实验诊断学02

null骨 髓 细 胞 学 检 查 (Bone Marrow Examination)骨 髓 细 胞 学 检 查 (Bone Marrow Examination)主要内容主要内容 血细胞的生成与发育 正常血细胞形态 常用血细胞化学染色 骨髓细胞检查的临床意义 常见血液病血细胞特征 急性白血病的MICM分型 一、血细胞生成与发育 一、血细胞生成与发育 nullnull血细胞发育规律 (原 始→ 成 熟)血细胞发育规律 (原 始→ 成 熟) [ 胞 体 ] 大→小 (巨核细胞相反,早幼粒较原粒大) [ 胞 浆 ] 量： 少→ 多 颜 色：深蓝→浅蓝 →浅红 颗 粒：无→有,非特异性→特异性 [ 胞 核 ] 大→小 (巨核细胞相反) 核 型： 规则→不规则 染色质： 细致疏松→粗糙密集→紧缩成块 核 仁： 有→无 核 膜： 不明显→明显 [ 核浆比 ] 大→小 (巨核细胞相反)null 二、正常血细胞形态 红细胞系(Erythrocyte Series) 红细胞系(Erythrocyte Series) 粒细胞系(Granulocytic Series) 粒细胞系(Granulocytic Series) 单核细胞系(Monocytic Series)单核细胞系(Monocytic Series) 淋巴细胞系(Lymphocytic Series) 淋巴细胞系(Lymphocytic Series)巨核细胞系 (Megakaryocytic Series)巨核细胞系 (Megakaryocytic Series) 浆细胞系统 (Plasmacytic Series) 浆细胞系统 (Plasmacytic Series) 原浆细胞 幼浆细胞 成熟浆细胞三、常用血细胞化学染色三、常用血细胞化学染色 细胞化学染色 细胞化学染色过氧化物酶( POX) 非特异性酯酶( NSE) 特异性酯酶 (SE) 糖原染色 (PAS) 中性粒细胞碱性磷酶 ( NAP)过氧化物酶染色 (Peroxidase, POX)过氧化物酶染色 (Peroxidase, POX) 原理：H2O2 H2O ＋ O2 ↑ POX 联苯胺 联苯胺兰＋亚硝基铁氰化钠 O2 ↓ 暗蓝色的颗粒↓ 结果：粒细胞(+)；单核细胞( ±)； 淋巴细胞( –)非特异性脂酶 (Non specific esterase, NSE)非特异性脂酶 (Non specific esterase, NSE)原理： NSE水解 α－醋 酸 奈 酚 奈 酚 ＋ 有色沉淀↓ 重氮染料偶联 临床意义： 单核、巨噬(+++)特异性脂酶 (Specific esterase, SE)特异性脂酶 (Specific esterase, SE) 原理： SE水解 氯醋酸奈酚AS－D 奈酚AS－D ＋ 红色沉淀↓ 重氮盐偶联 临床意义： 粒(+++)；单( ±)；淋(－)中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophil alkaline phosphatase, NAP 原理： NAP β－甘油磷酸钠 磷酸钠＋甘油 PH 9.2 磷酸钠＋氯化钙 磷酸钙↓＋硝酸钴 硫化钴↓ 硫化铵 + 磷酸钴 NAP临床意义 NAP临床意义 慢粒NAP↓，类白NAP↑ 急粒NAP↓，急淋NAP↑，急单正常或↓ 再障NAP↑， PNH者NAP↓ 化脓感染NAP↑， 病毒感染NAP↓ 糖原染色 (Periodic-schiff. PAS)糖原染色 (Periodic-schiff. PAS)原理： 过碘酸氧化 1.2乙二醇 双 醛 基 ＋ Schiff 红色品红 紫红色↓ 临床意义： 淋－－粗颗粒或团块状阳性 粒－－弥漫均匀状阳性 单－－细颗粒状阳性四、骨髓细胞学检查的临床意义四、骨髓细胞学检查的临床意义 null [适 应 症] 诊 断 造 血 系 统 疾 病: 白 血 病 贫 血 血小板减少性紫癜 诊 断 非 造 血 系 统 疾 病： 原 虫 感 染 代 谢 性 疾 病 转 移 性 癌 肿 原因不明： 发热、恶病质 肝、脾、淋巴结肿大 血细胞单项或多项减少、增多 周围血出现幼稚细胞、可疑细胞 [禁 忌 症 ] 明显出血倾向：血友病 结果分析 结果分析 骨髓增生程度： 有核细胞 巨核细胞 有核细胞分类 计算粒／红比值 骨髓增生程度 骨髓增生程度增生程度 成熟RBC/有核细胞 有核细胞(%) 极度活跃 1 ： 1 ＞ 50 明显活跃 10 ： 1 10～20 增生活跃 20 ： 1 2～7 增生减低 50 ： 1 < 1 极度减低 300 ： 1 < 0.5nullnullnullnullnull正 常 骨 髓 象正 常 骨 髓 象1. 增 生 活 跃 2. 粒 红 比 正 常（2－4/1） 3. 粒 系(约40－60％)、红 系(约20％)： 增 生 良 好、 各 阶 段 比 例 适 当 细 胞 形 态 无 明 显 异 常 4. 巨 核 细 胞: 易见、产 板 巨 多 见 5. 淋 巴（约20％）、单 核（ 约4％） 6.可 见 少 量 非 造 血 细 胞 7. 无 特 殊 细 胞 及 寄 生 虫骨髓象检查的临床意义骨髓象检查的临床意义 增生程度  极度活跃－亢进：白血病  明显活跃－旺盛：白血病、增贫  增生活跃－正常  增生减低－减低: 慢性再障  极度减低－衰竭：急性再障 粒/ 红( 有 核 红 细 胞)：2－4/1 粒/ 红( 有 核 红 细 胞)：2－4/1 〔临 床 意 义〕 正 常： 正常骨髓象 粒,红两系以外造血系统疾病 粒,红两系平行增高或减低 增 高：粒系增高 红系减低 减 低：红系增高 粒系减低五、常见血液病血细胞特征五、常见血液病血细胞特征 再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA) 特 征： 全 血 细 胞 减 少 再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA) 特 征： 全 血 细 胞 减 少〔血 象〕 1. 全血细胞减少,淋巴细 胞相对增高 2. 网织红细胞减少 〔 骨 髓 象〕 1. 增生低下 2. 红系(晚幼红多见),粒 系,巨系减 低 3. 非造血细胞增高:浆细 胞,淋巴细胞多见 急 性 白 血 病(Acute Leukemia) 急 性 白 血 病(Acute Leukemia) 〔血 象〕 1. 血红蛋白、红细 胞 减少,可见幼红细胞 2. 白细胞计数不定,以 原幼稚为主 3. 血小板减少急 性 白 血 病 (Acute leukemia)急 性 白 血 病 (Acute leukemia)〔骨髓 象〕 1. 增生活跃 2. 原幼稚细胞异常 增生≥30％(非红系) 3. 巨核细胞相对受抑急性淋巴细胞白血病(L1)急性淋巴细胞白血病(L1)急性淋巴细胞白血病(L2)急性淋巴细胞白血病(L2) 急性淋巴细胞白血病(L3) 急性淋巴细胞白血病(L3)急粒未分化型 (M1)急粒未分化型 (M1)急粒部分分化型（M2）急粒部分分化型（M2）急性早幼粒细胞白血病（M3）急性早幼粒细胞白血病（M3）急性粒－单细胞白血病（M4）急性粒－单细胞白血病（M4）急性单核细胞白血病（M5）急性单核细胞白血病（M5）急性红白血病（M6）急性红白血病（M6）巨核细胞白血病（M7）巨核细胞白血病（M7） 慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia) 慢 性 白 血 病 (Chronic Leukemia) 〔血 象〕 1.白细胞增高,分类以 成熟细胞为主 (慢粒:嗜酸,嗜碱增高) 2. 血小板早期正常, 晚 期降低 慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia) 慢 性 白 血 病(Chronic Leukemia)〔 骨 髓 象〕 1.增生明显活跃 2.粒(淋)系极度增 生, 以成熟为主 3.其它系统受抑 原发性血小板减少性紫癜 Idiopathic Thrombocytopenic Purpura 原发性血小板减少性紫癜 Idiopathic Thrombocytopenic Purpura 〔血象〕 1.血小板减少,可见异 形、巨大血小板 2.血色素、红、白细 胞正常 〔骨髓象〕 1.增生活跃 2.粒系、红系正常 3.巨核:增生、产板巨 减少,成熟障碍null 六. 急性白血病的MICM分型 细胞形态学分型(FAB分型)细胞形态学分型(FAB分型) 急淋 L 1 － 小细胞 L 2 － 大细胞 L 3 － 空泡 急髓 M 0－7急髓白血病FAB 分 型急髓白血病FAB 分 型M1 急粒未分化型 原粒≥90％( 非红系) M2 急粒部分分化型 原粒≥30-89％ M3 急早粒 早幼粒>30％ M4 急粒-单 粒单两系细胞均增生 M5 急单 原幼单>30% M6 红白血病 红系>50％且形态异常 原粒(原单)＋早幼粒(幼单)>30％ M7 巨核白 原幼巨>30％null SE: : 粒系阳性 单核阴性 阳性:急粒 急单POX NSE:粒系阴性 PAS 单核阳性 阴性:急淋(NAP)  急粒(NAP)  急单 粒:片状淋:粗颗粒,环核 单:细颗粒免疫学分型免疫学分型 急淋  T细胞---CD1、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8  B细胞---CD9、CD10、CD19、CD20 急髓  CD11b、CD13、CD14、CD15、CD33、CD34细胞遗传学和分子生物学分型细胞遗传学和分子生物学分型 M2 t ( 8 ; 21 ) AML1-ETO M3 t ( 15 ; 17 ) PML-RAR CML t ( 9 ; 22 ) BCR-ABL 复习题骨髓检查应用于哪些方面？ 血细胞发育演变的一般规律？ 正常骨髓象各系统各阶段的正常范围？ 骨髓增生程度分级？ 粒红比例正常、增高、减少见于哪些情况？ 再障的骨髓象与血象特征？ 急性白血病的分类、骨髓象及血象特征？ 慢粒、慢淋骨髓象及血象特征？ 常用细胞化学染色的鉴别？