040嗜肺军团菌

HKCDC/JL-WJ-040 HKCDC/JL-WJ-040 上海市虹口区疾病预防控制中心检验原始记录 （嗜 肺 军 团 菌 ） 样品编号： 第 页 共 页 样品名称: 样号标记: 收样日期: 检验完成日期: 检验项目和检验依据： 嗜肺军团菌 卫生部《公共场所集中空调通风系统检验卫生规范》2006.3（附录A） 设备：CO2培养箱（仪器编号：S/N 305529-461） 生物安全柜（仪器编号：S/N 102589-95） 环境温度（℃）: 环境湿度（%）: 检测结果及记录： 样品形状： 1 材料：GVPC选择性平板：有效期 ，BCYE平板：有效期 ， 血平板：有效期 ，军团菌分型血清：有效期 （法国生物梅里埃公司提供），血平板（科玛嘉制备）分型血清（SCDC制备） 2 方法与步骤： 2.1无菌方法将500ml水样全部通过 µm滤膜，取下滤膜仔细剪碎，置入一 含15ml原水样的大试管中，涡旋震荡充分洗脱后，备用。 2.2酸处理：取5ml洗脱样品，用0.01mol/L HCL调PH至2.2，混匀后静置5分钟。 2.3热处理：取1ml洗脱样品置50℃水浴加热30min。 2.4取2.1洗脱样品，2.2酸处理样品，2.3热处理样品各0.1ml，置入GVPC平 板，用L型玻璃棒将其在琼脂表面推开。 2.5将上述接种好的GVPC平板置入36℃ 2.5% CO2含量的二氧化碳培养箱中（有 湿盘）培养，每日观察GVPC平板上有无可疑菌落生长。 3 培养结果： 3.1三天后GVPC平板若有表面光滑，整齐，灰白，灰蓝或紫色呈典型毛玻璃状， 在紫外光灯下，有荧光的可疑菌落，做革兰氏染色镜检。 3.2结果记录： 3.2.1平板培养每日可疑菌落观察记录（有无可疑菌落分别以“+”，“-”表示 1为不处理洗脱样品结果，2为酸处理洗脱样品，3为热处理洗脱样品结果） 样品 编号 样品 标记 平板培养每日可疑菌落观察记录 1d 2d 3d 4d 5d 6d 7d 8d 9d 10d GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC GVPC 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 测试人： 复核人： 审核人： 年 月 日 年 月 日 年 月 日 第 页 共 页 3.2.2 如无可疑菌落生长，则二氧化碳培养箱中培养至第十天。 4 菌落验证试验： 4.1 镜检为革兰氏阴性杆菌的可疑菌落转种BCYE平板，血平板和缺L-半胱氨酸的BCYE平 板，将接种好的平板置入36℃ 2.5% CO2含量的二氧化碳培养箱中（有湿盘）培养， 小 时作菌落验证试验。凡是在BCYE平板上生长，在血平板和缺L-半胱氨酸的BCYE平板上 不生长的为嗜肺军团菌疑似菌。 4.2 生化反应：取BCYE平板上的疑似菌落做氧化酶，硝酸盐还原试验，尿素酶，明胶液化，水解马尿酸等生化反应。 4.3 血清分型：取BCYE平板上的嗜肺军团菌疑似菌落做血清分型（玻片凝集），结果见下表。 4.4 验证试验结果记录： 样品编号 样品标记 在各种琼脂上生长 血清型 氧 化 酶 硝 酸 盐 还 原 尿 素 酶 明 胶 液 化 马 尿 酸 水 解 菌 落 荧 光 BCYE 缺L- 半胱 氨酸BCYE 平板 血 平 板 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 　 5. 检验结果与评价：