◇研究原著 ◇
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中国临床药理学与治疗学
中国药理学会主办
CN 34-1206/R,I.RSN 1009.2501
E-mail:editorya@mal1. 1wilpn.net.en
2OO2Dee;7(6):525—528
双黄连注射液家兔直肠给药的药代动力学
和相对生物利用度研究
黎烈荣,谭异伦2,郑 颂
湖北中医学院妇科教研室,武汉 430061;2武汉大学中南医院中医科 ,武汉 430061;
武汉市第一医院妇产科 ,武汉 430061
摘要 目的:研究双黄连注射液家兔直肠给 药的药
代动力学和相对生物利用度,对保 留灌肠和 12服给
药进行比较 ,为直肠给 药的科 学性提供理论依据。
:将双黄连注射液中主药金银花的有效成分绿
原酸作为血药浓度定量分析的检测指标 ,根据药物
由用药部位进入体循环的速度(即吸收速率 K )和
药物进入体循环的相对量 ,即吸收程度,通常用血药
浓度一时间(C—T)曲线下面积作指标 ,观察直肠给药
的吸收动力学变化。结果:药代动力学数据说 明保
留灌肠组与口服组间的 AUC存在显著性差异(P<
0.05)。灌肠剂的生物利用度为 100%,口服.剂的相
对生物利用度则为 80.78%;保 留灌肠剂和 口服 剂
的达峰时间(Tn值)分别是 0.75和 2.48 h,有显著
的统计学意义(P<0.05),说 明保 留灌肠在吸收速
度方面优于口服 ;C一受吸收量和吸收时间的影响,
保留灌肠剂的血清浓度峰值与口服剂的峰值间存在
显著性差异(P<0.05),说 明保 留灌肠剂的血 药浓
度明显高于口服剂。结论 :双黄连注射液有效成分
的吸收 ,直肠比口服给药快,血药浓度高,其吸收总
量和生物利用度均高于口服给药。
关键词 慢性盆腔炎;中医药疗法;药代动力学;直
肠给 药
中图分类号:R969.1
文献标识码:A
文 章 编 号:1009.2501(2002)06.0525.04
2[112-07-22收稿 21102-08.13修 回
1湖北省教育厅研究项 目(Na98OT29)
黎烈荣,联系作者,女,硕士,主任医师,硕士生导师,湖北省中医药学
会妇产科专业委 员会主任委 员。
Tel:吻 柳 813粥 E-InailIⅡI2@ 163.
慢性盆腔炎是妇科临床常见多发且难愈的一种
疾病 ,临床多采用中药 口服或保留灌肠的方法治疗 ,
均有不同程度的疗效。尤其是 中药保 留灌肠 ,既可
避免苦寒药物久服败胃,又可使药物直达病灶,更快
地促进局部炎症吸收消失 ,使粘连的盆腔组织软化
分离 ,疗效满意。我们临床观察使用双黄连注射液
保留灌肠治疗慢性盆腔炎 68例,有效率达 97%,明
显高于口服治疗组。为 了验证临床疗效 ,为直肠给
药的科学性提供理论依据,我们将双黄连注射液中
的主要药物金银花的有效成分绿原酸作为血药浓度
定量分析的检测指标 ,对保留灌肠组和口服组进行
直肠吸收的药物动力学的比较研究。
1
与方法
1.1 仪器 Waters高效液相色谱系统 ,994陈列检
测器,600E泵 ,U6K进样器,均由美国 Waters公 司生
产。振荡器 ,LD 5.10型离心机,北京医用离心机厂
生产 。
1.2 药品和对照品 双黄连注射剂(冻干剂),哈尔
滨中药二厂生产 ,批号 :d980532,6OO mg/支。绿原
酸
品,武汉市药检所提供。甲醇 ,醋酸,乙腈均
为分析纯。
1.3 实验动物 家兔 ,2 kg左右,雌雄兼用 ,本院动
物室提供。
1.4 方法
1.4.1 样品、标准品液的配制 精密称取双黄连注
射剂粉末 20 ,置 10 rnl容量瓶。加甲醇至 4/5体
积 ,超声震荡 30 min,冷置,加 甲醇至刻度 ,摇匀,配
得浓度为 2 g·L 的样品供试液。精密称取绿原酸
标准品 10 mg,置于 100 ml容量瓶,如样本溶液的配
置方法 ,得浓度为 0.1 g·L 的标准品供试液。
1.4.2 色谱条件 色谱柱 I舢lvTM,CI8’3.9 into×
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150 llln,流动相为水一甲醇。
1.4.3 标准曲线绘制 精密称取绿原酸标准品 10
Ing,置于 100 ml容量瓶中,用甲醇定容 ,即得浓度为
100 rag·LI1的标准 品溶液。精密吸取标准 品溶液
10,100,200,300,400 ,分别加 0.2 ml空白血浆 ,再
加人 1.5 ml乙腈 ,混合摇匀 10 min沉淀蛋 白,以
3 000 r·nfinI1的速度离心 10 min,取上清液,挥去溶
剂 ,残渣用 0.5 ml甲醇溶解 ,进样 50 行 HPLC测
M 1
A
r__r—r_T—r1
2 10
B
Chin J Clin Pharmacol nler 2002 Dee:7(6
定。其色谱图见图 1,以进样浓度作横坐标,以所测
峰面积作纵坐标作 标准 曲线 ,其 回归方程 为 l,=
24.9609X+0.005739,r=0.9998。绿原酸标准品溶
液在 0.002~0.08 g·L 之间与峰面积有 良好线性
关系。
1.4.4 样品测定 精密吸取样 品供试液 20 ,按
色谱条件进样测定(见图 1)。
0
图 1 绿原酸标准品、样 品及含药血清色谱图
A:绿原酸标准品 ;B:双黄连 注射荆;C:给药后的血清;1:绿原酸
根据所测样品溶液峰面积和对照品峰 面积之
比,用外标法
计算双黄连注射剂中绿原酸的含
量⋯ ,计算公式为 :
,1 A搓/A盟 ×M对×lOOO(g L一 )
乙一 Vl样×1000
c为双黄连注射剂 中的绿原酸含量,A样为双
黄连注射剂样品峰面积 ,A对为绿原酸对照品峰 面
积,M对为绿原酸对照品进样量 ( ),V样为双黄连
注射剂样品进样量 ( )。
1.4.5 回收率实验 取 1 ml样品溶液 5份 ,各加入
血浆 0.2 ml,分别加 0.25 ml绿原酸标准品溶液 (c
=0.1 g·LI1),按标准曲线项下的方法进行处理 ,所
得供试液分别进行 HPLC测定 ,测得加样 回收率为
(96.5±1.0)% ,CV=1.08%(n=5)。
1.4.6 稳定性试验 取 1 ml样品溶液,加入血浆
0.2 ml,再加人 0.25 ml绿原酸标准品溶液 ,按标准
曲线项下的方法进行处理 ,所得供试液按 即时、1、2、
3、4、5、6、7 h分别进样 ,分析峰面积的平均值 ,变异
系数 CV=1.8%。
1.4.7 精密度实验 对同一样 品同时进样 6次 ,分
析峰面积的平均值 ,变异系数 CV=2.3%。
10
C
10
1.4.8 操作方法 实验兔 10只,随机分为两组 ,每
组 5只,雌雄兼用。均禁食 12 h,每只分别给予双黄
连注射剂粉末 1.8克,用 37℃ 生理盐水溶解,溶于
10 IIll容量瓶 ,按组分别行 口服灌胃或直肠给药 ,给
药前心脏穿刺抽血 2 ml作为空 白对照,给药后各于
0.5、1、2,3、4⋯5 6 8 h共 8个时间点心脏穿刺取血,
每次 2 ml。直肠给药方法 :取灌肠用的导尿管 ,管
头涂凡士林 ,使兔跨卧于桌上,轻按住兔头及前肢 ,
拉住兔尾 ,露出肛门,轻握后肢。将导尿管缓慢插入
家兔肛门内,深度 7~9 cm。与注射器套紧,灌注含
双黄连 1.8 g的药液 10 IIll,再吸取一定量生理盐水
缓慢灌入 ,保留导管 3 min。灌药前后,保持管 口向
上,并高于肛 门水平 ,以免药液漏出。灌胃方法:将
兔夹于两腿间,固定头部,抓住两前肢。将开口器横
放于兔口中,压在舌头上面 ,用导尿管从开口器中央
孔慢慢插入食道和 胃。导管外 口端放入清水 中,如
无气泡出现,证明在胃内,再灌入同等剂量的双黄连
药液。心脏穿刺取血方法 :将兔仰卧固定于手术台,
左侧胸部相当心脏处的被毛剪去,碘酒、酒精消毒皮
肤 ,左手触摸胸骨左侧第 3~4肋间,选择心跳最明
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中国临床药理学与治疗学 2O02 Dee;7(6
显处穿刺。将 注射器针头扎人心 室 内,每次采血 肠在吸收速度方面优于 口服。
2 IIll。
1.4.9 血药浓度 的测 定 血样品在室温静置 30
min后 ,离心分离血浆(3 000 r·min~,10 min)后 ,取
血清 0.5 ml,加人 乙腈 4.5 IIll,充分振摇 10 min,离
心 10 rain(4 000 r·min-1)。转移上清液 ,挥干溶剂,
加甲醇 0.5 ml,溶解溶质 ,每次取 25 l进样。以绿
原酸做为控制指标 ,用 HPLC法测 出家兔灌肠及灌
胃给药后不同时间的血药浓度。根据直肠给药组和
灌 胃给药组每组 5只家兔 的血药浓度平均数值 ,分
别描点,绘制两种不同途径给药 的血药浓度及时间
曲线(见图 2)。
7O
6O
∞ 50
、 40
30
糯 2O
目 1O
O
图 2 两种途经给药血药浓度及 时间曲线(o.o :灌肠给药 。
◆.◆ :灌胃给药 )
采用梯形法计算 出曲线下面积 AUC E 。药时
曲线经计算机模拟 ,根据血药浓度的吸收曲线计算
各项药代动力学参数,求出达峰时间 Tp和峰值
c一 ,并作 t检验。以灌肠剂的生物利用度为 100%
求出灌胃给药的相对生物利用度。
2 结果
在剂量相同,体清除率不变的条件下 c.T曲线
下面积 AUC反映药物进人人体的量 ,从表 1药代动
力学数据得出保留灌肠组与口服组间的 AUC,存在
显著性差异(P<0.05)。以灌肠剂的生物利用度为
100%,口服剂的相对生物利用度则为 80.78%。
TD值反 映药物吸收速度 的快 慢,从 表 1中看
出,保留灌 肠剂 和 口服剂 的 TD值分 别是 0.75和
2.48,统计学上有显著差异(P<0.05),说明保留灌
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表 1 双黄连灌胃及灌肠的药动学参数(i-I-s。lit=5)
两组 比较 P<0.05
c一受吸收量和吸收时间的影响,保留灌肠剂
的血清浓度峰值与 口服剂的峰值间存在现著差异
(P<0.05),说 明保留灌肠剂 的血药浓度明显高于
口服剂。
3 讨论
衡量药物吸收一般有两个指标,一是药物由用
药部位进人体循环 的速度 ,即吸收速率 ,二是药
物进人体循环的相对量 ,即吸收程度,通常用血药浓
度一时间(c.T)曲线下面积作指标。本研究围绕上述
两个指标探讨直肠给药的吸收动力学变化 ,目的在
于将临床用药与现代药理学研究相结合 ,通过实验
验证药物的治疗作用 ,为直肠给药的科学性提供理
论依据。绿原酸是金银花 中的主要成分,据 《中药
志》第五册记载 :具有抗炎 、抗病毒、抑制溃疡、增强
免疫功能的作用。本实验将金银花的有效成分绿原
酸作为血药浓度定量分析的检测指标 ,进行直肠吸
收的药物动力学研究 ,结果证明,直肠对中药有效成
分的吸收比口服给药快,血药浓度高,其吸收总量和
生物利用度均高于 口服给药,这是 由于直肠静脉直
接与下腔静脉相连,有效成分吸收后可直接进人大
循环 ,避免了“肝首过消除效应”,防止或减少药物在
肝脏被破坏 ,也能防止 胃肠消化液对药物的破坏 ,使
药物的生物利用度得到充分发挥。亦证明直肠给药
不失为中医临床一种速捷高效的给药途径。
参 考 文 献
1 纪晓多 .高效液相色谱法在药物动力学 中的应用[J].药
物分析杂志 ,1986;6:236—7
2 孙瑞元 .定量药理学 [M].第 1版,北 京 :人 民卫生 出版
社 。1987:371—4
3 赵淑杰 .HPLC在 中成药分析中的应用[J].中成药 ,1994;
16t45—6
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· 528 · Chin J CAin Haammcol Ther 2002 Dee:7(6
Pharmacokinetics and relative bioavailability of shuanghuanglian injection
in rabbits by rectal medication1
U Lie—Rong,TAN Yi—IAln2
, ZHENG Song3
Department ofGynecology,Hubei College of Traditional Chinese Medicine,Wuhan 430061;~m,rtment of Traditional
Chinese Medicine,Wuhan University,Wuhan 430061;3First People Hospital of Wuhan City,Wuhan 430061
ABSTRAC3r AiM .To investigate the pharmacokinetics
and relative bioavailabihty of shuanghuanglian injection in
rabbits by rectal medication in comparison with oral medi-
cation.M ETIIODS:Chlorogenic aci from flos lonicerae
d,a main component in shuanghuanglian injection,was
used as a detection marker in blood drug.According to
the velocity of drug entering into systemic circulation from
medication site(that is,absorption rate Ka)and the rela-
tive quan tity of drug entering into systemi c circulation
from lnl~lication site(that is,absorption degree),AUC
was usually used as a marker to obsoi've ab sorption dy-
namie chan of rectal medication.RESULTS:There
was significant difference of AUC between clusis group
and oral group(P<0.05).Bioavailability of enema Was
100% ,and oral dose 80.87%;The values of Tn of ene—
ma and oral dose were 0.75 h an d 2.48 h.respectively
(P <0.05),showing that clusis Was superior to oral
medication; C Was affected by ab sorption qu an tity an d
time. There Was significan t difference of C be tween
enema and oral dose(P<0.05),showingthat the blood
drug concentration of enema Was obviously higher than
that of oral dose.C0NCI Js10N :For the ehlorogenie
acid from shuanghuanglian injection,the absorption in
rectal med ication is faster than that in oral med ieation.
and the blood concentration,total absorption quantity an d
bioavailability of rectal medication are higher than ones of
oral med ication.
KEY W ORDS chronic pelvic inflammatory disease;
traditional Chinese med icine; pharmacokineties; rectal
med ication
本 刊 重 要 启 事
本刊自2003年起每期页码增至 120页(双月刊),内容约增加 30%。同时已申请加入中国科技
统计
源期刊。这样,本刊将进入国内所有大型科技文献检索系统,以及大型期刊数据库系统。目前本刊发行量已
攀升至每期 6O00余册;发行地域覆盖全国各地。本刊正在向精品和名牌刊物努力,着力成为从事药物治疗
学和临床药理学工作者不可或缺的工具。
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