血栓弹力图标准操作规程

******医院医学检验科作业指导书 血栓弹力图 文档编号：******-001 专业组：血栓弹力图 生效日期：2013.01.01 版本：2013/01 修改：0 编制人：****** 审核人：****** 批准人：******目录一.方法原理.............................................................................................................2二.方法确认可（包括线性、不精密度、检出限、灵敏度和特异性）...........................................................................................................................6三.TEG®实验检测取血要求.......................................................................................11四.仪器和试剂.........................................................................................................12五.TEG®质控检测操作流程.....................................................................................136.TEG®普通杯检测操作流程....................................................................................18七.TEG®血小板图检测操作流程.................................................................................21八.参考区间(高岭样品).........................................................................................25九.临床意义...............................................................................................................26十．TEG日维护....................................................................................................31十一．TEG月维护..................................................................................................33一方法原理承载血标本的测试杯以作4°45'的角度和每9秒一周的速度均速转动，一旦血栓形成，置于血标本检测杯中的金属探针受到标本形成的切应力作用，随之出现左右旋动，金属针在旋动过程中由于切割磁力线而产生电流，给电脑软件处理后，便形成TEG曲线。TEG参数图解凝血弹性描记仪（TEG）参数解析SP时间（测量从反应开始到弹力图曲线出现分叉的时间）1、SP=Splittime2、纤维蛋白原未被激活前的时间。R时间（从血样开始检测至描记图幅度达2mm所需的时间）：1、R时间是血样放在TEG分析仪内到第一块纤维蛋白凝块形成之间的一段潜伏期。2、R时间因使用抗凝剂或凝血因子缺乏而延长，因血液呈高凝状态而缩短。3、R延长能通过注射FFP（新鲜的冰冻血浆）而纠正。（FFP含有丰富的凝血蛋白）K时间（从R时间终点至描记图幅度达20mm所需的时间）：1、评估血凝块强度达到某一水平的速率（20mm幅度）；2、通过高纤维蛋白原水平和较小程度地通过血小板功能来缩短K，而影响血小板功能及纤维蛋白原的抗凝剂能延长K；3、K时间延长通过注射cryo（冷沉淀）与FFP来纠正；Alpha角度（从血凝块形成点至描记图最大曲线弧度作切线与水平线的夹角）：1、血凝块动力学特性；2、影响Alpha角度的因素与K时间相同（见上）；3、参数Alpha角度与K时间密切相关，两者都是反映血凝块聚合的速率。但两者之间又存在区别，在凝血处于极其低凝状态时，血凝块强度的最终强度是幅度达不到20mm，此时K不能被定义。因此，Alpha角度比K时间更全面、更易理解。4、6个单位的cryo使α增加9.4°。最大幅度MA（描记图上的最大幅度，即最大切应力系数）：1、MA反映了正在形成的血凝块的最大强度或硬度及血凝块形成的稳定性；2、MA主要受纤维蛋白原及血小板两个因素的影响，其中血小板的作用要比纤维蛋白原大，血小板质量或数量的异常都会影响到MA值；3、10个单位血小板可使血小板计数增加40,200±31,400/mm3,MA增加了13.2mm。A（任一时刻描记图曲线两点间的距离）：1、用来监测任一时刻曲线两点间的扫描宽度，是血凝块强度或弹性函数，A值用单位mm来计量；2、MA值在确定前与A值相等；3、MA值确定后A值测量血凝块溶解的信息。TMA时间（从凝血开始至MA值确定所需用的时间）：1、TMA=TimeToMA，血凝块动力学特性的综合测量；2、TMA包含血凝块的形成速率，评估形成稳定血凝块所需用的时间。G（血凝块强度，即最大切应力强度）：1、将A值进行转换使其能实际测量血凝块强度（G），用单位d/sc来计量；2、G值在MA值确定后的同时也被确定。3、G=5000A/（100-A），描述Clotfirmness.EPL（预测在MA值确定后30分钟内血凝块将要溶解的百分比）1、EPL=EstimatePercentLysis;2、EPL=100(MA-A30)/MA;CL30（测量在MA值确定后30分钟内血凝块溶解剩余的百分比）：1、CL30＜85%意示处于高纤溶状态，即纤溶亢进；应使用抗纤溶药来纠正。2、CL30=100X(A30/MA)LY30（测量在MA值确定后30分钟内血凝块幅度减少速率）1、LY30＞7.5%意示处于高纤溶状态.即纤溶亢进；应使用抗纤溶药来纠正。CI(凝血综合指数)＜-3低凝-3＜正常＜+3＞+3高凝E（弹性常数）1、E是化的G，作为一个弹性常数；2、EMX是最大振幅时的E；EMX=（100XMA）/（100-MA）；TPI（血小板动力学指数）1、TPI=EMX/K2、TPI=ThrombodynamicPotentialIndex，血凝块动力潜能指数；＜6低6＜正常＜15＞15高CLT时间(测量从MA值确定后A值达到2mm的时间)1、CLT=Clotlysistime（也称为TTL=Timetolysis）血块溶解时间。LTE时间（CLT的估计值）LTE=Lysistimeestimate估计的血块溶解时间（CLT）。在MA出现后30秒电脑开始计算LTE，并不断更新直到MA出现后60分钟。如果血块在60分钟之前已溶解，此时LTE为实际血块最终溶解时间。如果LTE大于3小时，该值显示“>3hrs”。LTE是根据弹力图的斜率并外推到振幅为2mm计算得到。AA%INHIBITION判断血小板血栓素受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如阿司匹林等.ADP%INHIBITION判断血小板ADP受体抑制剂对血小板抑制的百分比,如氯吡格雷等二方法确认可（包括线性、不精密度、检出限、灵敏度和特异性）准确度为求证TEG的测量准确度，Haemoscope公司进行了一项评估，将TEG5000型分析仪和TEG3000型分析仪的测量性能表现进行对照。准备40种冷冻干血样。每种血样被分为两份，同时装载到一校准后的5000型分析仪和3000型TEG仪上。然后在37摄氏度下，按本介绍的检测步骤，用相同的TEG软件同时对两份血样进行测试。以下四参数就是经这种标准检测测定的。R(mm)=从血凝开始的距离（时间，以2mm/分钟的速度）K(mm)=从标准血凝块强度的距离（时间，以2mm/分钟的速度）（20mm振幅）MA(mm)=血凝块强度最大值（振幅，单位mm）Angle(deg)=血凝块增长率的斜率用t测试对检测得到的数据进行分析，这是一种建立在两样本零差别假设基础上，将接受测试的两个相同样本的测试结果进行对照的统计学检验方法。测验结果证明5000系列TEG的样本测量性能与3000系列分析仪一致。分析显示，5000系列和3000系列结果在P<0.05，TEG参数R，K，MA和角度没有实际的统计学意义。并且，两相等血样间的绝对差(见下表)没有超出仪器精确程度允许的误差范围，±1个单位。下表列出，两种型号仪器的两相等血样的测量结果及标准偏差，两相等血样的差别及标准偏差，t值和2-tail的概率。 参数测量对照同一型血样分成的两相等血样的测量结果对照（血样类型=40） 参数 R(mm) K(mm) Angle(deg) MA(mm) 5000型（血样1量结果±标准偏） 11.5625±1.178 2.1500±0.379 73.9625±2.382 30.6250±1.036 3000型（血样2测量结果±标准偏差） 11.7500±1.276 2.2750±0.423 73.3750±3.06 30.4010±1.261 血样间差别（血样±标准偏差） 0.1875±0.354 0.1250±0.090 0.5875±0.613 0.2240±1.498 T值 0.68 1.39 0.96 0.87 DF 78 78 78 78 2-TAILP值 0.497 0.168 0.341 0.388精准度为验证使用本手册推荐的激活剂（Celite,组织因子，凝血酶，DAPTTIN,高岭土--由Haemoscpe公司提供）进行检测的测试精确度，Haemoscpe公司做了以下评估：按照TEG用户手册介绍的步骤，从5位未发生凝血问的健康人每人抽取10立方厘米血样。将每份血样分为8份，使用4台TEG仪器，测试的时间跨度为两天；对加入Haecomscope高岭土的血样，测试时间跨度5天。对每种活化剂来说，需要被用来处理40个血样。基于TEG测量数据，对不同活化剂处理的血样来说，TEG参数的精确度可以用变化系数(CV)百分比表示如下：硅颗粒（品牌名称：Celite；Haemoscope公司提供）R8.7%K7.6%ANG2.4%MA4.1%组织因子（品牌名称：Hemoliance；制造商：Ortho）RKANGMA13.1%12.9%2.3%3.3%凝血酶(品牌名称：ThrombinSigma，制造商：Sigma)RKANGMA13.2%13.4%3.5%3.8%高岭土/Sulphatide/磷脂混合物(品牌名称：DAPTTIN；制造商：Immuno)R12.7%K17%ANG2.8%MA5.0%高岭土H/Sulphatide/磷脂混合物(品牌名称：Kaolin；Haemoscope公司提供)RKANGMA13.4%4.4%2.8%6.3%比较而言，TEG测量的参数CV值相对较小，而其他多数凝血测量仪器，CV值要高一些。正常值范围Haemoscope在软件中提供了正常值范围参考，在下述表格里可以看到。 样本类型 R K ANG MA 样本量 Celite 10.0—14.0 3.0—6.0 53.0—67.0 59.0—68.0 132 SodiumClitrate+Celite 7.0—13.0 3.0—5.0 61.0—73.0 55.0—65.0 98 原血 31.0—46.0 11.0—21.0 22.0—38.0 47.0—58.0 132 枸橼酸化原血 28.0—46.0 7.0—14.0 31.0—49.0 49.0—59.0 132 组织因子（TF） 4.0—6.0 2.0—4.0 62.0—73.0 61.0—69.0 178 SodiumClitrate+TF 1.5—3.5 2.0—7.0 59.0—75.0 53.0—65.0 41功能纤维蛋白原水平测试有20位病人同意加入了这一项研究。这20位病人年龄在22到62之间(平均年龄=34.9±11.9)，其中，10位男性，10位女性。他们的实验室纤维蛋白原水平在34.5和862毫克/分升之间。这些研究对象不包括已知患有血凝因子不足或血凝缺陷，肝病，或需血液稀释或心肺支路的病患。在静脉插入导管，将静脉血收集到两个含3.8%柠檬酸纳的4.5cc硅化试管(BectonDickinson，Rutherford,NJ)中。在37摄氏度温度下将样本在TEG分析仪上运行45分钟。从第一个试管中取出0.33立方厘米血样，混合20ul的.2MCaCl2对其进行重新钙化，10ul的重组人体组织因子(加快获得MA参数)和4ul的ReoPro(2mg/ml)(EliLilly,Indianapolis,IN)成一个血样，进行MA测量。重复进行这些分析，最终的MA值(以ReoPro表现的MAR)是多次分析结果的均值。试管中血样剩余部分用于进行纤维蛋白原水平（使用克劳斯照片光学方法，纽约，长岛，医学实验室自动控制，MLAElectra1600c分析仪）的实验室检测。对第二个试管中的血样，连续进行两次通常的盐稀释，为的是获得更广范围的纤维蛋白原水平。按前面描述的方法对稀释过的样本进行相同的样本准备和TEG测试，随匹配样本送实验室分析纤维蛋白原。最小平方线性回归被用来确定TEGMAR值和测量出的纤维蛋白原水平间的关系。画出一条回归线对应计算95%的斜角置信区间。当P<0.05时统计学差别。目前研究证明，通过对经ReoPro处理的血样MA值的测量，能提供对功能性纤维蛋白原的定量评估。精确度为证明TEG仪MA值的精确度，Haemoscope公司对经ReoPRo处理的血样MaR进行了以下评估：按照TEG步骤，从5位未发生凝血问题的健康人每人抽取10立方厘米血样。按前面介绍的程序，将每份血样分为8份，使用4台TEG仪器进行试验。这样接收评估试验的ReoPro处理血样共有40个。基于TEG测量数据，平均值和标准差,95%C.I.及以变化系数(CV)百分比表示的TEG参数MaR精确度表示如下：均值±标准差别95%C.I.CV22.8±1.121-254.5%三TEG®实验检测取血要求备注：枸橼酸（蓝盖）抗凝管要求枸橼酸浓度3.2%，肝素化（绿盖）抗凝管要求肝素浓度>14.5IU,每周二、四上午抽血（不需要空腹） 序号 检测项目 开单类型 取血种类 取血要求 采血管 采血量 抗凝时间 1 普通检测 血栓弹力图实验——高岭土 静脉或动脉全血 安静环境，一针见血 枸橼酸（蓝盖）抗凝管 按刻度要求抽满 即刻送达两小时之内检测 2 血小板图检测 血栓弹力图实验——高岭土 静脉或动脉全血 安静环境，一针见血 枸橼酸（蓝盖）抗凝管肝素化（绿盖）抗凝管各一份 按刻度要求抽满 即刻送达两小时之内检测 血栓弹力图实验——氯吡格雷 血栓弹力图实验——阿司匹林 TEG®血栓弹力图实验血样准备描述1枸橼酸化全血血样程序：备两个注射器，戴上手套，在安静环境下，用一根19G蝶形针，一针见血吸取样血，最初1ml弃用。另外吸取足量血放在蓝瓶盖的聚丙烯试管内(含有浓度为3.2%的枸橼酸钠），待采血量达到试管要求的刻度时，停止吸取。将试管封口后上下轻轻翻转3次（切勿用力摇晃），使血与枸橼酸钠混合。称为枸橼酸化的全血2肝素化化全血血样程序：备两个注射器，戴上手套，在安静环境下，用一根19G蝶形针，一针见血吸取样血，最初1ml弃用。另外吸取足量血放在绿瓶盖的聚丙烯试管内(含有肝素浓度>14.5IU），待采血量达到试管要求的刻度时，停止吸取。将试管封口后上下轻轻翻转3次（切勿用力摇晃），使血与肝素混合。称为肝素化的全血四仪器和试剂TEG检测需要TEG血栓弹力图仪-5000和配套的试剂（Kaolin，AA和ADP）,加样枪（需要10ml,20ml,50ml,100ml,340ml,360ml和1000ml的规格）TEG血栓弹力图仪结构1．水平仪：调平血栓弹力图仪的标准。2．电源按钮：打开或关闭电源。3．加温线：传递温控模块的信号。4．杯槽：装载样品并进行加热。5．水平调节支撑：旋转以调平血栓弹力图仪。6．马达按钮：按压后马达运行，并有黄灯显示。7．控制杆：可移动到LOAD、TEST、EJECT三个位置。8．杯架：用来上下移动样品。9．平台：用来弹出样品。五TEG®质控检测操作流程一．调节水平仪参照分析仪顶部的水平仪中水泡位置，调节分析仪底部的三个支撑脚（前面两个，后面一个），直到水泡居于中间。二．基线测试eTest1）在主界面上点击“TEG”按钮，这是唯一能开始运行样品的界面。如果这是一天中的第一个样品，一个“Maintenancecheck”栏会随即出现，提示你以下要做的事情：·调平·运行基线测试eTest·运行LevelⅠ和LevelⅡ质控品2)点击“Checknow”，出现“Maintenance”对话框。“Dailymaintenance”子菜单中会出现测出的基线值，可接受的范围为1800～2300。3)将Lever杆移到Test位置，选择通道，点击“eTest”。可以选择所有的通道同时进行检测。4)如果出现信息“Channelnotatequilibrium”或“eTestvalueoffcenter”，则将Lever杆移到Load位置，待分析仪稳定后再进行测试。5)一旦出现“eTestvalueOK”后，将Lever杆移到Load位置。如果不能出现该字样，请及时与销售商联系。6)在TEG1分析仪电源打开的同时，进行其它几台TEG分析仪的基线测试。7)点击“Done”，然后点击“OK”。三．运行质控1对质控品【包括质控1（蓝瓶）和蒸馏水（绿瓶）】进行复温，保证十分钟以上温时间；2打开电脑及TEG主机的“POWER”键，电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件；3下拉菜单中输入默认用户名SiteAdministrator，输入密码teg（小写），点击OK，弹出选择操作者对话框4点击TemporaryOperator（选中变成蓝色），点击Logon，进入TEG主界面5点击右上角TEG图标，进入操作界面。弹出对话框6查看TEG主机顶部水平仪，将水平仪内的气泡至于中央。若不在中央，可以调节主机底部三个支脚；7点击Checknow，进入eTest界面8将测试杆移到test位置，每个通道分别运行eTest测试，出现“eTestvalueisOK”表明测试通过后，点击Done，弹出对话框，把测试杆移回Load位置，点击确定。注意：如果不通过可以使用调节笔，调节通道后对应的BASE旋钮，增减基线值，使测试通过。9上杯操作：将杯架沿着杯杆往下滑到平台上。测试杆必须位于Load位置。将普通杯置于杯架上，将杯架滑到杯杆上部，将一只手放在分析仪顶部，另一只手按住杯架底部的按钮，按压三次，确保金属针已经插入杯盖。将杯架往下滑到杯杆一半时，两手扶住杯架，用大拇指将杯子压回杯槽中，上杯完成；（质控操作需要在每个通道进行上杯。）10向已经上好的杯子中加入20ul的氯化钙；11在主界面的“QC”菜单下选择批号Lotnumber。点击“Add”按钮。12在中键入质控1的批号、有效期后点击Normalvalues按钮，在中按照质控品包装盒盖背后的数值填写，然后点DONE。13选择一通道，选择样本类型L1，在病人名字处选择质控批号。其他通道重复相同操作。14将蒸馏水与质控品瓶盖打开，将蒸馏水全部倒入质控品瓶中，小心不要将水溅出来。15重新盖上瓶盖，摇晃使其充分溶解后静置5分钟。注意每个制成的试剂，在室温下最多保存一小时。16将重构后的质控品，上下颠倒5次，打开瓶盖吸取340μl沿杯内壁向杯中缓缓注入，上升杯架至顶端；17将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。18其他通道按相同步骤进行；19点击Done回到TEG主界面，查看描记图形；20双击描记图形小图可以最大化图形，直到MA值参数值两面没有星号表示描记已经结束，可以停止。21点击Stop或F11停止描记，弹出对话框，选择“是”22将测试杆从Test位置移回Load位置后，向下压到Eject位置，下滑杯架至台面，再用力压到底，弹出使用后的杯子。取出扔至黄色垃圾袋中。23通过观察参数值与正常值区间，判断仪器是否正常运转。24按上述流程开始下一个通道质控25质控完成后正常操作样本。六TEG®普通杯检测操作流程1复根据患者要进行的测试，对高岭土试剂（紫色）和肝素酶杯（蓝色）进行复温，保证十分钟以上温时间；2打开电脑及TEG主机的“POWER”键，电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件；3下拉菜单中输入默认用户名SiteAdministrator，输入密码teg（小写），点击OK，弹出选择操作者对话框；4点击TemporaryOperator（选中变成蓝色），点击Logon，进入TEG主界面5点击右上角TEG图标，进入操作界面。弹出对话框6查看TEG主机顶部水平仪，将水平仪内的气泡至于中央。若不在中央，可以调节主机底部三个支脚；7点击Checknow，进入eTest界面8将测试杆移到test位置，每个通道分别运行eTest测试，出现“eTestvalueisOK”表明测试通过后，点击Done，弹出对话框，把测试杆移回Load位置，点击确定。注意：如果不通过可以使用调节笔，调节通道后对应的BASE旋钮，增减基线值，使测试通过。9上杯操作：将杯架沿着杯杆往下滑到平台上。测试杆必须位于Load位置。将普通杯和肝素酶杯分别置于两通道杯架上，将杯架滑到杯杆上部，将一只手放在分析仪顶部，另一只手按住杯架底部的按钮，按压三次，确保金属针已经插入杯盖。将杯架往下滑到杯杆一半时，两手扶住杯架，用大拇指将杯子压回杯槽中，上杯完成；10向已经上好的杯子中加入20ul的氯化钙；11选择病人名字或建立新病历：在工具栏上点击“Case”，选择Addcase，点击“Done”输入入病人ID号以及姓名，点击“Done”12选择一通道和二通道，选定样品类型（CK），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）；13将高岭土试剂瓶盖摘下，向瓶中注入1ml血。盖上瓶盖后上下颠倒5次。注意不要剧烈摇晃；14将高岭土激活的血样静置三到五分钟，保证高岭土充分激活血样。15打开高岭土瓶盖，吸取340μl血，沿杯内壁向普通杯中缓缓注入，上升杯架至顶端；16将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。点击Done回到TEG主界面，查看描记图形；17双击描记图形小图可以最大化图形，直到MA值参数值两面没有星号表示描记已经结束，可以停止。18点击Stop或F11停止描记，弹出对话框，选择“是”19将测试杆从Test位置移回Load位置后，向下压到Eject位置，下滑杯架至台面，再用力压到底，弹出使用后的杯子。取出扔至黄色垃圾袋中。20按上述流程开始下一个样本21不需要使用后按仪器Power关机。血栓弹力图普通杯测试注意事项1装杯时注意请勿触碰杯子和针的接触面2请勿在Test位置上进行装杯。3eTest结束后，一定要将Lever杆移回Load位置；七TEG®血小板图检测操作流程1对血小板聚集功能检测试剂盒进行复温，保证十分钟以上温时间；2打开电脑及TEG主机的“POWER”键，电脑桌面上双击TEG图标进入TEG专用分析软件；3下拉菜单中输入默认用户名SiteAdministrator，输入密码teg（小写），点击OK，弹出选择操作者对话框4点击TemporaryOperator（选中变成蓝色），点击Logon，进入TEG主界面5点击右上角TEG图标，进入操作界面。弹出对话框6查看TEG主机顶部水平仪，将水平仪内的气泡至于中央。若不在中央，可以调节主机底部三个支脚；7点击Checknow，进入eTest界面8将测试杆移到test位置，每个通道分别运行eTest测试，出现“eTestvalueisOK”表明测试通过后，点击Done，弹出对话框，把测试杆移回Load位置，点击确定。注意：如果不通过可以使用调节笔，调节通道后对应的BASE旋钮，增减基线值，使测试通过。9上杯操作：将杯架沿着杯杆往下滑到平台上。测试杆必须位于Load位置。将普通杯置于杯架上，将杯架滑到杯杆上部，将一只手放在分析仪顶部，另一只手按住杯架底部的按钮，按压三次，确保金属针已经插入杯盖。将杯架往下滑到杯杆一半时，两手扶住杯架，用大拇指将杯子压回杯槽中，一次上杯完成；（由于血小板图要进行4次检测，所以需要在4个通道分别进行上杯操作。）10配液：从试剂包中分别取出P1（红色）、P2（灰色）、P3（蓝色）和蒸馏水（绿色），打开P1和蒸馏水瓶盖，取50μl蒸馏水加入P1瓶中，盖上P1瓶盖，旋转混匀。打开P2瓶盖，取100μl蒸馏水加入P2瓶中，盖上P2瓶盖，旋转混匀。打开P3瓶盖，取100μl蒸馏水加入P3瓶中，盖上P3瓶盖，旋转混匀。11选择病人名字或建立新病历：在工具栏上点击“Case”，选择Addcase，点击“Done”输入入病人ID号以及姓名，点击“Done”12选择一通道，选定样品类型（CK），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）；选择二通道，选定样品类型（A），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）；选择三通道，选定样品类型（ADP），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）；选择四通道，选定样品类型（AA），在下拉菜单中选定病人名字，填写简单说明（也可不填）。13在一通道中加入20ul的氯化钙。14将高岭土试剂瓶盖摘下，向瓶中注入1ml血。盖上瓶盖后上下颠倒5次。注意不要剧烈摇晃；15将高岭土激活的血样静置三到五分钟，保证高岭土充分激活血样。16打开高岭土瓶盖，吸取340μl血，沿杯内壁向杯中缓缓注入，上升杯架至顶端；17将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。18打开P1瓶吸取10μl加入二通道，将肝素化血样上下混匀后吸取360μl加入二通道中，混吸三次，上升杯架至顶端。将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。19打开P1试剂瓶吸取10μl加入三通道，打开P2瓶吸取10μl加入三通道，将肝素化血样上下混匀后吸取360μl加入三通道中，混吸三次，上升杯架至顶端。将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。20打开P1试剂瓶吸取10μl加入三通道，打开P3瓶吸取10μl加入四通道，将肝素化血样上下混匀后吸取360μl加入四通道中，混吸三次，上升杯架至顶端。将Lever杆移到Test位置。选中加样的通道，按下“Start”或F10。检测完成21点击Done回到TEG主界面，查看描记图形。22双击描记图形小图可以最大化图形，直到MA值参数值两面没有星号表示描记已经结束，可以停止。23点击Stop或F11停止描记，弹出对话框，选择“是”24将测试杆从Test位置移回Load位置后，向下压到Eject位置，下滑杯架至台面，再用力压到底，弹出使用后的杯子。取出扔至黄色垃圾袋中。25点击Multi后，按钮变为后选择CK、A和ADP的图形使三个图形变为蓝色后，点击，通过已得的叠加图形判断结果。再次点击Multi后，按钮变为后选择CK、A、AA的图形使三个图形变为蓝色后，点击，通过已得的叠加图形判断结果。26按上述流程开始下一个样本27不需要使用后按仪器Power关机。八参考区间(高岭样品) TEG®参数值 临床分析 建议治疗 R<4min 酶动力型高凝 抗凝药物 11min<R<14min 凝血因子 x2FFPor8ml/kg R>14min 凝血因子 x4FFPor16ml/kg 46mm<MA<54mm 血小板功能 0.3mcg/kgDDAVP## 41mm<MA<45mm 血小板功能 x5u血小板 MA≤40mm 血小板功能 X10u血小板 MA>73 血小板型高凝 抗血小板治疗 R<4,MA>73 酶动力型和血小板型高凝 抗血小板治疗和抗凝药物 Angle（α）<45° 纤维蛋白原水平 0.06u/kg冷沉淀 EPL≥15%,CI＜1.0 原发性纤溶亢进 抗纤溶药物 EPL≥15%,CI＞3.0 继发性纤溶亢进 抗凝药物 EPL＜15%, CI＞3.0血栓前状态 抗凝药物九.临床意义血栓弹力图仪（Thrombelastograph®CoagulationAnalyzer，以下简称TEG）是一种从整个动态过程来监测凝血过程的分析仪器。此设备的特点是能够全面的反映患者从凝血到纤溶的全过程中凝血各个成分之间的相互作用的结果，数据准确，操作简便，而且是肝移植手术的国际通用设备。在美国匹兹堡大学医院、澳大利亚器官移植中心以及中国天津东方器官移植中心目前均采用此设备，主要用于凝血和纤溶全过程及血小板功能的全面检测，并准确指导凝血功能异常的治疗以及成份输血。TEG的动态监测过程来源于它对凝血全过程的完全描记，其所描图形与实际凝血过程一一相对（见下图），且精密度，准确性及稳定性高，对血液成分无破坏，全面反映凝血和纤溶各个成分之间相互作用的成果。临床医生可根据图形得知凝血各环节存在的问题，充分自信对凝血异常进行有效的处理，防止凝血异常所导致的进一步恶化和不可控制的大出血，以及预测血栓发生的风险和分析血栓发生的原因。而当相应治疗措施实施后，又可准确从图形上观察到治疗效果。目前凝血功能全过程的监测在有凝血功能障碍的患者术中越来越被重视，在肝移植中的作用更是不可缺少。在肝移植患者中，几乎全部都有凝血功能障碍，而术中出现纤溶亢进，高凝状态以及DIC等更是关系到手术成功的关键，并且目前关于血栓性疾病的控制也是临床医生非常关注的问题。因此临床医生需要这样一种能够快速全面监测患者术中凝血功能变化的仪器，对术中的凝血因子缺失，纤维蛋白原缺乏，血小板功能低下，高凝状态和血栓，纤溶亢进，DIC等做到全面监测。以往在临床上，监测凝血方面常用的指标是ACT检测和凝血常规的检测。ACT即激活全凝血时间，反映的是凝血级联反应到纤维蛋白多聚体形成的过程，即反映部分凝血因子功能，也就是说它反映的是凝血的起始过程。对此首先有一个问题，如果ACT正常，那接下来的凝血一定会正常吗？答案显然是不一定。其次，若ACT延长是凝血因子不足还是肝素影响，是不能仅通过ACT所能知道的。第三，若ACT缩短也不一定代表高凝。况且继发纤溶亢进、DIC更是ACT所不能反映的。目前ACT品牌众多，不同品牌基线不一、标准不同，难免会给临床应用带来不利的影响。相关的其他常规检查如PT、APTT等也是部分凝血因子功能的检测，这些参数和ACT一样都是以纤维素形成为结局。目前的检验科设备，在凝血方面涉及面广，可检测凝血的各个细节，但由于检验种类繁多，结果分析复杂，牵扯到的物力、人力很大，在手术时间内以及在人群凝血筛查中检测到所有这些参数值也是可操作性不大的，如果在术中很可能会影响术中的治疗时间，因此对于现场的指导作用受到了很多的限制。而TEG检测是从凝血开始至凝血形成，并到血块回缩和纤维溶解为结局。不仅能包含ACT所反映的所有问题，而且有相关20个参数来支持对凝血全过程的检测。并且所有这些参数基线一致，标准统一，已经得到国际学术界的充分认可。TEG与通常的传统凝血试验有明确的相关性，但重要的区别是TEG在测定凝血级联反应与血小板相互作用是有独特性，而不只是着重于独立的一个终点。实在地说，传统凝血测定法不能提供血小板与凝血级联之间的任何相互作用，不少ACT、PT、PTT值正常但仍然有活动性出血及凝血异常现象已是众所周知。对于肝移植这样复杂性极大的手术，病人凝血功能的检测的重要性毋庸置疑。单凭经验决定凝血功能异常的原因，决定是否需要输血、输血量与输血成分等，经常是盲目的。在国外TEG是检测凝血功能相当普及的一种检测仪器。也是肝移植手术必不可缺的一种设备。TEG目前在临床中已经被广泛应用于心外科、心内科、神经科、妇产科、ICU、急症科、骨科等多个学科，并且表现出了巨大的潜力和贡献。在临床应用中TEG能够提供以下各方面的信息：1.凝血因子定性分析，并能通过参数进行具有临床意义的量化概念的分析。2.纤维蛋白原的定性分析，并能通过参数进行具有临床意义的量化概念的分析。3.血小板功能。血小板数量与质量正常是正常凝血的基本物质，手术中对出血时间（CT）的检查既不准确也不实际，目前在临床中已很少使用。TEG的最大振幅值（MaximumamplitudlMA）与血小板数量及其对纤维蛋白的凝集反应有密切关系，因而TEG测定血小板功能最有实用价值。而在目前的TEG进展中，血小板定位图的临床应用使TEG可以准确的分析出阿斯匹林和波立维对病人血小板抑制的百分比，从而为更科学的个性化抗血小板治疗提供依据。4.快速而准确测定纤维溶解（Fibrinolysis）的活性。比普遍检测检测法（如D-Dimers、纤维蛋白降解产物试验、优球蛋白血块溶解时间等）敏感准确。5.检测血液中是否有肝素的影响，特别是对于低分子肝素的检测是可行的。6.诊断高凝血状态，判断血栓风险，并分析血栓原因。某些情况下，肝脏病者的凝血紊乱部分地表现为高凝，通过TEG可迅速确诊病人的高凝状态。7.检测与凝血相关药物作用下病人的真实的凝血状态，在很多的情况下，比如体外循环、心脏介入、ECMO治疗等，需要使病人在一种理想的低凝状态下，TEG可以真实的反应这一情况。因此凝血血栓弹力图能够广泛应用于麻醉科、重症监测病房、器官移植（特别是肝移植）、心血管手术、急症和创伤医疗中心、产科、神经内科、临床实验室、血液科等科室的凝血功能监测。TEG的特点可以总结为：a)是全血、全过程的凝血监测，准确判断病人凝血的真实情况，并可直接给出明确的临床诊断；b)根据各个参数的变化，准确指导成分输血和使用与凝血相关的药物，并监控疗效；c)所有参数均为国际标准化参数，可以直接用于学术界关于凝血研究的交流使用；d)对于抗血小板药物的药物疗效有着独一无二的检测结果，量化判断药物对病人血小板抑制的程度，为个性化治疗提供依据；e)操作简便，快速。结果与常规凝血检查有良好的相关性，而且可更科学的应用于临床；f)成熟的技术，强大的科研力量和完善的技术保障是TEG不断前进的基础。十TEG日维护参照血栓弹力图仪顶部的水平仪中水泡位置，调节血栓弹力图仪底部的三个支撑脚（前面两个，后面一个），直到水泡居于中间。1）在主界面上点击“TEG”按钮，这是唯一能开始运行样品的界面。如果这是一天中的第一个样品，一个“Maintenancecheck”栏会随即出现，提示你以下要做的事情：·调平·运行基线测试eTest·运行LevelⅠ质控品2)点击“Checknow”，出现“Maintenance”对话框。“Dailymaintenance”子菜单中会出现测出的基线值，可接受的范围为1800～2300。3)将Lever杆移到Test位置，选择通道，点击“eTest”。可以选择所有的通道同时进行检测。4)如果出现信息“Channelnotatequilibrium”或“eTestvalueoffcenter”，则将Lever杆移到Load位置，待血栓弹力图仪稳定后再进行测试。5)一旦出现“eTestvalueOK”后，将Lever杆移到Load位置。如果不能出现该字样，请及时与销售商联系。6)在TEG1血栓弹力图仪电源打开的同时，进行其它几台TEG血栓弹力图仪的基线测试。7)点击“Done”，然后点击“OK”。用两种类型的生物质控品来检测血栓弹力图仪的性能。质控品包括质控1和质控2，分别模拟一个正常样品和一个异常样品。我院采用质控1.质控1包括蓝色和白色盒子中包括：·12个瓶盖为蓝色的小瓶装有冻干试·12个瓶盖为绿色的小瓶，装有蒸馏水·1个瓶盖为红色的小瓶，装有CaCl2重构质控品质控品在测试前要进行重构，重构步骤如下：1．仔细将绿盖瓶中的蒸馏水倒进蓝盖瓶中，不要溅出来任何一滴，如果发生溅出情况，应换另一瓶新的蒸馏水和一瓶新试剂重新开始重构。2．盖上瓶盖并摇晃使其溶合。3．静置5分钟后，再进行摇晃。4．重复以上步骤直到试剂完全重构。在此过程中将小瓶颠倒放置或水平放置将有助于重构过程。在运行质控前应将质控品充分重构。质控品应在重构后2小时内使用。分别在每个通道上运行质控品。每台TEG血栓弹力图仪的两个通道都必须用两种质控品来运行质控测试。此时，输入通道2中的信息与通道1是相同的。如果4个参数（R、K、а和MA）中有3个结果在指定的范围内，则被认为合格。在主界面或数据界面上确定每个通道的测试结果在可接受的范围内。清洁血栓弹力图仪遵守良好的临床实践，避免TEG血栓弹力图仪接触传染性物质。采用消毒剂消毒1分钟足以杀灭细菌。一些病毒如HBV、HIV，在与抗病毒剂接触10分钟后将被灭活。浓度大于70%的酒精是很好的消毒剂，用软布擦拭所有能擦到的地方。在清洁血栓弹力图仪零部件时，确保金属针和杯槽内部能与消毒剂接触10分钟，此时可借助棉签。同时，擦除任何残留的样品。0%的次氯酸钠溶液（漂白剂）也能使用，但由于其有腐蚀性，因此使用时要格外小心。小心使用商业泡沫消毒剂。它们可能有粘性，会阻碍金属针的运动。避免直接向杯槽中喷射消毒剂。十一TEG月维护数据库管理计划将保持TEG系统的正常运作。数据库的管理计划包括备份和压缩。定期的备份能尽可能保证数据库的安全。如果没有定期的备份计划，必须尽快建立。数据库至少一个月备份一次。在一个网络系统中，网络管理员可能会备份数据库。可以将数据库备份到另一个硬盘里、一个网络驱动器或移动存储器如CD-ROM。电机指示灯杯架平台水平调节支撑杯井lever杆在test位置温度读数水平仪（顶部）杯架lever杆在Load位置温度读数 主任：****** 质控负责人：******