮苯磺酸的偶联反应。抗坏血 酸破坏剩余偶氮试剂～终止偶氮反应。最后加入强碱性酒石酸溶 液使紫色偶氮胆红素变成蓝色偶氮胆红素～在600nm波长下比色, 1 测定蓝色偶氮胆红素的生成量。 四、标本 1、静脉抽取病人空腹血～置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。 2、采血后应立即送到检验科生化室。 、样品收到后立即分离血清～不能及时测定的血清应于2—8?3 保存。 4、溶血或脂血的标本不能测定。 五、设备及试剂 1、希迈全自动生化仪。 2、上海复星长征公司胆红素试剂。 3、胆红素试剂应于2—8?冰箱保存。 六、操作步骤 1、样本的准备:将编好号的样品离心～取血清加入样品杯放到样 品盘的规定位置～再把样品盘放到仪器中相应位置。 2、试剂的检查:每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标 等情况～确认无误后方可进行测定。 3、操作方法:详见希迈生化仪操作手册。 七、质量控制 每天操作过程中应使用上海复星长征公司的生化质控血清 至少做一次室内质控～每年定期参加海南省临检中心所组织的室 间质评。 八、干扰因素 1、 轻度溶血对本法无影响～但严重溶血时可使测定结果偏低～ 其原因是血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物可破坏偶氮胆 红素～还可被亚硝酸氧化为高铁血红蛋白而干扰测定。 2、 胆红素对光敏感～标本应尽量避光～尽早测定。 2 3、 脂血对测定有干扰～尽量抽取空腹血。 4、 胆红素结果过高时～可用生理盐水稀释后测定。 九、参考区间 总胆红素:1.7—17.1 umol/l 直接胆红素:0—6 umol/l 总胆红素-直接胆红素 间接胆红素= 十、实验室解释 血清胆红素的测定能准确地反映黄疸的程度～对临床诊断隐 性黄疸及黄疸有重要意义。 1、 肝细胞疾病如急性黄疸性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝坏死 等～胆红素会有升高现象。 2、 阻塞性疾病如胆石症、肝癌、胰头癌等压迫造成的胆道阻 塞性疾患～可使血清总胆红素和直接胆红素均升高。 3、 新生儿黄疸、败血症、溶血性贫血、恶性疟疾、严重大面 积烧伤或因输血不当引起溶血等可引起总胆红素、间接胆红素 升高。 十一、异常结果处理 实验结果应与临床相符～不符的应复查。 十二、参考文献 1、 叶应妩、王毓三主编～全国临床检验操作规程～中华人民共和 国卫生部医政司、南京、第二版、1997。 2、管正大主编～医学检验临床意义手册～人民军医出版社～北京、 第一版、1994。 3、王淑娟、周惠平、夏铁安主编～现代实验诊断学手册～北京医 科大学、协和医科大学联合出版社～北京、第一版、1995。 3