氢溴酸加兰他敏口服液及片剂的人体生物等效性研究

氢溴酸加兰他敏口服液及片剂的人体生物等效性研究 氢溴酸加兰他敏口服液及片剂的人体生物 等效性研究 ChineseJournalofNewDrugs2006,Vo1.15No.2中国新药杂志2006年第l5卷第2期 主要从事临床药学,临床药理研究.联系电话:(010) 6201769l一6686,E-mail:zhaisuodi@263.net. [参考文献] [1]盛娅仪,徐振邦.瑞芬太尼的药理学和临床应用[J].中国新药 与临床杂志,2001,20(2):142—146. [2]耿志宇,许幸.瑞芬太尼的临床药理学[J].国外医学+麻醉学 与复苏分册,2004,25(4):203—206. [3]KABBAJM,VARINF.Simultaneoussolid-phaseextractioncorn- binedwithliquidchromatographywithultravioletabsorbancede- tectlonforthedeterminationofremifentanilanditsmetabolitein dogplasma[J].JChromatogrB,2003,783(1):103—111. [4]HA1DERSH,LIANGZM,SELINGERK,eta1.Determinationof remifentanil,anultra-short-actingopiodanesthetic,inratbloodby highperformanceliquidchromatographywithwutravioletdetection [J].JPharmBiomedAnal,1996,14(12):1727—1732. BJORKSTENAR,CHANC,CRANKSHAWDP.Determination ofremifentanilinhumanbloodbycapillarygaschromatography withnitrogen-selectivedetection[J].JChromatogrB,2002,775 (1):97—101. 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[关键词]氢溴酸加兰他敏;生物等效性;药动学;高效液相色谱法 [中图分类号]R945.2;R969.1[文献标识码]A[文章编号]1003—3734(2006)02—0141—04 Abioequivalentstudyofgalanthaminehydrobromidesolution toimmediatereleasetablet sITian-mei,LIUHui,SHULiang,SUNLi-li,ZHANGHong-yan (InstituteofMentalHealth,PekingUniversity,Beng100083,China) [Abstract]0bjeetive:Toinvestigatethepharmacokineticsprofilesandbioequivalenceofgal an— thamine.Methods:Twenty-fourhealthymalevolunteerswereorallyadministeredwitharandomizedand singlecrossoverdoseofgalanthaminehydrobromidesolutions(testsample)andimmediatereleasetablets (referencesample)5mg.Followingaftertheextractionofthealkalinizedplasmasamplesofthevolun— teersusingether,theplasmagalanthaminewerequantifiedbyreversephaseHPLCwithafluorescence.de. tectionatEx290nmandEm320nm.Thepharmacokineticparametersincludingvarianceandtwo-oneside ttestanalysisandrelativebioavailabilitywerecalculatedusing3P97pharmacokineticssoftware.Results: Themainpharmacokineticparametersofgalanthaminehydrobromidesolutionsandtabletswereasfollows: 一 141一 ChineseJournalofNewDrugs2006,Vo1.15No.2中国新药杂志2006年第l5卷第2期 C.(31.53?5.59)VS.(33.44?5.72)g?L一;T…(1.66?0.79)VS.(1.51?0.72)h;t1/2 (7.06?2.16)VS.(6.64?2.30)h;AUC0(340.6?77.2)VS.(325.5?77.7)g?h?L一.Therel — ativebioavailabilityofgalanthaminesolutionswas105.6%.Conclusion:Thetwoformulationswerebio— equivalent. [Keywords]galanthaminehydrobromide;bioequivalence;pharmacokinetics;highperformance liquidchromatography 氢溴酸加兰他敏(galanthaminehydrobromide)是 从石蒜科植物雪花莲(galanthus),石蒜(1ycoris)和 近缘植物中分离得到的一种生物碱,具有可逆性和 选择性的胆碱酯酶抑制作用?.加兰他敏可以透 过血脑屏障,对中枢神经系统细胞突触有兴奋性刺 激作用,能改善学习记忆和认知功能,主要用于治疗 小儿麻痹后遗症,重症肌无力,肠麻痹和老年痴呆 患者的记忆障碍.加兰他敏作为第二代胆碱酯 酶抑制剂,因其药效持续时间长,不良反应小,服药 方便,而日益受到各国研究人员及临床医师的青 睐.本试验采用高效液相色谱法对24例健康男 性受试者单剂量口服加兰他敏制剂后的血药浓度进 行监测,计算出相应的药动学参数,进行生物等效性 评价. 材料与方法 1药品与仪器 1.1药品与试剂氢溴酸加兰他敏对照品,氢溴 酸加兰他敏片剂(参比制剂)和氢溴酸加兰他敏口 服液(受试制剂)均由西安杨森制药有限公司提供 (研究用药品,有效期:2006年1月).乙腈,四 氢呋喃为HPLC级,乙醚(无水),三乙胺,冰醋 酸和氢氧化钠均为分析纯.超纯水经Milipore纯 水制备仪自制.空白血浆来源于北京市血站的健 康人血浆. 1.2仪器岛津Lc一10AD高效液相色谱仪,配岛 津RF一10A荧光检测器及岛津C—R7A数据处 理仪. 2试验 2.1受试者24例健康男性受试者,年龄 1833.5岁,平均(24.2?4.7)岁.体重53.5— 80kg,平均(66.0?7.3)kg.所有受试者试验前后 均进行常规体检和血液生化检查.试验前经体检证 明受试者心,肝,肾功能指标均在正常范围内.试 验前2周及试验期间停用其他药物,并且禁烟和酒. 所有受试者均在试验前由本人签署知情同意.试 验期间统一饮食. 一 142— 2.2标本采集本试验采用双周期两制剂交叉试 验设计,试验方案经医院医学伦理委员会审查批准. 24例健康男性受试者随机分为2组,每组各l2例, 交叉口服氢溴酸加兰他敏受试制剂(口服液)或参 比制剂(片剂)各5mg.试验清洗期为1周.受试 者禁食12h后,于次13早晨空腹口服受试制剂或参 比制剂,用150mL温开水送服.受试者于服药后 2h方可饮水,4h后进食统一标准餐.分别于服药 前及服药后0.25,0.5,0.75,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0, 6.0,8.0,12.0,24.0和32.0h取静脉血5mL,置肝 素处理过的试管中,离心分离出血浆,置一20?冻 存备测. 3血药浓度测定 3.1色谱条件HypersilODS2液相色谱柱(大 连依利特公司,150l-tim×4.6mm,5p,m),流动相 为乙腈一水一四氢呋喃(100:840:60),每1000mL 流动相中含2mL三乙胺,用冰醋酸调节pH值至 7.40,流速:0.8mL-min一,柱温:室温.荧光检 测激发波长:290nm,发射波长:320nm,进样量 20L. 3.2标准溶液配制精密称取氢溴酸加兰他敏对 照品,用流动相配制成1/zg-mLI1的对照品储备液, 密封,4?冷藏. 3.3血浆样本处理在10mL具塞离心管中准确 加入1mL血浆样本,加入0.5mL氢氧化钠溶液 (5mol?L),混匀后加入6mL重蒸无水乙醚,振荡 5min,离心5min(2000r?min),将上层有机相转 移至另一具塞离心管中,40?水浴蒸干有机相,吸 取50/zL流动相溶解残留物,取20L进样 HPLC检测. 3.4血浆加兰他敏标准曲线制备取空白血浆 加入不同量的加兰他敏对照品贮备液,使加兰他 敏的最终浓度分别为1,2,5,10,20和50g?L一, 依照"血浆样本处理"项下操作,记录样品的色谱 峰高,以浓度(c,Izg?L)对应峰高(日)作直线回 归,得到标准曲线方程,用于待测样品的浓度 ChineseJournalofNewDrugs2006,Vo1.15No.2 计算. 3.5回收率和精密度取空白血浆加入不同量的 加兰他敏标准贮备液,使加兰他敏的最终浓度分别 为2,20和40g?L,依照"血浆样本处理"项下操 作,每个浓度重复5次,计算回收率;同法配制上述 3个浓度的血浆样品,依照"血浆样本处理"项下操 作,日内重复测定5次,日间重复测定5d,得到日内 和H问变异系数. 4统计分析 采用巾国药理学会推荐的3P97分析软件进行 药动学参数计算.AUC用梯形法计'算,和C… 用实测值计算.对参比制剂和试验制剂的 AUC.…AUC,…和c…进行双单侧t检验和 1—2置信区间统计分析. 结果 1方法的专属性 在本试验条件下,加兰他敏分离良好,其保留时 间约为6.1min,血浆中杂质不干扰样品的测定,见 图1. , ——r—Tb——不0——不0 t~mint/raint/rain 审由血浆空由呲浆+圳兰他敏对州品受试青lm颦 1加兰他敏(tR=61rain) 图1测定血浆巾加兰他敏浓度的典型HPLC图谱 2干扰试验 在本试验条件下,常j丰j的三环类抗抑郁药物, 抗精神病药物及苯二氮革类药物等,均不干扰加兰 他敏的测定.如丙咪嗪,氯丙咪嗪,阿米替林,氯 丙嗪,地西泮,氯氮平等不出现色谱峰,不干扰加 兰他敏的测定. 3线性范围 本试验在1,50g?L的加兰他敏血浆浓度范 围内,线性关系良好,所得标准曲线方程为:C= 1.957X10,H一1.333,r=0.999.最低检测限 0.4ng,最低检测浓度为1/zg?L(信噪比=3). 4回收率和精密度 本试验测定的低,巾,高浓度的平均方法回收 率和H内,口间RSD均见表1. 中国新药杂志2006年第15卷第2期 裹1加兰他敏相对回收率与日内,日间精密度 5药动学测定结果 24例男性健康受试者单剂量口服加兰他敏口 服液和片剂的平均药一时曲线见图2;口服液和片剂 的主要药动学参数见表2. 40 35 30 25 :20 15 10 5 0 —5 05101520253035 f,h 图2单次口服加兰他敏口服液和片剂 (5mg)后的平均血药浓度一时问曲线 襄2受试者单次口服加兰他敏口服液和片剂(5mg)的主要药动学参数 经双单侧t检验和1,2a置信区间法统汁分 析,受试制剂C…的90%可信限在参比制剂的 88.0%一101.2%(在70%,143%之间);受试制剂 AUC.一 的90%可信限在参比制剂的98.5%一 110.3%(在80%,125%之间),表明两制剂具有生 物等效性. 6药物耐受性 5例受试者出现了轻微不良反应.2例服用试 验药,1例服药后监测心率出现短暂性心率过缓(48 次?min).1例服药后1h监测血压从正常升高到 140/90mmHg.3例服用参比药,1例出现丫短暂轻 度头晕,2例受试者出现了临床实验室化验值轻度 异常.所有不良反应均较轻,自行缓解. 讨论 加兰他敏是一种类似于可待因的吗啡碱,具有 选择性可逆性的月Fi碱酯酶抑制作用,主要用于治疗 阿尔茨海默病(AD),改善记忆功能,剂量范同为 一 143— ChineseJournalofNewDrugs2006,Vo1.15No.2 5—55mg?d,,其不良反应小,耐受性好,可长期服 用.目前临床主要用于改善记忆和认知功能. 近年来在国外许多中心临床试验中加兰他敏作为第 二代胆碱酯酶抑制剂,已经表现出对治疗轻度或中 度AD有很好的疗效.加兰他敏片剂13服吸收迅速 和完全,达峰时间约为1h,终末半衰期约为7h,绝 对13服生物利用度高(约90%)J.在较宽的剂量 范围内(8,32mg-d)呈一级动力学和线性过程. 片剂生物利用度与口服液相同,食物不影响AUC, 但c一下降约25%,血浆达峰时间(T…)可延迟到 1.5h.加兰他敏的平均分布容积为175L,主要分 布在细胞中.CYP2D6同工酶和CYP3A4参与加 兰他敏的消除代谢,CYP2D6同工酶基因多态性对 加兰他敏的药动学特性并没有显着性的影响.在血 浆中未检测到有活性的代谢产物.药物以原形药从 尿液中排泄.国外的研究已经证实加兰他敏口服液 和片剂在人体内都是一个低清除率,中等分布体积 和低蛋白结合率药物,两种制剂体内生物等效. 本实验采用HPLC-荧光检测法测定血浆加兰他 敏的浓度,其方法操作简便,灵敏准确,符合药动学 研究的要求].流动相选择时,对文献方法进行 了改进,加入一定量的四氢呋喃,pH值调节至 7.4O,加兰他敏的灵敏度和分离度较好,提高了回收 率,并以此作为本实验测定加兰他敏血药浓度的条 件.药动学研究表明加兰他敏口服液和片剂的 T…,C…,AUC比较无显着性差异;两制剂具有 生物等效性.国内宋洪杰等也报道了国内不同 制药公司生产的加兰他敏片剂的药动学研究,与本 中国新药杂志2006年第l5卷第2期 研究结果一致.试验期问不良反应少而轻微. [作者简介]司天梅(1968一),女,研究员,博士研究生,主 要研究方向为精神药理学.联系电话:(010)82801948, E—mail:si.tian-mei@163.como [参考文献] [1]TAHOMSENT,BICKELU,FISCHERJP,cta1.Stereoseleetivity ofeholinesterasinhibitionhygalanthamineandtoleranceinhuman [J].EurJClinPharmacol,1990.39(6):603—605. [2]TAHOMSENT,BICKELU,FISCHERJP,eta1.Galanthamine hydrohromideinalong—termtreatmentofAlzheimer'sdisease[J]. Dementia,l990.36(1):46—51. [3]MUCKEHA.Preelinicalstudieswithgalanthamine[J].Drugs Today.1997,33(2):259—264. [4]谢卉,李智文.加兰他敏在阿尔茨海默病中的应用[J].世界 临床药物,2004,25(9):527—530. [5]BICKELu,THOMSENT,WEBERW,etal,Pharmaeokinetics ofgalanthamineinhumansandcorrespondingcholinesteraseinhi— bition[J].ClinPharmacolTher,1991,50(4):420—428. [6]MIHAILOVAD,YAMBOLIEVI,AHIVKOVAZ,eta1.Pharma— cokineticsofgalanthaminehydrobromideaftersinglesubcutaneous andoraldosageinhumans[J].Pharmacology,1989,39(1); 5O一58. [7]FARLOWMR.ClinicalPharmakineticsofgalanthamine[J].Clin Pharmacokinet,2003,42(15):1383—1392. 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