f因子及AV法考察不同厂家甲硝唑片溶出度

f因子及AV法考察不同厂家甲硝唑片溶出度 1988131131-34 ,(): 的提取溶剂。 5 马双成戴忠丁丽霞. 用于植物药质量控制的中药标准物质的技 ,, 3. 3 小结 术要求和选择原则 ( 上)[ J]. 中国药师,2005,8(3):190-193 6 王宇杰,孙启时. 金钱草的化学成分研究[ J]. 中国药物化学杂 本试验提取方法简便、高效、快捷,且同时测定 志,2005,15(6): 357-359 了金钱草药材中的槲皮素,槲皮素-3-甲醚以及山奈 7 王岩,宋良科,董关涛,等. 尖瓣过路黄中槲皮素和山柰酚的定性 定量[ J]. 现代中药研究与实践, 2011, 25(3): 25-27 酚的含量。 与药典采用强酸进行酸化水解提取法相 8 王恒,宋良科,文晓燕,等. 广西过路黄不同种质主要黄酮类组分 比,更能真实的反应出这 3 种物质在药材中的含量。 定性与定量研 究[ J]. 天然产物研究与开发,2009,21( B05 ):124- 127 参 考 文 献 9 夏新中, 周思祥, 屠鹏飞, 等. 细梗胡枝子化学成分的研究 (I) [ J]. 中草药,2009, 40(9):1374-1376 1 中国药典[ S]. 2010 年版. 一部. 204-205 10 〛陈俊华. 四川大金钱草的形态组织鉴定[ J]. 中药材,1998,21 2 曹萍,褚小兰,范崔生,等. 金钱草类中药的研究概况[ J]. 江西医 (8):388 学院学报,2005, 1(45):110-113 11 贾平. 金钱草及其混乱品的鉴别[ J]. 中药材,1991,(4):35 3 赵世萍,林平,薛智,等. 大金钱草化学成分的研究[ J]. 中草药, (2013-07-03 收稿 2013-09-05 修回) 1988,19(6):5-8 4 沈联德, 姚福润. 金钱草化学成分的研究 [ J]. 中国中药杂志, f 因子及 AV 法考察不同厂家甲硝唑片溶出度 程弘夏 姜亚平 王仲 ( 武汉理工大学华夏学院 武汉 430223) 摘 要 目的: 考察国产三个不同厂家生产的甲硝唑片在四种介质中的溶出曲线,并与日本厚生省《 医疗用药品品质情报 》 中溶出标准曲线进行比较,分析我国溶出度检查方法对质量的可控性及 AV 法的适用性。 方法: 在 pH 1. 2、pH 4. 0、pH 6. 集 8、水四个溶出介质中,以紫外-可见分光光度法测定药物在不同时间的累积溶出百分率,对实验结果用 f 因子法和 AV 法评 价 。 结果: f 因子法显示三种市售甲硝唑片在 pH 1. 2的介质中溶出曲线间非常相似,但较日本标准溶出曲 线溶出曲线间相似度 。 。 AV pH 4. 0国产甲硝唑片在其余三种介质溶出行为与日本标准溶出曲线相似法分析结果在纯水和基本相同, 但存在差异 f 因子法分析结果不同。 结论: 不同溶出介质对甲硝唑片溶出行为影响较大,我国现行工艺及处方有利于 药在其他情况下与 。 AV 法是否可广泛用于溶出曲线相似度上还有待进一步考察。 物在胃中溶出 关键词 甲硝唑片;溶出度;f 因子;AV 法 中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2013)12-1858-04 Dissolution Determination of Metronidazole Tablets from Different Manufacturers by f Factor and AV Method Cheng Hongxia, Jiang Yaping, Wang Zhong ( Huaxia College, Wuhan University of Technology, Wuhan 430223, China) ABSTRACT Objective: To study the dissolution of metronidazole tablets from three different factories in four dissolution media ac- cording to Chp 2010 and compare the dissolution curve with that described in the orange book of Japan to analyze the suitability of the dissolution methods. Method: The accumulative dissolution of metronidazole tablets was measured in pH 1. 2, pH 4. 0 and pH 6. 8 buffer solution and water by UV. The similarity of dissolution curves between domestic factories and Japanese standard dissolution curve was analyzed by f factor and AV method. Result: The dissolution of metronidazole tablets showed difference in pH 1. 2 dissolution media, and no difference was shown in the other dissolution media evaluated by f factor method. The results of AV method were the same as those of f factor in water and pH 1. 2 dissolution media, while exhibited difference in the other dissolution media. Conclusion: Dissolution media show great influence on the dissolution of metronidazole tablets. The formula and preparation of domestic factories are benefit for the dissolution of metronidazole in stomach. Whether AV method can be widely used in evaluating curve similarity should be further studied. KEY WORDS Metronidazole tablets;Dissolution;f Factors;AV method 甲硝唑( 化学名称:2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇) 目前该药的制剂有片剂、泡腾片、口腔贴附片、胶囊 为硝基咪唑衍生物,临床用于治疗肠道和肠外阿米 剂、注射剂、 霜剂、 乳膏剂、 栓剂、 凝胶剂、 棒及混悬 、阴道滴虫病、小袋虫病和皮肤利什曼病、麦地 液。 甲硝唑为难溶性药物,溶出是其体内吸收的限 速巴病 , 也广泛用于厌氧菌感染的治疗。 过程。 市售的甲硝唑口服片剂品牌众多,为了考 那龙线虫感染等 通讯作者:程弘夏 Tel:(027)81695654 E-mail:chenghx70@ aliyun. com 以吸收度与药物浓度计算回归方程,结果见 1。 察不同厂家的质量情况,本文采用紫外-可见分光光 1 表 各溶出介质标准曲线回归方程,测定三个不同厂家生产的甲硝唑片在水、pH 度法 溶出介质 检测波长( nm) 回归方程 1. 2、pH 4. 0、pH 6. 8 四种溶出介质中的体外累积溶 蒸馏水 320 Y = 0. 067X - 0. 012 ,并采用 f 因子法,与日本厚生省《 医疗用药品 pH 6. 8 磷酸缓冲液 320 Y = 0. 076X + 0. 059 出度[1] pH 4. 0 醋酸缓冲液 277 Y = 0. 071X - 0. 062 》 中甲硝唑片剂标准溶出曲线进行比 品质情报集2. 4 溶出度的测定 ,评价溶出曲线相似性,并对研究结果作出分析, 较2. 4. 1 pH 1. 2溶出介质中的溶出度测定 取本品, 现报道如下。 照《 中国药典》 2010 年版收载的甲硝唑片溶出度检 1 仪器与试药 3 [] pH 1. 2 900 ml ,以的盐酸溶液为溶出介 查方法TU-1900 双光束紫外可见分光光度计( 北京普 - 1 ,转速为 100 rmin ( 附录?C 第一法),依法操 ?质);ZRS-8G 溶出度测试仪 析通用仪器有限责任公司。 分别于 8,15,25,40,55 min 取溶液 10 ml 用 作( 天津大学精密仪器厂); 甲硝唑片( A 公司, 批号 0. 8 μm微孔滤膜滤过, 取样至滤过应在 30 s 内完 120655; 规 格 0. 2 g ); 甲 硝 唑 片 ( B 公 司, 批 号 ,同时补入同体积的溶出介质。 精密量取续滤液 成20120940; 规 格 0. 2 g ); 甲 硝 唑 片 ( C 公 司, 批 号 3 ml,置 50 ml 量瓶中,用溶出介质稀释至刻度, 摇 126544;规格0. 2 g);甲硝唑对照品( 中国食品药品 。 照紫外-可见分光光度法,在 277 nm 的波长处 匀,批号:100191-200606)。 盐酸,醋酸,醋 检定研究院1% ) 为 377 测定吸光度,按 CHNO的吸收系数( E 1cm 酸钠,磷酸二氢钠,磷酸二氢钾,磷酸氢二钠均为分 6 9 3 3 [3] 计算每片的溶出量。 ,水为重蒸水。 析纯 2. 4. 2 其他溶出介质中溶出度测定 取本品, 照 2 方法与结果 刻度《 中国药典》2010 年版溶出度测定法( 附录?C 第一 2. 1 不同溶出介质的配制 ),以不同 pH 溶出介质 900 ml 为溶剂, 转速为 ?水:采用蒸馏水;?pH 1. 2 盐酸溶液:取氯化 法- 1 rmin 。 815254055 100 ,依法操作分别于,,,,,?钠2. 0 g,加水适量溶解,加盐酸 7 ml,并加水定容 至- 1 ,摇匀。 在不同介质的最大波长下测定吸收度, 1 L;?pH 4. 0醋酸盐缓冲液:0. 05 molml 醋酸溶 ? - 1 液:0. 05 mol? ml 醋酸钠溶液 = 16. 4 ? 3. 6; ?pH 6. 8磷酸盐缓冲液:取磷酸二氢钾3. 4 g和无水磷 酸[2] 氢二钠3. 55 g,加水适量溶解并定容至 2 L。 2. 2 不同溶出介质中检测波长的确定 取甲硝唑对照品约 5 mg,精密称定,分别用上 述四种溶出介质溶解并定量稀释成浓度约为 8 μg - 1 ?ml 的溶液;在 200 ~ 400 nm 范围内进行紫外扫 ,确定不同介质下的最大波长。 结果显示,在蒸馏 描 pH 6. 8磷酸盐缓冲液的溶出介质中,甲硝唑最 水和 319 nm,与日本厚生省《 医疗用药 大紫外吸收峰为 》 中收载的甲硝唑片在纯水介质检测 品品质情报集 320 nm 基本一致。 在 pH 1. 2 盐酸溶液和 波长为 pH 4. 0醋酸盐缓冲液的介质中最大紫外吸收峰分别 276、277 nm,与《 中国药典》2010 年版收载的0. 1 为- 1 moll 盐酸溶液中溶出度的紫外检测波长为 277 ? [3] nm 基本一致。 2. 3 标准曲线的绘制 取甲硝唑对照品约7. 5 mg,精密称定,置 100 ml 量瓶中,分别用蒸馏水、pH 6. 8 磷酸缓冲液、pH 4. 0 醋酸缓冲液三种溶出介质溶解并定量稀释至刻度, 超声,分别取1. 0,2. 0,3. 0,4. 0,5. 0,6. 0,7. 0,8. 0, 9. 0 ml,置 50 ml 量瓶中,加相应的溶出介质稀释至 7085100135 min 10 ml 0. 8 μm,,,取溶液用微 ,取样至滤过应在 30 s 内完成,同时孔滤 膜滤过 。 精密量取续滤液 3 ml, 补入同 体积的溶出介质 置 50 ml 量瓶中,用相应介质稀释至刻度,摇匀。 照紫外-可 见分光光度法,在与介质相对应的最 ,结果代入各自标准曲线,大波长处测定 吸光度 计算每片累积溶出 百分率。 2. 5 三厂家甲硝唑片溶出曲线结果 在四种溶出介质中,三厂家受试制剂累积溶出 1 ~ 图 3。 度测定结果见图 图 1 A 公司甲硝唑片剂在不同溶出介质下的溶出曲线 2. 6 受试制剂溶出曲线差异评价 2. 6. 1 f 因子法评价溶出曲线 简单的模型非依 ( f) 和相似因子( f) 来比1 2 赖 方法是采用差异因子 。 f法是计算两条溶出曲线在每一1 较溶 出曲线 时间点差 表 2 不同溶出介质中不同厂家与 f 因子分析结果参比制剂溶出曲线 ff 溶出介质 厂家 分析结果 1 2 蒸馏水 A 9. 3 62. 0 相似 B 9. 7 61. 2 相似 ?C 11. 3 -- 相似 pH 1. 2 盐酸溶液 A 19. 2 53. 5 不相似 B 24. 3 48. 8 不相似 C 22. 3 50. 3 不相似 pH 4. 0 醋酸缓冲溶液 A 8. 6 56. 8 相似 B 10. 7 59. 1 相似 C 8. 6 56. 8 相似 pH 6. 8 磷酸缓冲溶液 A 11. 9 53. 0 相似 B 11. 1 53. 1 相似 C 8. 6 60. 0 相似 图 2 B 公司甲硝唑片剂在不同溶出介质下的溶出曲线 ? 注:C 厂家在水中第 135 分钟累积溶出百分率出现下降,不满足 药物溶出达到 90% 或溶出平台的 f因子数据处理条件,因此 C 厂家 2 在水中的溶出只计算了 f因子。 1 ??R和 T分别表示参比制剂与受试制剂为在 t t t 时间点的的平均累积溶出百分率。 由于 f结果依 2 赖于比较时间点个数的特性,故选取溶出率间隔相 近的 4 ~ 5 个点,溶出率 85% 以上的时间点应不多 于一个进行计算。 当 值小于 15,f值高于 50 时, 1 2 [5] 可认为两条曲线具有相似性。 由 f 值可看出,在 pH 4. 0、pH 6. 8、纯水三种溶 出介质下三厂家甲硝唑片溶出与日本标准溶出曲线 图 3 C 公司甲硝唑片剂在不同溶出介质下的溶出曲线 ,pH 1. 2 ,基本相似在 时三厂家药物溶出显示与日 异(% ),是衡量两条曲线相对偏差的参数;相似因子 。 本标准溶出曲线不相似(f)是衡量两条溶出曲线相似度的参数。 目前美国 2 《 中国药典》 2010 年版收载的甲硝唑片剂的溶 FDA 和我 国 已 采 用 f因 子 法 评 估 溶 出 曲 线 一 致 - 1 2 出度检查是在0. 1 mol?l 盐酸的溶出介质中,检测 [4] 而《 医疗用药品品质情报集》 中以水 波长为 277 nm,性。 为介质检查溶出度,其测定波长为 320 nm。 为此, 本实验以 A 公司的产品作为参比制剂,就三厂家在 pH 1. 2盐酸的溶出介质中测定的溶出曲线相似度 ,结果见表 3。 结果显示,在 pH 1. 2盐酸进 行比较 。 介质 中三家企业的受试制剂溶出曲线非常相似 表 3 f 因子法比较各厂家间 在 pH 1. 2 溶出介质中溶出曲线 ff 厂家 1 2 B 4. 2 76. 7 图 4 “ 日本厚生省药品体外溶出试验信息” 收载的 C 2. 6 84. 1 [1]甲硝唑片剂在不同溶出介质中的标准溶出曲线 2. 6. 2 AV 法评价溶出曲线 相似因子 法对评价 f2 本试验以《 医疗用药品品质情报集》 中甲硝唑 两条溶出曲线中较大差异值的时间点具有高灵敏 片剂在四种不同介质中溶出度曲线作为参比,见图 性,但该法通常不考虑溶出数据的变异。 有文献报 4,根据方程 1、方程 2 计算得到的 f 值见表 2。 ,将相似等效限法中的逐点比较的做法运用到溶 道n ， ， ??出曲线 比 较 , 上通 过 计 AV 算值 , 评 价 溶 出 相 似R- T Σ i tt = 1 f= [6] × 100 (1) 1 。n 性 ? ， R， Σ 首先通过方程(3) 计算 AV 值,在计算过程中, tt = 1 n -0. 5 参比制剂溶出值小于 10% 的时间点不参与比较,溶 2 1 ??f= 50lg1 + Wt( R- T) 2 , ,Σ,t t × 100 ,n 出接近完毕时通常溶出值相近为避免取样过多导致 t = 1 (2) 假相 似 结 果, 以 参 比 制 剂 为 参 考, 只 取 溶 出 达 到 90% 1 。 ,k 1. 86。 的第 个时间点进行计算 差的平方为 ??AV = = 经计算,所有有效时间点的 AV 值均小于等于 D D-R T 15. 0时,则认为产品间溶出曲线整体相似;如果部 4. 85 2+ k 2 + S (3) R T ??×0 .75 SD-D R T e + 1AV 值小于或等于15. 0,但所有有分 有效时间点的 效时 ??间点 AV 的平均值小于等于15. 0的,则认为产品间溶 式中 D为参比制剂平均累积溶出度,D为试验得 R T 2 出曲线基本相似;如果 AV 的平均值大于15. 0,产品 到的平均累积溶出度,S为参比制剂标准偏差的平 R [6] 2 。 经,其中 RSD 为 15% , S为受试制剂计算的标准偏 间溶出曲线不相似 AV 法分析结果见表 4。 方T 表 4 不同溶出介质不同厂家甲硝唑片与参比制剂溶出曲线 AV 法分析结果 有效时间点( min) 溶出介质 厂家 AV 均值 8 15 25 40 55 70 85 100 135 纯水 A 15. 0 12. 1 16. 9 14. 2 13. 8 11. 6 13. 9 B 9. 7 12. 8 16. 2 14. 2 15. 2 12. 0 13. 3 C 14. 0 12. 9 16. 4 14. 2 16. 1 14. 1 14. 6 pH4. 0 醋 A 20. 8 18. 0 13. 8 11. 6 11. 2 12. 5 14. 6 酸缓冲液 B 20. 4 18. 0 10. 7 11. 6 11. 2 12. 5 14. 1 C 19. 5 10. 6 14. 8 11. 8 10. 4 12. 1 13. 2 pH6. 8 磷 A 12. 0 14. 6 19. 6 22. 9 24. 8 22. 8 20. 4 19. 6 酸缓冲液 B 6. 4 13. 6 16. 9 23. 2 24. 2 22. 4 20. 4 18. 2 C 13. 7 12. 6 12. 5 15. 0 20. 3 21. 3 20. 1 16. 5 通过上述结果发现,在纯水、pH 4. 0的溶出介质 种溶出介质中溶出速度远低于 pH 1. 2 溶出介质,但 中,三家企业甲硝唑溶出曲线与日本标准溶出曲线 他们的溶出与日本标准曲线基本相似。 上述结果说明相似,与 f 因子法分析结果一致。 但在 pH 6. 8 的介 溶出介质对甲硝唑的溶出有一定 AV 值分析三厂家甲硝唑片溶出与日本标准品 影响,我国的甲硝唑片处方及工艺有利于药物在胃 质中 ,这与 f 因子分析结果不同。 酸的条件下溶出,与日本标准曲线在 pH 1. 2 溶出介 溶出曲线不相似 再以 A 公司的产品作为参比制剂,就三厂家在 质中不相似,说明我国处方与工艺与日本同品种有 pH 1. 2盐酸的溶出介质中测定的溶出曲线相似度采 差异。 用 AV 法进行比较,结果见表 5。 虽然 AV 法借鉴了相似等效限法中的逐点比较 表 5 AV 法比较各厂家间在 pH 1. 2 溶出介质中溶出曲线 ,具有计算相对简单,且充分考虑了溶出值的 的做法 有效时间点( min) 差与溶出的离散度对分析结果的影响,大大减小了 厂家 AV 均值 8 15 25 40 55 误差的不可控性。 但从实际分析来看,由于其计算 B 7. 9 14. 1 27. 0 19. 3 17. 9 17. 2 中增加了各有效取样点受试与参比制剂平均溶出值 C 6. 4 14. 3 23. 0 18. 0 19. 5 18. 2 差及两者实验标准偏差对分析结果的影响,造成部 AV 值分析显示,在 pH 1. 2时,三厂家间溶出分分析结果与普遍使用的 f 因子法不一致,故该法 。 这与 f 因子分析结果不同。 曲 线也不相似。 的适用性还有待进一步考察造成 f 值与 AV 值分析不一致的原因可能有两 参 考 文 献 :?在有效时间点,AV 分析较 f 分析加大了参比 个 制剂与受试制剂差异对分析结果的贡献,即相同的 1 国家食品药品监督管理局药品审评中心. 日本原生省药品体外 溶出差异会使 AV 数值增加较快, 这从方程 ( 2 ) 及 pH 试验信息库[ DB / OL]. http: / / www. cde. org. cn / recommend. do? method = view&id = 274. 2010-01-27 / 2013-02-05 6. 8磷酸缓冲液作为溶出介质的溶出曲线分析结果 2 吴小玉,王仲,王玉,等. f 因子法考察萘普生胶囊溶出度[ J]. 中 可以看出。 ?在有效时间点,AV 分析较 f 分析加大 国药师,2012,15(3):367-369 了标准偏差对分析结果的贡献,即相同的标准偏差 3 中国药典[ S]. 2010 年版. 二部. 153-154 会使 AV 数值增加较快,这方程( 3 ) 及 pH 1. 2 盐酸 4 俞慧群. 6 厂家多潘立酮片的溶出度考察[ J]. 中国药师,2010, 。 溶液作为溶出介质的溶出曲线分析结果可以看出13(1):374-376 3 讨论 5 刘建平. 生物药剂学与药物动力学[ M]. 第 4 版. 北京:人民卫生 出版社,2011. 60-64 f 因子比较发现,在 pH 1. 2 溶出介质中,三家市 6 姜雄平,魏立平. 一种新的溶出曲线比较方案[ J]. 药物分析杂 售甲硝唑片溶出曲线非常相似,但与日本标准曲线 志,2010,30(6):1026-1029 存在较大差异。 (2013-06-19 收稿 2013-09-30 修回) 市售三厂家甲硝唑片剂在水、pH 4. 0、pH 6. 8三