营养琼脂培养基配方及使用说明

营养琼脂培养基配方及使用说明022020营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)(NutrientAgar)营养琼脂培养基用途：营养琼脂培养基用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003中4.7,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO)o营养琼脂培养基检测原理：蛋口腺和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。营养琼脂培养基配方(每升)：蛋白腺10g牛肉膏粉3g氯化钠5g琼脂log最终pH7.3±0.2培养基使用方法:1、称取营养琼脂培养基\A33g,加入蒸憾水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121C高压灭菌15min,备用。2、（食品）以无菌操作称取检样25克（或25mL）,放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中（瓶内预置适当数量的玻璃珠），充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100,1：1000……稀释液。3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取ImL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46°C左右的培养基注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有lmL稀释液的灭菌平III1■内作空口对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1°C温箱中培养48±2ho5、观察结果。6、菌落计数方法：做平板菌落讣数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。