灵仙跌打片质量标准研究

灵仙跌打片质量研究 灵仙跌打片质量标准研究 476陕西中医2009年第3O卷第4期 灵仙跌打片质量标准研究 宋文惠朱亚宁李巧如陕西省人民医院药剂科(西安710068) 摘要目的:建立灵仙跌打片的质量标准.:采用TLC法对灵仙跌打片中威灵仙药材进行了 定性鉴别,对川乌中乌头碱进行了限量检测.用紫外分光光度法,对灵仙跌打片中乌头总 生物碱进行了含量测定.结果:薄层色谱斑点明显,含量测定重现性好,平均回收率为 1OO.98,RSD为1.51.结论:方法简便,准确,灵敏,重现性好,可用于其质量控制. 主题词威灵仙/化学制川鸟/化学五灵脂/分析生物碱/分析@灵仙跌打片 灵仙跌打片是《中华人民共和国卫生部药品标 准》中药成方制剂第七册收载品种,由威灵仙,制川I乌, 五灵脂(醋炒)三味药材组成.具有散风祛湿,活血止 痛.用于手足麻痹,时发疼痛,跌打损伤,痛不可忍或瘫 痪等症.方中含有毒性药材川乌,但原标准既无薄层鉴 别,也无含量测定.因此,为确保患者用药安全有效,有 必要对其质量标准进行提高. 1仪器,试药1.1仪器752C紫外可见分光 光度计,UW120D电子天秤,PHS一3C精密PH计. 1.2试药乌头碱对照品由中国药品生物制品 检定所提供,灵仙跌打片由西安正大药业有限公司提 供.所用试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1薄层色谱鉴别2.1.1威灵仙的鉴别:取本 品1O片,除去糖衣,研细,加乙醇50ml,加热回流1h, 滤过,滤液浓缩至约20ml,加盐酸3ml,加热回流1h, 加水10ml,放冷,加石油醚(60,90C)振摇提取2次, 每次15ml,合并石油醚,蒸干,残渣加无水乙醇lml使 溶解,作为供试品溶液.另取齐墩果酸对照品,加无水 乙醇制成每lml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液. 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试 验,吸取上述三种溶液各5l,分别点于同一含羧甲基 纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以环己烷一丙 ,取出,晾干,喷以 酮一醋酸乙酯(5:2:1)为展开剂,展开 10%硫酸乙醇溶液,在105C加热至斑点显色清晰.供 试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜 色的斑点,阴性样品无干扰.见图1. 2.1.2乌头碱限量:取本品5片,除去糖衣,精密 称重,研细,置具塞锥形瓶中,加氨试液4ml,用乙醚振 摇提取4次,每次10ml,合并乙醚液,蒸干,残渣加无 水乙醇lml使溶解,作为供试品溶液.另取乌头碱对 照品,加无水乙醇制成lml含2mg的溶液,作为对照 品溶液.照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VIB)试验,吸取上述两种溶液各5l,分别点于同一含 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以正己 烷醋酸乙酯一乙醇一氨水(6.4:3.6:1:3滴)为展开剂, 预饱和30min,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试 液.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上出现 的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点. 1.齐墩果酸2—4.三批样品5威灵仙阴性样品 图l灵仙跌打片中威灵仙的TLC 2.2含量测定2.2.1对照品溶液的制备:精密 称取105C干燥至恒重的乌头碱对照品6.75mg,置 50ml量瓶中,加三氯甲烷溶解并稀释至刻度,摇匀,即 得. 2.2.2标准曲线的制备:精密吸取对照品溶液0. 25ml,0.5ml,lml,2ml,3ml,4ml,分别置分液漏斗中, 依次精密加入三氯甲烷至20ml,再精密加入PH3.0 醋酸盐缓冲液(称取无水醋酸钠0.15g,加水使溶解, 加冰醋酸5.6ml,用水稀释至500ml,摇匀,并在PH计 上校正)10ml和0.1%溴甲酚绿溶液(取溴甲酚绿0. 2g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解,用水 稀释至200ml,摇匀)2ml,强力振摇5rain,静置20min, 分取三氯甲烷层,用干燥滤纸滤过,以相应试剂为空 白,滤液照分光光度法,分别在412nm波长处测定吸 收度.以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲 线Ey一0.0327x一0.0077,r一0.99993.结果表明,乌头 碱的吸收度在1.69,27~g/ml范围内呈良好线性关 系 陕西中医2009年第30卷第4期477 2.z.3供试品溶液的制备:取本品20片,除去糖 衣,精密称重,研细,取0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶 中,精密加入乙醚一三氯甲烷一无水乙醇(16:8:1)的混 合液25ml与浓氨试液1.5ml,摇匀,称定重量,置快速 混匀器上振荡3次,每次2min,放置过夜,再称定重 量,用上述混合液补足减失的重量,再置快速混匀器上 振荡2min,静置.倾取上清液,精密量取5ml,置分液 漏斗中,加乙醚5mI,用0.05mol/L硫酸溶液提取4 次,每次10ml,分取硫酸液,合并,置另一分液漏斗中, 加浓氨试液调PH至9,用三氯甲烷提取4次,每次 10ml,分取三氯甲烷液,合并,蒸干,残渣加三氯甲烷 分次溶解,转移至25ml量瓶中,加三氯甲烷至刻度, 摇匀.精密量取20ml,置分液漏斗中,照标准曲线制备 项下的方法,自"精密加入PH3.0醋酸盐缓冲液 10ml"起依法测定吸收度,从标准曲线上读出供试品 溶液中含乌头总生物碱的量(g),计算,即得. 2.2.4干扰试验:取制川乌空白对照样品粉末0. 5g,按照上述供试品溶液制备方法制备制川乌空白对 照溶液,同供试品溶液测定方法测定,结果空白对照溶 液吸收度0.009,表明处方中其它成分对乌头碱含量 测定干扰小. 2.2.5精密度试验:精密量取标准品溶液2ml,按 标准曲线制备方法制备,平行6份,测定吸收度.结果 表明本方法精密度良好(RSD一0.44%). 2.2.6重现性试验:精密称取同批号样品5份,按 供试品溶液制备方法制备,同法测定,结果表明本方法 重现性良好(RSD一0.54%). 2.2.7稳定性试验:取同批样品的按供试品溶液 制备方法制备,分别于0,1,2,4,6h依法测定吸收度, 结果表明供试品溶液在6h内稳定(RSD一0.17). 2.2.8回收率试验:取已知含量的样品3份各0. 2g,精密称重,分别精密加入一定量乌头碱,按供试品 溶液制备方法制备,依法测定,结果平均回收率99. 14,RSD为0.92.表明本方法测定乌头总生物碱含 量专属性强. 2.2.9样品含量测定:分别精密称取三批样品,按 上述含量测定方法测定其中乌头总生物碱含量,结果 ,故将本品含 可得每批样品的含量都高于1.0rag/片 量的最低限度定为1.0mg/片. 3讨论制川乌所含以乌头碱为代表的酯型 生物碱为有毒成分,对其含量要严格控制.因川乌含有 多种生物碱,因此,参考药典"风湿骨痛胶囊"中乌头 总生物碱的含量测定方法口],测定灵仙跌打片中乌头 总生物碱的含量,作为灵仙跌打片的质量控制指标.威 灵仙的薄层色谱鉴别参考文献_2方法,将本品用乙醇 提取皂苷,再加盐酸水解,用石油醚提取齐墩果酸,作 为供试品溶液.结果,供试品色谱中在威灵仙药材样品 斑点分离好,阴性样品无干扰. 参考文献 [1]中华人民共和国药典[s].一部.北京:化学工业出 版社团,2005:410. [23王曙,徐小平,吴静.威灵仙的薄层色谱鉴别.华 西药学杂志口],2001,16(6):453. (收稿2008—10—11;修回2008—11—12) HPLC梯度洗脱法测定愈伤灵胶囊中人参皂苷Rgl的含量 王海峰张红?段勇民?李芳.武警工程学院医院(西安710086) 摘要目的:研究愈伤灵胶囊中人参皂苷Rgl的含量测定方法,为制定质量标准中含量测定方 法及含量限度提供依据.方法:采用oDS色谱柱(250mm×4.6ram),乙腈一水梯度洗脱,0 , 35min(19:81),35,75min(19:81—2l:79),流速:1.0m1.min一1,检测波长:203nm, 柱温:3O?,进样量:10ul.结果:人参皂苷Rgl在0.217,2.604gg范围内呈良好的线性 关系(r一0.9997),平均回收率为96.59,RSD为1.34.结论:该方法简便,快速,重现 性好,准确可靠,可用于愈伤灵胶囊中人参皂苷Rgl的含量测定. 主题词人参皂苷/分析@愈伤灵胶囊高效色谱法 愈伤灵胶囊为部颁标准收载品种,主要由红花,三 ?陕西省中医药研究院(西安710003) ?西安市第五医院(西安710082) ?山东中医药大学(济南25o355) 七,当归等九味中药组成,其中三七为方中君药,三七 中主要含多种皂苷类化合物.本试验参考有关文献,并 经试验摸索,建立高效液相色谱法测定本品中人参皂 苷Rgl的含量,该方法分离效果较好,操作简便,结果