志贺氏菌属(参照模板)

PAGE/NUMPAGES志贺氏菌属志贺氏菌属（Shigella）的细菌（通称痢疾杆菌），是细菌性痢疾的病原菌。临床上能惹起痢疾症状的病原生物好多，有志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、大肠杆菌等，还有阿米巴原虫、鞭毛虫、以及病毒等均可惹起人类痢疾，此中以志贺氏菌惹起的细菌性痢疾最为常有。人类对痢疾杆菌有很高的易感性。在幼儿可惹起急性中毒性菌痢，死亡率甚高。一、生物学性状志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无显然差别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μm,宽0.5-0.7μm。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。需氧或兼性厌氧。营养要求不高，能在一般培育基上生长，最适温度为37℃，最适pH为6.4-7.8。37℃培育18-24小时后菌落呈圆形、微凸、圆滑润湿、无色、半透明、边沿齐整，直径约2nm，宋内氏菌菌落一般较大，较不透明，并常出现扁平的粗拙型菌落。在液体培育基中呈平均污浊生长，无菌膜形成。本菌属都能分解葡萄糖，产酸不产气。大多不发酵乳糖，仅宋内氏菌缓慢发酵乳糖。靛基质产生不定，甲基红阳性，VP试验阴性，不分解尿素，不产生H2S。依据生化反响可进行初步分类。志贺氏菌属的细菌对甘露醇分解能力不一样，可分为二大组。A、不分解甘露醇组：主要为志贺氏菌。又依据可否产生靛基质，进一步分靛基质阳性（1、3、4、5、6、9、10型）和靛基质阴性（2、7、8型）的志贺氏痢疾菌。B、分解甘露醇组：包含福氏、鲍氏、宋内氏菌。再按乳糖分解状况，分为缓慢分解乳糖的宋内氏和不分解乳糖的福氏和鲍氏菌。后者进一步再依据靛基质产生与否，分靛基质阳性（福氏菌1、2、3、4、5型和鲍氏菌5、7、9、11、13、15型）和靛基质阴性（福氏菌6型和鲍氏菌1、2、3、4、6、8、10、12、14）二类（见表一）表一志贺氏菌属生化反响的分类葡萄糖（+）甘露醇（-）甘露醇（+）志贺氏菌志贺氏菌乳糖（-）乳糖（+）（1、3、4、（2、7、8型）5、6、9、10型）靛基质（-）靛基质（+）靛基质（-）福氏菌6型福氏菌（1、2、宋内氏菌鲍氏菌（1、2、3、4、5型），3、4、6、8鲍氏菌（5、7、9、10、12、14型）11、13、15型）抗原结构与分型：志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原（O）及表面抗原（K）构成。主要抗原有三种。型特异性抗原：型多糖抗原为菌体抗原的一种，是圆滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变成粗拙型时，此抗原也常随之消逝，各菌型所含的型抗原不一样，可用于差别菌种的型别。群特异性抗原：为圆滑型菌株的次要抗原，也是菌体抗原的一种。特异性较低，常在数种近似的菌内出现。在福氏菌株中，因为所含群抗原不一样，可将某些菌型分为多种亚型，如福氏菌2型，依据群抗原不一样，可分红2a、2b两个亚型。表面抗原（K抗原）：在新分别的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热，加热100℃1小时即被损坏。拥有此种抗原的菌株，可阻挡菌体抗原与相应免疫血清发生凝聚。依据抗原结构的不一样，按最新国际分类法，将本属细菌分为四个群、39个血清型（包含亚型）（见表二）表二志贺氏菌属抗原的分类菌名血清分类生化特性群型亚型甘露醇鸟氨酸脱羧酶志贺氏菌A1~10+-1a、1b、2a、2b、+-福氏菌B1~63a、3bx、y变种3c、4a、4b鲍氏菌C1~15+-宋内氏菌D1+-A群：也称志贺氏菌群，有10个血清型。不发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶，与其余各群细菌无血清学联系。B群：也称福氏菌群，已有13个血清型（包含亚型和变种）。近来又发现3个亚型（1c、4c、5b）。发酵甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。抗原结构较复杂，各型间有交错凝聚。每一福氏菌型拥有二种抗原，即型特异性抗原和群抗原，前者只存在于同型菌株中，后者有很多种，存在于福氏各菌型中。比如福氏1b型除含有1型特异性抗原外，尚含有4、6群抗原。C群：也称鲍氏菌群，有15个血清型，分解甘露醇，无鸟氨酸脱羧酶。各型内无交错凝聚。D群：也称宋内氏菌群，仅有一个血清型。分解甘露醇，有鸟氨酸脱羧酶，缓慢发酵乳糖。有Ⅰ、Ⅱ相之分。抵挡力：志贺氏菌属在外界环境中的生计力，以宋内氏最强，福氏菌次之，志贺氏菌最弱。一般在湿润土壤中能存活34天，37℃水中存活20天，在冰块中可存活96天，在粪便内（室温）存活11天。日光直接照耀30分钟，56-60℃10分即被杀死，对高平和化学消毒剂很敏感，1%石炭酸中15-30分钟即被杀死，对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。变异性：S-R型变异：菌落可由圆滑型变成粗拙型，同常常伴有生化反响、抗原结构和致病性的变异。在机体内，特别在慢性患者和恢复期患者，志贺氏菌可发生变异而失掉本来的生化和抗原特征，成为不典型菌株。但此中部分不典型菌株，可经过10%胆汁肉汤等返祖为典型菌株。故在慢性患者或带菌者粪便检查时，对这类菌株要特别注意，一定多次频频检查。因这对传染源的发现及控制有重要意义。耐药性变异：自从宽泛使用抗菌素以来，志贺氏菌的耐药菌株不停增添，给防治工作带来很多困难。国内部分地域报导（1972-1974），志贺氏菌对四环素的耐药率达74%、氯霉素73.6-97%、链霉素84-98%、合霉素75-100%、磺胺类97-100%，可见国内对常用几种抗菌素的耐药率相当高。毒力变异与其余变异：1963年南斯拉夫Mel氏第一创用依靠链霉素的志贺氏菌株（依链Sd株，口服预防痢疾。Sd株是一株一定有链霉素存在下才能生长的菌株，其毒力减弱但仍保持免疫原性。美国以天然变异无毒株与大肠杆菌杂交而获取的MH株制成疫苗，其免疫成效和稳固性均较Sd株差。我国正鼎力利用变异方法经过动物和药物办理等找寻安全有效可供口服的痢疾杆菌活菌苗，并已获得初步收效。与E.coli的鉴识：志贺氏菌与E.coli的差别，确实是很困难的，这也反应了这两者在DNA—DNA杂交显示亲密有关性，实质是“同一种”。A.培育物常常是不运动的，赖氨酸是阴性。B.除了福氏志贺氏6、鲍氏志贺氏13和14、痢疾志贺氏3少量菌株外，在糖发酵时不产气。C.发酵黏液酸或乙酸盐洋菜上或Chiristensen柠檬酸洋菜。如呈碱反响的菌株则近似与E.coli。D.鲍氏志贺氏菌和痢疾志贺氏菌在美国极少见。二、流行病学：人和灵长类是志贺氏菌的适合宿主，营养不良的幼儿、老人及免疫缺点者更加易感。据报导，每年约有14000例志贺氏菌病，但预计发病人数为30万。据FDA统计，1997年美国加州等5个州食源性疾病共为8051例，此中志贺氏菌惹起的为1263例。志贺氏菌病常为食品迸发型或经水流传。和志贺氏菌病有关的食品包含色拉（土豆、金枪鱼、虾、通心粉、鸡），生的蔬菜，奶和奶制品，禽，水果，面包制品，汉堡包，和有鳍鱼类。志贺氏菌在拥堵和不卫生条件下能快速流传，常常发现于人员大批集中的地方如餐厅、食堂。食源性志贺氏菌流行的最主要原由是从事食品加工行业人员患菌痢或带菌者污染食品，食品接触人员个人卫生差，寄存已污染的食品温度不适合等。三、致病性：志贺氏菌惹起的细菌性痢疾，主要经过消化道门路流传。依据宿主的健康状况和年纪，只要少许病菌（起码为10个细胞）进入，就有可能致病。致病要素：志贺氏菌的致病作用，主假如侵袭力、菌体内毒素个别菌株能产生外毒素。侵袭力：志贺氏菌进入大肠后，因为菌毛的作用粘附于大肠粘膜的上皮细胞上，既而进入上皮细胞并在内生殖，扩散至周边细胞及上皮基层。因为毒素的作用，上皮细胞死亡，粘膜下发炎，并有毛细吸管血栓形成以致坏死、零落，形成溃疡。志贺氏菌一般不入侵其余组织，有时可惹起败血症。当前以为无论是产生外毒素的仍是只有内毒素的志贺氏菌，一定侵入肠壁才能致病。所以，对粘膜组织的侵袭力是决定致病力的主要要素。内毒素：志贺氏菌属中各菌株都有激烈的内毒素，作用于肠壁，使通透性增高，进而促使毒素的汲取。既而作用于中枢神经系统及心血管系统，惹起临床上一系列毒血症症状，如发热、神志阻碍，甚至中毒性休克。毒素损坏粘膜，形成炎症、溃疡，体现典型的痢疾脓血便。毒素作用于肠壁植物神经，使肠道功能杂乱，肠蠕动共济失调解痉挛，特别直肠括约肌最显然，因此发生腹痛、里急后重等症状。外毒素：志贺氏菌1型及部分2型（斯密兹痢疾杆菌）菌株能产生激烈的外毒素。为蛋白质，不耐热，75-80℃1小时即可损坏。其作用是使肠粘膜通透性增添，并致使血管内皮细胞伤害。外毒素经甲醛或紫外线办理可脱毒成类毒素，能刺激机体产生相应的抗毒素。一般以为拥有外毒素的志贺氏菌惹起的痢疾比较严重。所致疾病：志贺氏菌惹起的细菌性痢疾可分为两类6型。A、急性细菌性痢疾：又分急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢三型。急性典型菌痢症状典型，有腹痛腹泻、脓血粘便、里急后重、发热等症状。各型菌都可惹起，以志贺氏菌惹起的较重，宋内氏菌惹起的较轻。经治疗，预后优秀。如治疗不完全，可转为慢性。急性非典型菌痢症状不典型，易诊疗错误延迟治疗，常致使带菌或慢性发展。急性中毒性菌痢小儿常见，各型菌都可发生。中毒性菌痢一系列的病理生理变化，主假如内毒素造成机体微循环阻碍的结果。致使内脏淤血、四周循环衰竭（休克），主要功能器官灌输不足，发生心力弱竭、脑水肿，急性肾功能衰竭。严重微循环阻碍，再加上内毒素伤害血管内皮细胞、激活凝血因子等，而发生洋溢性血管内凝血（DIC）。B、慢性细菌性痢疾：又分慢性迁延型、慢性隐伏型、急性发生型三型。慢性迁延型，往常由急性菌痢治疗不完全等惹起。病程超出2个月，时愈时发，大便培育阳性率低。在有临床症状时为急性发生型，该型常常在半年内有急性菌痢病史。慢性隐伏型菌痢，是在一年内有过菌痢病史，临床症状早已消逝，但直肠镜可发现病变或大便培育阳性。志贺氏菌带菌者有三种种类。A.健康带菌者，是指临床上无肠道症状而又能排出痢疾杆菌者。这类带菌者是主要传染源，特别是饮食业、炊事员、和保育员中的带菌者，潜伏的危险性更大。B.恢复期带菌者，是指临床症状已治愈的病人，仍持续排菌达2周之久者。C.慢性带菌者，是指临床症状已治愈，但长久排菌者。免疫性：病后有必定的免疫力，但免疫期短，也不稳固。可能因本菌属菌型众多，互相间无交错免疫性之故。免疫性与血中抗体仿佛没关，而与肠道粘膜细胞吞噬能力增强和机体对痢疾杆菌内毒素耐受性提升有关。肠道分泌型抗体即粪抗体亦有必定作用。粪抗体出现早、消逝快，在脓血粘便中，粪抗体检出率高达90%。这为志贺氏疫苗经口免疫的可能性，供给了理论依照。四、查验：(国家GB4789.5-94）4.1增菌称取检样25g，加入装有225mLGN增菌液的500mL广口瓶内，固体食品用均质器以8000～10000r/min打坏1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用金属匙或玻璃棒研磨使其乳化，于36℃培育6～8h。培育时间视细菌生长状况而定，当培育液出现稍微浑浊时即应中断培育。4.2分别和初步生化试验取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平极或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板或伊红美蓝琼脂平板1个，于36℃培育18～24h，志贺氏菌在这些培育基上体现无色透明不发酵乳糖的菌落。挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。一般应多挑几个菌落，以防遗漏，经36℃培育18～24h，分别察看结果。下述培育物能够弃去：在三糖铁琼脂斜面上呈延伸生长的培育物；在18～24h内发酵乳糖、蔗糖的培育物；不分解葡萄糖和只生长在半固体表面的培育物；产气的培育物；有动力的培育物；产生硫化氢的培育物。4.2.4凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气(福氏志贺氏菌6型可产生少许气体)，无动力的菌株，可做血清学分型和进一步的生化试验。4.3血清学分型和进一步的生化试验血清学分型挑取三糖铁琼脂上的培育物，做玻片凝聚试验。先用4种志贺氏菌多价血清检查，假如因为K抗原的存在而不出现凝聚，应将菌液煮沸后再检查；假如体现凝聚，则用A1、A2、B群多价和D群血清分别试验。如系B群福氏志贺氏菌，则用群和型因子血清分别检查。福氏志贺氏菌各型和亚型的型和群抗原见表1。可先用群因子血清检查，再依据群因子血清出现凝聚的结果，挨次采用型因子血清检查。4种志贺氏菌多价血清不凝聚的菌株，可用鲍氏多价1、2、3分别检查，并进一步用1～15各型因子血清检查。假如鲍氏多价血清不凝聚，可用痢疾志贺氏菌3～12型多价血清及各型因子血清检查。表1福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原型和亚型型抗原群抗原在群因子血清中的凝聚3,467,81aⅠ1,2,4,5,9＋――1bⅠ1,2,4,5,9＋＋－2aⅡ1,3,4＋――2bⅡ1,7,8,9――＋3aⅢ1,6,7,8,9－＋＋3bⅢ1,3,4,6＋＋－4aⅣ1,(3,4)（＋）――4bⅣ1,3,4,6＋＋－5aⅤ1,3,4＋――5bⅤ1,5,7,9――＋6Ⅵ1,2,(4)（＋）――X变体——1,7,8,9――＋Y变体——1,3,4＋――进一步的生化试验在做血清学分型的同时，应做进一步的生化试验，即：葡萄糖铵，西蒙氏柠檬酸盐，赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶，pH7.2尿素，KCN生长，以及水杨昔和七叶昔的分解。除宋内氏菌和鲍氏13型为乌氨酸阳性外，志贺氏菌属的培育物均为阴性结果。必需时还应做革兰氏染色检查和氧化酶试验，应为氧化酶阴性的革兰氏阴性杆菌。生化反响不切合的菌株，即便能与某种志贺氏菌分型血清发生凝聚，仍不得判断为志贺氏菌属的培育物。已判断为志贺氏菌属的培育物，应进一步做5%乳糖发酵，甘露醇、棉子糖和甘油的发酵和靛基质试验。志贺氏菌属4个生化群的培育物，应切合该群的生化特征。但福氏6型的生化特征与A群或C群相像，见表2。表2志贺氏菌属四个群的生化特征生化群5%乳糖甘露醇棉子糖甘油靛基质A群：痢疾志贺氏菌－－－（＋）－／＋B群：福氏志贺氏菌－＋＋－（＋）C群：鲍氏志贺氏菌－＋－（＋）－／＋D群：宋内氏志贺氏菌+/（+）＋＋d－4.4结果报告：综合生化和血清学的试验结果判断菌型并作出报告。