第二章粪便检验

第二章 粪便检查 第二章 粪便检验 粪便主要由消化后未被吸收的食物残渣、消化道分泌物、大量细菌和无机盐及水等组成。粪便检查的目的：了解消化道有无炎症、出血、寄生虫感染、恶性肿瘤及有无致病菌以协助诊断疾病。 第一节 标本的采集及处理 粪便标本的采集直接影响检验结果的准确性，通常采用自然排出的粪便，且视检查目的的不同而异。 1.做常规检查应取新鲜的标本，盛于洁净的不渗水容器内（塑料杯），选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便。 2.查痢疾阿米巴滋养体时应于排便后立即检查。从脓血和稀软部分取样，冬季取样时应注意保温。 3.检查血吸虫卵时应取粘液、脓血部分，如需孵化毛蚴应留取30克粪便尽快处理。 4.检查蛲虫卵须用透明薄膜纸于晚12时或清晨排便前由肛门口周围拭取立即镜检。 5.找寄生虫虫体或虫卵计数时应采集24h粪便进行检查。 6.做化学法隐血试验时，应尽量于三日内禁食肉类及含动物血的食物并禁服铁剂和维生素C。 7.无法排便而又必须检查时，可经肛门用肛拭子采便。 8.标本的处理 粪便检验后应将容器焚烧，所用载玻片需用5%煤酚皂液浸泡消毒，或用1∶25稀释的施康浸泡。 第二节 一般性状检查 1、​  一、颜色 正常人粪便为黄褐色成形便，质软；婴儿粪便可呈黄色糊状；病理情况下可出现灰白色，绿色、红色、柏油样、酱色及米泔水样。 二、性状 粪便性状视其情况可为：软、硬、糊、泡沫样、粘液样、胨状、脓血样、稀糊状、米泔样及乳凝块等。不同的粪便性状可反映其有不同的生理和病理样变。 1.粘液便 正常粪便中的少量粘液，因与粪便混合不易察见，若有肉眼可见的粘液，说明其量增多。见于各类肠炎，细菌性痢疾，阿米巴痢疾，急性血吸虫病。 2.溏便 便呈粥状且内容粗糙，见于消化不良，慢性胃炎等。 3.冻状便 肠易激综合征患者常于腹绞痛后排出粘冻状，膜状或纽带状物，部分慢性菌痢病人也可排出类似粪便。 4.脓性或脓血便 说明肠道下段有病变。常见于痢疾，溃疡性结肠炎。 5.鲜血便 直肠息肉、结肠癌、肛裂及痔疮等。 6.柏油样黑便 上消化道出血时，红细胞被胃肠液消化破坏，释放血红蛋白并进一步降解为血红素，卟啉和铁等产物。上消化道出血约50～75ml时，即可出现柏油样便。 7.泔样便 呈白色淘米水样，内含粘液片块，量大，见于霍乱或副霍乱患者。 8.白陶土样便 由于各种原因引起胆管梗阻，进入肠内的胆汁减少或缺乏以致粪胆素生成相应减少，使粪便呈灰白色。主要见于阻塞性黄疸。 三、寄生虫体检查 蛔虫、蛲虫、绦虫等较大虫体或其片段肉眼即可分辨， 钩虫体须将粪便冲洗过筛方可看到。 第三节 显微镜检查 1、​  一、直接涂片法 1.以竹签挑取含粘液脓血部分，若为成形便则自粪便表面，深处及粪端多处取样，混悬于有一滴生理盐水的洁净玻片上制成薄片，厚度以能透视纸上字迹为宜。 2.先用低倍镜观察全片有无虫卵，原虫、包囊、寄生虫及血细胞等。 3.再用高倍镜详细检查病理成分的形态及结构（主要为红、白细胞，巨噬细胞、肠粘膜、上皮细胞及肿瘤细胞）及各类结晶。 4.结果报告 （1）细胞与晶体 至少观察10个高倍视野，然后就所见各类细胞的多少给予描述，具体参照尿沉渣检查报告格式。 （2）虫卵 粪便中常见有蛔虫卵，钩虫卵，鞭虫卵，蛲虫卵，华枝睾吸虫卵，血吸虫卵，姜片虫卵，绦虫卵等。在识别虫卵时应注意虫卵大小、色泽、形状、卵壳的厚薄，内部结构等特点。认真观察加以鉴别、通常要观察10个低倍视野，以低倍视野所见虫卵的最低数和最高数报告。 二、饱和盐水漂浮法 此法适用于检查钩虫卵，蛔虫卵及鞭虫卵。 [试剂] 饱和盐水：食盐400克加水1L煮沸冷却。 [操作] 1.取蚕豆大小粪便放于青霉素瓶内，加入少量饱和盐水。 2.将粪便充分混匀，再加入饱和盐水至瓶口。 3.可用竹签挑去较大粪块，瓶口加载玻片恰好与液面接触。 4.静置15min，提起玻片迅速反转镜检。 5.结果以“未找到虫卵”和“找到××虫卵”报告。 三、清水沉淀法 1.粪便约20克置小杯中加入少许水，用竹签捣碎，使成糊状，用纱布过滤除去粪渣，再加水500ml静置20～30min。 2.小心倾去上面4/5液体，再加清水500ml，静置约30min再倾去上清液，留下底部沉渣混匀后，用吸管吸取玻片镜检。 3.结果报告同上。 四、原虫及包囊检查法 肠寄生原虫包括阿米巴原虫，隐孢子虫，鞭毛虫，纤毛虫和人芽囊原虫。注意它们的形态学检查和鉴别。 [试剂] Denaldson’s碘染液 碘化钾5g，碘片4g，加生理盐水100ml。 [操作] 1.取大便少许，涂于滴有生理盐水的玻片上，及时镜检各类原虫。 2.包囊可用生理盐水检查，也可用碘染色的染液检查。包囊染色后，包囊壁，包囊体及细胞核均清晰可见。 3.结果以“找到××原虫或包囊”报告。 五、血吸虫卵沉淀孵化法 1.取新鲜标本约30g，放入广口容器内，加入少量清水调匀成糊状。 2.用金属纱网或纱布滤去粪渣，将滤液放入500ml三角烧瓶内，加水至瓶口，静置20～30min。 3.如此操作三次，待上层液体澄清即可。 4.放入25～30℃温箱或温室中，孵化4~6h，观察有无作一定方向运动的毛蚴。 5.结果以“毛蚴孵化阳性”或“毛蚴孵化阴性”报告。 第四节 粪便化学检查 1、​  一、隐血试验 [原理] 消化道出血量少，肉眼很难观察到，且少量红细胞又被消化液分解以至显微镜下也无法发现出血状况。隐血试验目前主要采用化学法。如邻联甲苯胺法、联苯胺法、愈创木酯法等。这些方法基本原理相同，均基于血红蛋白中的血红素可促使H2O2分解释放新生氧[O]，使各种色原物质氧化而显色。 （一）邻联甲苯胺法 [试剂] 1. 10g/L邻联甲苯胺冰醋酸溶液。 2. 3% H2O2。 [操作] 1.用竹签挑取粪便于滤纸上。 2.先滴加邻甲苯胺液2～3滴于粪便上。 3.加3% H2O2 2～3滴，立即观察结果，在2min内显兰褐色为阳性。 [结果判断] 强阳性：立即显深兰绿色。 阳性： 立即显兰绿色。 弱阳性：1min内显兰色。 阴性： 3min内不显兰色。 （二）试纸法 [试剂] 市售隐血试验试剂盒。 [操作] 1.取试纸片一张，用竹签挑取粪便一块分别涂于试纸的A和B窗上。 2.取H2O2滴1～2滴于A、B窗的粪便上。 3.置反面观察显色情况，结果判断同上法。 （三）愈创木酯法 [试剂] 1.愈创木酯饱和液 取愈创木酯粉末2g溶于95%乙醇100ml内。 2. 3% H2O2。 [操作] 1.取粪便一小块，涂于白瓷板或滤纸上。 2.加愈创木酯饱和液1滴，然后加3% H2O2 1滴，30s内观察颜色变化。 3.结果报告 30s内显蓝色或蓝绿色为阳性，1min后显色或无色为阴性。 [附注] 1.上述方法均缺乏特异性和准确性。 2.所用试剂不稳定且有毒。 3.外源性动物食品如血红蛋白，肌红蛋白等均可致假阳性，测定时应特别注意。 4.为解决隐血试验的特异性问题及鉴别消化道出血部位，当前发展较快的有免疫学方法，如免疫单扩法，对流免疫电泳，胶体金标记夹心免疫法等，此类方法具有较好的灵敏度，一般血红蛋白为0～2mg/L或0.03mg/g粪便即可检出阳性。且还有很高的特异性，各种动物血红蛋白及食物不致产生干扰。方法快速、方便，目前被认为是对大肠癌普查最适的方法。缺点是价格昂贵，不适常规检查。 （四）免疫学检测法 [原理] 该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便中人血红蛋白的夹心式酶联免疫测定。 [操作] 1.取一试管或特制小塑料杯加入1ml蒸馏水，挑取粪便少许，调成混悬液。 2.取隐血试条一支，按操作说明将试条的反应端浸入混悬液中充分。 3.5min内观察结果 若反应线和质控线同时呈兰色即为阳性，若只有质控线呈色为阴性，若两条线均不显色为试验无效。 [临床意义]： 粪便隐血检查对消化道出血及肿瘤的诊断有重要价值。消化道溃疡，药物致胃粘膜损伤，肠结核、结肠息肉、钩虫病及消化道肿瘤时，粪便隐血试验常为阳性。消化道溃疡时，阳性率为40～70%，呈间断性阳性。消化道癌症时，阳性率可达95%，呈持续性阳性。此外流行性出血热患者的粪便隐血试验也有84%的阳性率，可作为疾病的重要佐症。 二、粪胆色素检查 正常粪便中无胆红素而有粪胆原及粪胆素。 （一）粪胆素检查 [原理] 粪便中的粪胆素与汞结合形成红色化合物。 [试剂] 氯化高汞液：氯化高汞5g，氯化钠0.5g加蒸馏水100ml。 [操作] 1.于小试管内加入氯化高汞3～4ml。 2.取少许粪便调匀，加热煮沸3min，立即观察结果。 3.结果判断 阴性：煮沸的粪渣不显色。 弱阳性：煮沸的粪渣呈粉红色。 阳性：煮沸的粪渣呈深红色。 [临床意义] 粪胆素是由粪胆原在肠道中停留被进一步氧化而成，粪便由于粪胆素存在而呈棕黄色，当总胆管结石、肿瘤而完全阻塞时，粪便中因无胆色素而呈白陶土色。 （二）粪胆原检查 无论定性或定量均采用Ehrlich法，反应后生成红色化合物，呈色深浅与粪胆原量成正比。 [试剂] 1.乙酸锌乙醇饱和液 乙酸锌10g 加入95%乙醇100ml，用力振荡至饱和。 2.乙酸钠饱和液 乙酸钠140g加入100ml蒸馏水中加热至60℃冷却。 3. Ehrlich醛试剂 将0.7g对二甲氨基苯甲醛溶于150ml浓盐酸中，再将其缓慢倒入100ml蒸馏水中，充分混匀置棕色瓶中。 [操作] 1.加10ml乙酸锌乙醇饱和液于一 试管中，再加入约2g粪便，充分混匀过滤。 2.取滤液2.5ml于一试管中加入Ehrlich醛试剂2.5ml，15min后加入5ml乙酸钠饱和液，充分混匀观察结果。 3.结果观察 加Ehrlich醛试剂后，将试管衬上白纸，从上到下观察出现粉红色者为阳性。 [临床意义] 正常人为阴性。每100g粪便中粪胆原量为75mg～350mg。低于或高于参考值可辅助诊断为梗阻性或溶血性黄疸。 陈 （陈国强写 郭希超审）