苯二酚位置异构体的高效液相色谱分离分析方法研究

苯二酚位置异构体的高效液相色谱分离方法研究 ( ) 摘 要 : 本文研究建立了苯二酚位置异构体的高效液相色谱 HPL C分离与紫外检测分析方法 。结果明 : 在 10 min 内 ,邻 、间 、对苯二酚可实现基线分离 ,在 0 . 5,100 mg/ L 的范围内三种物质均呈很好的线性关系 ,邻 、间 、 对苯二酚的检测限分别是 0 . 15 、0 . 20 、0 . 16 mg/ L ,回收率在 96 %,103 %之间 , RSD 在 1 . 2 %,2 . 5 %之间 。 关键词 :高效液相色谱 ;苯二酚 ;异构体 酚类污染物广泛存在 ,有多种方法可用于其分,观察紫外光谱 ,确定吸收可见分光光度计进行扫描 1 ,4 5 离分析 ,例如色谱法、化学发光法、电化学方波长 。 7 6 等 。近来 ,Chen 等采用毛细管区带电泳安培 1 . 3 液相色谱方法法 8 色谱分析条件 : 选择不同的色谱分离柱 CL C - 检测分析了 11 种 酚 类 化 合 物 , Kaneta 等采 用 毛 细管胶束电动色谱 - 半导体激光荧光法分析测定了 ODS 、CL C - CN 、CL C - Phenyl ; 用 不 同 的 流 动 相 9 对苯二酚 ,周良模等用毛细管电泳方法分离分析 Na HPO- MeO H 、HPO- MeO H 和 HAc -2 4 3 4 了 20 种氯代酚 ,我们曾经研究了苯二酚异构体的毛μMeO H ;在流速为 1 mL / min ,进样体积为 10 L ,检 细管胶束电动色谱的电化学检测方法 10 , 取得了 测波长为 280 nm 的条件下进行分析 , 优化最佳色 满意的 结 果 。本 文 就 苯 二 酚 位 置 异 构 体 的 HPL C 谱条件 。 分离条件进行了详细研究 ,结果表明 ,在最优化的色 2 结果与讨论 谱条件下 ,在 10 min 内 ,邻 、间 、对苯二酚可实现基 线分离 。 2 . 1 邻 、间 、对苯二酚的紫外光谱与检测波长的确 定 1 实验部分 1 . 1 仪器与试剂 紫外光谱实验表明 ,邻 、间苯二酚在 272 nm 有 ( ) 6AV L C - 6A 液相色谱仪 日本岛 津, SPD -最大吸收 ,对苯二酚的最大吸收波长在 291 nm ,在 ( ) 280 nm 处邻 、间 、对苯二酚三种物质均有较强的紫 U V/ V IS 紫外检测器 日本岛津, U 2000 紫外可见 ( ) ( 分光光 度 计 日 本 岛 津 , No . 5994 p H 计 Cole - 外吸收 。因此将紫外检测波长定为 280 nm ,可以获 ) ( par mer Inst rument Co . 美国,CL C - ODS 250 ×4 . 得较大的信噪比和较高的检测灵敏度 。 ) (2 . 2 液相色谱分离条件的确定6 mm id 日本岛津,CL C - CN 250 ×4 . 6 mm id 日 ) ( 色谱条件优化实验表明 ,邻 、间 、对苯二酚具有 本岛 津 , CL C - Phenyl 250 ×4 . 6 mm id 日 本 岛 弱酸性 ,在碱性流动相条件下 ,它们会以阴离子形式 ) 津。所用试剂均购自北京化工厂 ,水为二次重蒸 。 存在 。在 以 硅 胶 为 基 质 的 键 合 色 谱 分 离 柱 内 , 邻 、 储备液的制备 : 分别精确称量邻 、间 、对苯二酚 间 、对苯二酚易与色谱填料发生静电作用 ,引起色谱标准品各 50 mg ,分别置于 50 mL 的容量瓶中 ,用水 分离 峰 的 拖 尾 , 降 低 它 们 之 间 的 分 离 度 。而 对稀释至刻度 ,储备液的浓度均为 1 mg/ mL 。用 0 . 45 HPO- MeO H 和 HAc - MeO H 流动相的比较研究 μ m 的滤膜过滤 ,备用 。3 4 发现 ,用 HAc - MeO H 流动相体系不仅色谱峰的对 标准溶液的制备 : 用上述储备液制备邻 、间 、对 称性 较 好 , 而 且 分 离 系 统 的 柱 压 较 低 。所 以 选 择 苯二 酚 的 系 列 标 准 溶 液 , 其 浓 度 为 0 . 05 、0 . 10 、0 . () HAc - MeO H 4?6 ,V/ V作为流动相 。对邻 、间 、对 μ 50 、1 . 0 、2 . 0 、5 . 0 、10 、20 、50 、100 、200 、500 g/ mL 。苯二酚在 CL C - ODS 、CL C - CN 、CL C - Phenyl 柱 μ 用 0 . 45 m 的滤膜过滤 ,备用 。上的分离行为进行考察结果表明 ,使用 CN 分离柱 1 . 2 检测波长的选择时 ,邻 、间 、对苯二酚的保留时间分别为 11 . 43 、9 . 62 取适量邻 、间 、对苯二酚储备液 ,用 U 2000 紫外 1996 ,24 :1312 . 和 7 . 51 min ,邻苯二酚色谱峰拖尾较为严重 , 间苯 3 Minero C , Vincenti M . Determinatio n of Trace Amount s 二酚色谱峰有轻微的拖尾出现 ; 使用 Phenyl 柱时 , of Highly Hydrop hilic Co mpounds in Water by Direct 邻 、间 、对苯二酚的保留时间分别为 9 . 14 、7 . 21 和Derivatizatio n and GC2MS. Fresenius , J Anal Chem , 5 . 62 min ,邻苯二酚的色谱峰轻微拖尾 ;当使用 ODS() 1994 ,350 6:403 . 柱时 ,邻 、间 、对苯二酚的分离时间 7 . 41 、6 . 00 和 4 .4 Chen Y , You J , Chen S , Wang G. Multisorbent Thermal 89 min ,峰的拖尾现象消失 。Desorp tio n/ Gas Chro matograp hy/ MS for Determinatio n 由此 ,分离邻 、间 、对苯二酚的最佳色谱条件 :色 of Volatile Origanic Co mpounds in Indust rial Sewage. t h ( 谱柱为 CL C - ODS ,流动相为 1 % HAc - MeO H 4? Proceeding of BCEIA. Beijing : Beijing U niversity 8 ) μ6 ,V/ V ,流速为 1 mL / min ,进样体积为 10 L , 检 Press ,1999 ,D9 . 5 Nozaki O , Iwaeda T. Determinatio n of Substances wit h 测波长为 280 nm 。在该条件下 ,10 min 内三种物质 Alco holic or Phenolic Hydro xyl Group by Generatio n of 可达到基线分离 。 Hydrogen Pero xide wit h Imidazole and Pero xyo xalate 2 . 3 液相色谱法的定量分析数据 Chemiluminescence. J Biolumin Chemilumin , 1995 , 10 用 3 种物质的标准溶液进行工作曲线的制作 , () 6:339 . ( ) ( ) 以浓度 Y mg/ L 对峰面积 A进行线性回归 , 邻 、 Petit C , Nagy A. Enzymic Elect rode for t he Analysis of 6 间 、对苯二酚的工作曲线分别为 Y = 0 . 10 + 0 . 017A Phenols and Catchol Derivatives. J PharmBelg , 1996 , 51 ( ) ( ) r = 0 . 9989、Y = 0 . 18 + 0 . 020A r = 0 . 9996、Y =() 1:1 . ( ) 0 . 11 + 0 . 016A r = 0 . 9991 。检 测 限 以 2 倍 噪 音 Chen I C , Whang C W. CZE of Eleven Priority Phenols 7 ( ) S/ N = 2进行测定 ,邻 、间 、对苯二酚的检测限分别 ( wit h Ampero met ric Detectio n. J Chin Chem Soc Tai2 ) () 为 0 . 15 、0 . 20 、0 . 16 mg/ L 。采 用 加 入 法 测 定 回 收 wan,1994 ,41 4:419 . Kaneta T , Imasaka T. Indirect Determinatio n of Aro matic 8 率 ,回收率均在 96 %,103 %之间 , RSD 在 1 . 2 % Hydrocarbo ns by Semico nductor L aser Fluoro met ry in ,2 . 5 %之 间 。对 某 化 工 厂 的 废 水 进 行 HPL C 分 () M EC. Anal Chem ,1995 ,67 5:829 . 析 ,结果满意 。 刘学良 ,周良模 ,王清海 ,朱道乾 . 毛细管电泳分离氯代 9 参考文献 :() 酚的研究 . 分析化学 ,1998 ,26 4:4472450 .1 Shoup R P , Mayer G S. Determinatio n of Enviro nmental 张书胜 ,梁 丽 ,袁倬斌 . 苯二酚异构体的电动毛细管 10 Phenols by L C/ EC. Anal Chem ,1982 ,54 :1164 . 色谱 - 玻碳微电极柱上安培检测分析方法研究 . 色 2 邓国才 , 徐 莉 . 邻 苯 二 酚 的 HPL C 分 析 . 分 析 化 学 ,() 谱 ,1999 ,17 1:52254 . Study of Separat ion an d Determinat ion of the Isomers of Diphenol s by HPL C 1 2L I U Hon g2x i a, S HI X i a n g2y u (1 . Inst rumental Analysis Center , Zhengzhou U niversity , Zhengzhou 450052 ,China ; )2 . Chemical Engineering Depart ment ,J iaozuo U niversity ,J iaozuo 454002 ,China Abstract :The separatio n and detectio n of t he Iso mers of o ,m ,p - Dip henols by HPL C wit h ult ra violet detectio n at 280 nm were developed. The separatio n of t hese materials in baseline was co mpleted wit hin 10 min by HPL C. ( ) The calibratio n lines were linear in t he range of 0 . 5,100 mg/ L ,and t he detectio n limit s S/ N = 2were 0 . 15 , 0 . 20 and 0 . 16 mg/ L fo r o ,m ,p - dip henol ,respectively. The recoveries of t hese materials ranged f ro m 96 % to 103 %. RSDs ranged f ro m 1 . 2 % to 2 . 5 %. Key words :high2perfo r mance liquid chro matograp hy ; dip henol ;iso mer