细胞膜的渗透性

细胞膜的渗透性 山东大学#实验# 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 【实验目的】 1.了解溶血现象及其发生机制。 2.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。 【实验原理】 细胞膜是细胞与环境进行物质的选择通透性屏障，是一种半透膜，可选择性地控制物质进出细胞。将红细胞放在低渗溶液中，水分子大量渗透到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，溶液有不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血(hemolysis)。由于溶质渗透入细胞的速度不同，溶血时间不同，因此，发生溶血现象所需的时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜渗透性德实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。 溶血(Hemolysis) 红细胞破裂，血红蛋白逸出称红细胞溶解，简称溶血。可由多种理化因素和毒素引起。在体外，如低渗溶液、机械性强力振荡、突然低温冷冻(-20?,—25?)或突然化冻、过酸或过碱，以及酒精、乙醚、皂碱、胆碱盐等均可引起溶血。 哺乳动物血浆的等渗溶液为0.9%NaCl溶液，红细胞在低于0.45%NaCl溶液中，因水渗入，红细胞膨胀而破裂，血红蛋白逸出。在体内，溶血可为溶血性细菌或某些蛇毒侵入、抗原-抗体反应(如 1 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 输入配血不合的血液)、各种机械性损伤、红细胞内在(膜、酶)缺陷、某些药物等引起。溶血性细菌，如某些溶血性链球菌和产气荚膜杆菌可导致败血症。疟原虫破坏红细胞和某些溶血性蛇毒含卵磷脂酶，使血浆或红细胞的卵磷脂转变为溶血卵磷脂，使红细胞膜分解。 【实验材料】 材料:鸡血 试剂:0.85%氯化钠溶液，0.0085%氯化钠溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%Triton X-100 器材:小试管9只，试管架，胶头滴管，显微镜，载玻片，盖玻片，离心机 【实验步骤】 1(取鸡血6ml，加0.85%氯化钠溶液4ml，在1000r/min条件下离心5min(RBC压积量应不少于0.3ml，否则应补加鸡血) 2.将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度，总体积应不少于1ml 3.每组取6支试管分别加入如下溶液各3ml (1)0.85%氯化钠溶液 (2)0.0085%氯化钠溶液 (3)0.8mol/L甲醇 (4)0.8mol/L丙三醇 2 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 (5)6%葡萄糖溶液 (6)2%Triton X-100 4、向上述6试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，用吸管吹吸均匀。观察各管是否有溶血现象发生(观察时间一小时)。溶血时间并于显微镜下观察各溶液中细胞。 【实验结果】 0.85%的氯化钠溶液 Triton溶液 0.0085%的氯化钠溶液 葡萄糖溶液 3 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 丙三醇溶液 甲醇溶液 甲醇溶液 六种溶液最终的对比 【实验结果分析与注意事项】 编号 溶液类型 是否溶血 溶血所需要的时间 结果分析 1 0.85%氯不溶血 作比色用，颜色暗红， 化钠溶液 浑浊，不透明 2 0.0085%完全溶血 5s 溶液透明，颜色鲜红， 氯化钠 由于浓度较大，细胞完 全溶血 4 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 3 0.8mol/L完全溶血 8s 前期细胞部分溶血，然 甲醇 后细胞完全溶血 4 0.8mol/L部分溶血 27s 浓度较小细胞部分溶 丙三醇 血 5 6%葡萄糖部分溶血 21min 浓度较小细胞部分溶 溶液 血 6 6%Triton 完全溶血 45s 表面活性剂，结果不明 X-100 显，溶液浑浊，但颜色 鲜红 【反思与总结】 1( 当反应时间太快，来不及放到显微镜下调焦观察时，可以先拿 一个样板对焦。调好焦后，将样品滴到载玻片上，盖上盖玻片， 放在显微镜下即可直接观察。 2( 用相机进行比对拍照时，应该在阳光下用白色的背景做参照， 使比对的结果更加客观、明显。 3( 由于细胞在等渗溶液中经过一段时间后也会发生溶血，因此本 次的实验的时间为一小时，所以在1小时的时间内应该尽可能地 充分利用时间，做好计时工作。 4( 实验中有几个实验组的反应较快，如果第一次做得不太成功， 5 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 可以即刻翻工，注意时间。 5( 再将红细胞的沉淀物放入实验组的溶液中时，应该用弹指法将 溶液弹均匀再开始观察。 附: 细胞膜渗透性的应用-----贫血的检测 缺铁性贫血 缺铁而影响血红蛋白合成所引起的贫血，见于营养不良、大量成长期小量出血和钩虫病;只要是女性就比较容易患上缺铁性贫血，这是因为女性每个月生理期会固定流失血液。所以平均大约有20%的女性、50%的孕妇都会有贫血的情形。如果贫血不十分严重，就不必去吃各种补品，只要调整饮食就可以改变贫血的症状。比如首先要注意饮食，要均衡摄取肝脏、蛋黄、谷类等富含铁质的食物。如果饮食中摄取的铁质不足或是缺铁严重，就要马上补充铁剂。维生素C可以帮助铁质的吸收，也能帮助制造血红素，所以维他命C的摄取量也要充足。其次多吃各种新鲜的蔬菜。许多蔬菜含铁质很丰富。如黑木耳、紫菜、发菜、荠菜、黑芝麻、莲藕粉等。 巨幼红细胞性贫血 缺乏红细胞成熟因素而引起的贫血，缺乏叶酸或维生素B12引起的巨幼红细胞性贫血，多见于婴儿和孕妇长期营养不良;巨幼细胞贫 6 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 血是指骨髓中出现大量巨幼细胞的一类贫血。实际上巨幼细胞是形态上和功能上都异常的各阶段幼稚红细胞。这种巨幼细胞的形成是DNA合成缺陷的结果，核的发育和成熟落后于含血红蛋白的胞浆。身体多种组织细胞皆受DNA合成缺陷的影响，但以造血组织最严重，特别是红系细胞。粒系细胞和巨核细胞也都有形态上的改变和成熟细胞数量的减少。巨幼细胞包括原巨幼细胞、早巨幼细胞、中巨幼细胞和巨幼细胞各不同发育阶段的幼稚红细胞。这些巨幼细胞均比相应的正常幼红细胞大，浆核比例比正常略高。经Wright染色后，原巨幼细胞的胞浆呈深蓝色，无颗粒，核周围有一染色较浅的圈;核圆形，染成紫色，最显著的特点是染色质呈颗粒状，彼此隔开，隔开处比较透亮，有时在核的周边有彼此分开的染色质小块，形成所谓“钟面”的状态;核仁较大，蓝色。当细胞逐渐成熟，染色质保持其颗粒状结构，不易形成深染的固缩块状物。有时巨幼细胞贫血较轻，巨幼细胞的形态往往不很典型，称为类巨幼细胞。绝大多数巨幼细胞贫血是由叶酸、维生素B12缺乏引起的，但也有一小部分是例外，如抗代谢药物引起的巨幼细胞增生、红白血病和红血病、铁粒幼细胞贫血的巨幼细胞增多、遗传性乳清酸尿等。不管是哪一种原因引起的，巨幼细胞的形态都是相同的。经过适当的治疗，这些巨幼细胞都能很快变成正常的幼稚红细胞。 7 山东大学实验报告 2011 年 9 月 23 日 姓名 程开源 系年级 临床医学八年制 组别 同组者 窦云德、李康帅、高振东、高继伟、李洪琦 科目 细胞生物学实验 题目 细胞膜的渗透性 学号 201000232012 8