19-酒石酸美托洛尔片评价方法研究经验分享-陈民辉

酒石酸美托洛尔片一致性评价方法研究江苏省食品药品监督检验研究院陈民辉2015年11月酒石酸美托洛尔一致性评价研究2背景介绍1仿制药一致性评价的相关思考3酒石酸美托洛尔片一致性评价方法研究酒石酸美托洛尔基本情况高血压心绞痛的首选药物1975年ASTRA公司首研商品名为“倍他乐克”全球销量最大的β受体阻滞剂仿制药的质量属性•BA/BE试验一致•有关物质限量安全等效•BA/BE试验一致临床疗效等效•过程控制、制剂稳定性•原辅料、处方、工艺一致药学等效体外溶出行为一致仿制药质量一致性评价研究的依据21普通口服固体制剂参比制剂的选择与确立指导原则普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则3仿制药质量一致性评价人体生物等效性研究技术指导原则11月4日征求意见稿研究背景——溶出曲线研究的作用为仿制药体内生物等效性试验提供研究指导1234用于剖析参比制剂的内在技术特点用于仿制药与被仿制药质量的一致性评价建立用于质量控制的溶出度试验方法酒石酸美托洛尔一致性评价方案研究2背景介绍1仿制药一致性评价的相关思考3酒石酸美托洛尔片一致性评价方法研究评价方案研究评价方案研究2、参比制剂的选择地产化产品日本橙皮书FDAorangebook5、草案的拟定4、评价方法的确立3、试验部分溶出方法的建立原料药理化性质的测定仪器的验证预实验1、文献查阅查阅产品相关文献美国FDA溶出曲线数据库各国药典及其他法定方法BCS分类日本橙皮书原研产品的技术特点及仿制产品的临床疗效差异性原研产品的溶出度测定方法安全性相关的技术指标原料药特性各溶出数据库原研产品酒石酸美托洛尔片国内外标准对比表项目ChP2010BP2010USP35JPXVI[性状]白色片///[鉴别](1)化学鉴别(1)IR鉴别(1)IR鉴别UV-Vis鉴别(2)HPLC鉴别(2)TLC鉴别(2)UV-Vis鉴别(3)UV-Vis鉴别(3)HPLC鉴别[检查]有关物质HPLC法。限度：单个最大杂质≤0.3%，杂质总量≤0.5%HPLC法。限度：单个最大杂质≤0.3%，杂质总量≤0.5%//含量均匀度25mg规格有此要求/符合规定符合规定溶出度转篮法100转/分氯化钠的盐酸溶液900ml或500ml为溶出介质，30分钟取样274nm测定限度：75%/转篮法100转/分不加酶的人工胃液900ml为溶出介质，30分钟取样275nm测定限度：75%桨板法50转/分水900ml为溶出介质，30分钟取样HPLC法测定限度：80%其他符合片剂通则符合片剂通则符合片剂通则符合片剂通则[含量测定]HPLC法。限度：95.0-105.0%UV法，无水乙醇为溶剂，274nm测定，对照品法。限度：95.0-105.0%HPLC法。限度：90.0-110.0%HPLC法。限度：93.0-107.0%结构式：解离常数（25℃）：pKa≈9.737℃在各溶出介质中的溶解度：pH1.2：1.0g/ml以上pH4.0：1.0g/ml以上pH6.8：1.0g/ml以上水：1.0g/ml以上酒石酸美托洛尔理化性质日本橙皮书收载情况<20mg规格片剂>A型（阿司利康）日本橙皮书收载情况<20mg规格片剂>B型（诺华）日本橙皮书收载情况<40mg规格片剂>A型（阿司利康）日本橙皮书收载情况<40mg规格片剂>B型（诺华）日本橙皮书收载情况美托洛尔的BCS分类Compound:MetoprololCAS:37350-58-6Category:CardiovascularAgentsSubcategory:Beta-adrenergicAntagonistsFormula:C15H25NO3MolecularWeight:267.36LowestSolubility(mg/ml):1000.0HumanPermeability(x10^4cm/s):1.34MeasuredHIGHPermeabilitycLogP:1.486logP:1.72CountryList:MinimumDose(mg)MaximumDose(mg)Do(min)Do(max)SolubilityBCSClass(Human)SP47.5100.01.9E-44.0E-4HIGHClassIUS25.0100.01.0E-44.0E-4HIGHClassIUK50.0100.02.0E-44.0E-4HIGHClassI参比制剂的选择国内上市原研国外上市多来源优选日本橙皮书品种目录FDAORANGEBOOK（FDA橙皮书）ApplNoTECodeRLDActiveIngredientDosageForm;RouteStrengthProprietaryNameApplicantN017963ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGLOPRESSORUSPHARMSHOLDINGSIN017963ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL50MGLOPRESSORUSPHARMSHOLDINGSIA202871ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGMETOPROLOLTARTRATEALEMBICPHARMSLTDA202871ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL25MGMETOPROLOLTARTRATEALEMBICPHARMSLTDA202871ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL50MGMETOPROLOLTARTRATEALEMBICPHARMSLTDA077739ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGMETOPROLOLTARTRATEAUROBINDOPHARMAA077739ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL25MGMETOPROLOLTARTRATEAUROBINDOPHARMAA077739ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL50MGMETOPROLOLTARTRATEAUROBINDOPHARMAA078459ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGMETOPROLOLTARTRATEIPCALABSLTDA078459ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL25MGMETOPROLOLTARTRATEIPCALABSLTDA078459ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL50MGMETOPROLOLTARTRATEIPCALABSLTDA073654ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGMETOPROLOLTARTRATEMUTUALPHARMA073654ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL25MGMETOPROLOLTARTRATEMUTUALPHARMA073653ABNoMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL50MGMETOPROLOLTARTRATEMUTUALPHARMA076704ABYesMETOPROLOLTARTRATETABLET;ORAL100MGMETOPROLOLTARTRATEMYLAN阿斯利康制药有限公司地产化产品序号品名批准文号生产企业规格1酒石酸美托洛尔片国药准字H32025391阿斯利康制药有限公司25mg2酒石酸美托洛尔片国药准字H32025390阿斯利康制药有限公司50mg3酒石酸美托洛尔片国药准字H32025392阿斯利康制药有限公司100mg阿斯利康药业（中国）有限公司泰州工厂（委托加工）阿斯利康制药有限公司无锡工厂中国大陆、亚太地区、欧洲地区酒石酸美托洛尔片研究用参比样品信息唯一号批号规格片/盒含量（％）JS2012YT0408121005125mg20100.2JS2012YT0409121005225mg20100.0JS2012YT0450121005325mg2099.7JS2012YT0410121001650mg2099.8JS2012YT0411121001850mg2099.7JS2012YT0412121001950mg2098.8JS2012YT076660001223100mg220100JS2012YT076760001345100mg30099JS2012YT076860001346100mg300100参比制剂：酒石酸美托洛尔普通片生产企业：阿斯利康制药有限公司无锡工厂规格：25mg、50mg和100mg三个规格批次：每规格3个批次评价方法：采用多条溶出曲线相似性比较法酒石酸美托洛尔片的评价方法研究方案原料药理化性质的测定解离常数（pKa）的测定pH-溶解度曲线图的测定溶液稳定性测定方法：采用电位pH值滴定法结果：酒石酸美托洛尔电解常数pKa为9.7与日本橙皮书收载结果一致！酒石酸美托洛尔pKa的测定批号溶剂称样（g）体积（ml）现象606147水1.001.00完全溶解pH1.21.001.00完全溶解pH2.01.001.00完全溶解pH3.01.001.00完全溶解pH4.01.001.00完全溶解pH5.01.001.00完全溶解pH6.01.001.00完全溶解pH6.81.001.00完全溶解pH7.01.001.00完全溶解pH8.01.001.00完全溶解pH-溶解度曲线图的测定仪器比对机械校验系统验证溶出仪校验溶出仪校验报告汇总表仪器所属单位江苏省食品药品检验所仪器SOTAXAT7smart仪器生产厂家瑞士SOTAX公司购买时间2010.03.08仪器唯一号RCY100308A主机序列号1024.051仪器校验厂家上海析信仪器科技有限公司校验时间2013.3.22校验项目名称标准规定结果备注外观仪器外组件如果需要，所有组件（皮带和丝杠套件）需要查看，清洁，润滑。仪器运行中不能有啸叫等异常的声音1.清洁，润滑2.仪器运行平滑器皿所有的溶出杯必须有编号，干净，没有划痕。有可疑的溶出杯不得使用经过检查，每个溶出杯都符合要求转篮1.篮网不能被损坏，扭曲，变形，篮子必须清洁干净。可疑的不得使用经过检查，由于篮杆的弹簧片松动，转篮不在使用搅拌桨所有的搅拌桨必须有编号，并且外表面必须干净，没有划痕。可疑的搅拌桨不得使用经过检查，每个搅拌桨都符合要求其它仪器配件的放置：每个配件之间不得在放置的情况下发生碰撞和摩擦每个仪器的溶出杯，搅拌桨，转篮，篮杆单独放置，没有发生刮擦。规格器皿所有的溶出杯必须有编号，有符合USP的COA或者COC或者自己测量规格参数均符合USP的COA或者COCUSP和CP的规定是一样的转篮所有的转篮和篮头必须有编号，有符合USP的COA或者COC或者自己测量规格参数均符合USP的COA或者COCUSP和CP的规定是一样的搅拌桨所有的搅拌桨必须有编号，有符合USP的COA或者COC或者自己测量规格参数均符合USP的COA或者COCUSP和CP的规定是一样的其它仪器配件唯一性：每台仪器的溶出位置必须与，溶出杯搅拌桨，转篮，篮杆，活塞泵的取样通道等必须一一对应，配件不得随意更换符合美国FDA的要求：每台仪器的溶出位置都对应唯一的溶出杯搅拌桨，转篮，篮杆，活塞泵的取样通道。序列号已经贴于仪器左侧这样可以确保每台仪器都一直工作在相同的状态，避免了更换溶出配件位置后带来的误差。校验项目名称标准规定结果备注仪器的水平度仪器的X/Y方向的水平度小于0.5°X:0.2Y:0.2NA传动轴的摆动转速设定在50RPM，晃动度小于0.5mm7个转动轴的晃动度的在0.05---0.24结果详见附件转篮与搅拌桨传动轴的垂直度1.搅拌桨杆在X/Y方向上的垂直度在90±0.5°2.篮杆在在X/Y方向上的垂直度在90±0.5°1.7个搅拌桨杆在X/Y方向上的垂直度的范围是89.6°----89.8°2.该机的篮杆没有使用该机配置为实心桨转篮的摆动转篮底部的晃动度小于1mmNA没有转篮的器皿的定中转轴与溶出杯的以下4个位置的一周的最大距离，都必须小于1mm1.转篮上部2mm2.转篮上部60mm3.桨叶上部2mm4.桨叶上部80mm1.转篮上部2mm的距离范围：0.15---0.682.转篮上部60mm距离范围：0.22---0.653.桨叶上部2mm距离范围：0.26—0.624．桨叶上部80mm距离范围：0.22----0.48结果详见附件器皿的垂直度溶出杯内部在X/Y两个方向上垂直度小于1°1.X方向上垂直度范围：0.03----0.442.X方向上垂直度范围：0.01----0.49结果详见附件转篮与搅拌桨（或搅拌桨碟）的深度25mm±2mm符合搅拌速度转速在50rpm和100rpm时，转速偏差在±2rpm1.50RPM时7个位置的转速范围：50.3----50.62.100RPM时7个位置的转速范围：100.3---100.6结果详见附件器皿温度1.设置温度在37.0℃，水浴的温度和显示的温度的差值在0.5℃以内2.7个溶出杯内的温差在±0.2℃以内1.设置温度在37.0℃，水浴的温度和显示的温度的差值为0℃2.7个溶出杯内的温差在±0.1℃以内结果详见附件活塞泵的流速取样偏差7个取样通道之间的取样偏差在±2.0℅7个取样通道之间的取样偏差的范围：-0.94℅到0.93℅结果详见附件水杨酸校正片符合规定符合规定结果详见附件注：检测设备均有国家计量或等效的验证，详见附件1、2、3、4溶出仪校验报告汇总表重复性试验与精度评估同品牌溶出仪间的重复性试验重复性试验不同品牌溶出仪间的重复性试验不同实验室间的重现性不同品牌型号溶出仪的结果差异原因SOTAX1LVESSELspecificationRefNo.UspspecInspectionrangeSOTAX参数198-10698-106100+/-0.22160-210160-210200+/-0.2349-5349-5350+/-0.2Agilent1LVESSELspecification溶出方法的建立溶出方法的建立溶出介质的选择溶出装置的选择溶出条件的选择溶出介质的选择Page32装置的选择桨法篮法桨法+沉降篮溶出装置溶出方法条件的选择介质体积转速取样时间点500ml900ml1000ml桨法50～75转/分钟篮法75～100转/分钟5、10、15、30、45、60、90、120、180、240、360、420、480、520、600分钟方法学验证：专属性、准确度、精密度、线性、定量限、溶液的稳定性含量测定方法的选择与验证CP2010USP35JP16JP16拟定的测定方案溶出介质：pH1.2、4.0、6.8、水介质体积：900ml溶出装置：桨法50转/分钟取样时间：5、10、15、30、45、60、90、120分钟预实验如4种溶出介质在15分钟内均达到85％时，即采用该条件用于溶出曲线测定比较如在规定的时间内溶出率达到85％，并且只要有一种时间略长于15分钟溶出介质。即可采用该条件用于溶出曲线测定比较。当参比制剂达到85％的时间过长时，则应进行适当追加试验的探讨选择适合的介质进行比较每种溶剂取3片样品进行试验（1）试验前将自动溶出仪的管路用水充分清洗，确认自动取样器工作正常。（2）将溶出杯按照校验的编号顺序放置，试验开始前分别测定每个溶出杯内溶出介质的温度。溶出介质的温度应为37±0.2℃范围内。（3）每批参比样品按每种溶剂取12片分两台溶出仪平行试验，试验前称取每片样品的片重，依次投入溶出仪进行试验。（4）试验中注意观察自动取样情况，如有异常，及时采用手动方式补充取样。注意观察溶出杯中是否有样品漂浮、粘壁、堆积等现象。试验操作方案参比制剂中间状态批号的选择方法正式试验采用12片/批，按照予试验拟定的方案试验1、在参比制剂于规定的时间内平均溶出率可达85％以上的溶出介质中，选取溶出速率最慢的介质。2、如果参比制剂在规定的时间内平均溶出率均未达85％时，则选取溶出速率最快的介质。3、以所选介质中溶出量约为70%左右时处于中间状态的作为中间状态批号。结果示例（25mg规格）溶出率（%）时间（min）水pH1.2pH4.0pH6.8537.831.138.636.61071.964.171.470.71593.687.193.492.530100.3100.199.398.845100.5100.899.998.960100.7100.4100.999.0结果示例（50mg规格）溶出率（%）时间（min）水pH1.2pH4.0pH6.8520.119.323.023.21048.441.954.954.71571.268.676.877.53092.3100.098.6100.74593.1100.298.899.96093.6100.398.899.9结果示例（100mg规格）溶出率（%）时间（min）水pH1.2pH4.0pH6.8520.119.323.023.21048.441.954.954.71571.268.676.877.53092.3100.098.6100.74593.1100.298.899.96093.6100.398.899.9溶出曲线测定结果25mg规格（水）020406080100120010203040506070时间（min)溶出度(％)12100511210052121005325mg规格（pH1.2)020406080100120010203040506070时间（min)溶出度（％）12100511210052121005350mg规格（水）0102030405060708090100010203040506070时间（min)溶出度（％）12100161210018121001950mg规格(pH1.2)020406080100120010203040506070时间（min）溶出度（％）12100161210018121001925mg规格(pH4.0)020406080100120010203040506070时间（min)溶出度（％）12100511210052121005325mg(pH6.8)020406080100120010203040506070时间（min）溶出度（％）12100511210052121005350mg规格(pH4.0)020406080100120010203040506070时间（min）溶出度（％）12100161210018121001950mg（pH6.8)020406080100120020406080时间（min）溶出度（％）121001612100181210019溶出曲线测定结果参比制剂筛选结果根据试验结果，我们选取溶出曲线中间批号的样品作为参比制剂样品即1210051（25mg规格）和1210016（50mg规格）1210051（25mg规格）020406080100120010203040506070时间（min）溶出度（％）水pH1.2pH4.0pH6.81210016（50mg规格）0.020.040.060.080.0100.0120.0010203040506070时间（min）溶出度（％）水pH1.2pH4.0pH6.8溶出曲线评价方法的确立溶出曲线评价方法整体评估溶出曲线评价方法的确立溶出曲线的相似性判断我们制得的溶出曲线与橙皮书溶出曲线在溶出速率上有一定差别，除规格有差异外，日本注册生产的酒石酸美托洛尔片制剂工艺与中国注册生产的制剂工艺有一定区别与日本橙皮书标准溶出曲线比较溶出曲线相似性的比较，多采用非模型依赖法中的相似因子（f2）法。该法溶出曲线相似性的比较是将受试样品的平均溶出量与参比样品的平均溶出量进行比较。平均溶出量应为12片（粒）的均值。计算公式：Rt为t时间参比样品平均溶出量；Tt为t时间受试样品平均溶出量；n为取样时间点的个数。}100])()/1(1{[5025.012ntttTRnflg溶出曲线相似性的比较※滤膜过滤or前端滤头取样溶出降低？溶液循环和取样影响极易造成样品颗粒在滤膜处堆积※最后取样点自动and手动取样自动取样系统存在吸附现象？结果表明系统无吸附※全程手动and自动取样结果表明两种取样方式溶出结果一致异常结果的分析处理案例酒石酸美托洛尔片一致性评价参比制剂/溶出曲线测定(草案)中文名：酒石酸美托洛尔英文名：MetoprololTartrate分子式：(C15H25NO3)2·C4H6O4分子量：684.82结构式：解离常数（25℃）：pKa≈9.7在各溶出介质中的溶解度（37℃）：pH1.2：1.0g/ml以上pH4.0：1.0g/ml以上pH6.8：1.0g/ml以上在各溶出介质中的稳定性（37℃）：pH1.2：24小时内稳定pH4.0：24小时内稳定pH6.8：24小时内稳定光：未测定《标准溶出曲线》<25mg规格片剂><50mg规格片剂>1.有效成分：酒石酸美托洛尔2.剂型：片剂3.规格：25mg4.溶出介质：pH1.2、pH4.0、pH6.85.装置:桨法6.转速:50rpm7.表面活性剂：未使用020406080100120010203040506070时间（min）溶出率（％）pH1.2pH4.0pH6.8溶出曲线酒石酸美托洛尔片25mg1.有效成分：酒石酸美托洛尔2.剂型：片剂3.规格：50mg4.溶出介质：pH1.2、pH4.0、pH6.85.装置：桨法6.转速:50rpm7.表面活性剂：未使用020406080100120010203040506070时间（min）溶出率（％）pH1.2pH4.0pH6.8溶出曲线酒石酸美托洛尔片50mg<100mg规格片剂>1.有效成分：酒石酸美托洛尔2.剂型：片剂3.规格：100mg4.溶出介质：pH1.2、pH4.0、pH6.85.装置：桨法6.转速：50rpm7.表面活性剂：未使用020406080100120010203040506070时间（min)溶出率（％）pH1.2pH4.0pH6.8溶出曲线酒石酸美托洛尔片100mg溶出曲线测定方法照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录VD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1mol/L高氯酸钠溶液（用0.85％高氯酸调节pH值至3.2）-乙腈(3:1)为流动相，检测波长为274nm，柱温为30℃，调整流速使美托洛尔主峰保留时间约为8分钟，理论板数按美托洛尔峰计算不低于2000，拖尾因子不大于1.5。测定法取本品，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录XC第二法)，分别以规定的三种溶剂900ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经5、10、15、30、45、60分钟时，取溶液适量（5～10ml），滤过，并即时补充相同温度相同体积的溶出介质，取续滤液作为供试品溶液；另取酒石酸美托洛尔对照品适量，精密称定，加相应的溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含28µg（25mg规格）、56µg（50mg规格）、110µg（100mg规格）的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各50μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算每片在不同时间点的溶出量。以12片的平均溶出量为纵坐标，时间为横坐标，绘制溶出曲线。三种溶出介质配制方法：(1)pH1.2溶出介质的配制：取氯化钠2.0g和盐酸7.0ml，加水溶解并稀释至1000ml，即得。(2)pH4.0溶出介质的配制：取0.05mol/L醋酸溶液与0.05mol/L醋酸钠溶液按照16.4：3.6（V/V）比例混合，即得。(3)pH6.8溶出介质的配制：取磷酸盐缓冲液（pH6.8）（取磷酸二氢钾3.40g及无水磷酸氢二钠3.55g用水溶解并稀释至1000ml）适量，用水稀释1倍。溶出曲线测定方法溶出曲线相似性比较与判定方法溶出曲线相似性的比较是将仿制制剂的平均溶出量与参比制剂的平均溶出量进行比较。平均溶出量应为12片（粒）的均值。(1)25mg规格：在三种溶出介质中，均采用相似因子（f2）法比较溶出曲线相似性，比较的时间点为10、15和30分钟，两条溶出曲线相似因子（f2）数值不小于50，可认为溶出曲线具有相似性。或在三种溶出介质中，当参比制剂在15分钟时，平均溶出量不低于85%，仿制制剂在15分钟时，平均溶出量不低于85%；或与参比制剂平均溶出量的差值均不大于10%，可认为溶出曲线相似。(2)50mg规格：在三种溶出介质中，均采用相似因子（f2）法比较溶出曲线相似性。比较的时间点为10、15和30分钟，两条溶出曲线相似因子（f2）数值不小于50，可认为溶出曲线具有相似性。(3)100mg规格：在三种溶出介质中，均采用相似因子（f2）法比较溶出曲线相似性。比较的时间点为10、15和30分钟，两条溶出曲线相似因子（f2）数值不小于50，可认为溶出曲线具有相似性。参比制剂的筛选的总体评价1、阿斯利康制药有限公司提供的9批制剂均为市售产品,生产批量均在100万片/批以上，多介质条件下溶出曲线批内、批间差异小，作为实现了生产过程控制的产品，其良好的质量在溶出曲线上得到充分反映。2、关于25mg规格释放速率快于50mg问题。3、参比制剂的稳定性考察。仿制药质量一致性评价的相关思考（1）溶出曲线法与生物学等效性试验（BE）之争。（2）采用溶出曲线法进行一致性评价的适用领域。（3）溶出曲线法在产品质量控制的作用（4）溶出曲线法在药品监管上的作用。完毕，谢谢！