[中学教育]CombiFlash RF 中压分离与制备系统操作规程

[中学教育]CombiFlash RF 中压分离与制备系统操作规程 CombiFlash RF+ 中压分离与制备系统操作规程 一、开机前准备 1. 先用薄层色谱法(TLC)分析样品。由薄层色谱获得合适的柱介质、用于分 离样品的溶剂组成系统及分离的难点。 R?2. 根据要分离样品的量，选择合适的RediSep柱子。如果样品的分离度较小 (?Rf<0.2)，那么上样量应该为所选柱子分离范围的最小值。 二、分离与制备 R?1. 将RediSep柱安装在CombiFlash Rf+系统中，系统自动为该柱子配置相应的 分离方法。当系统没有办法识别时，也可以通过手动的方式在系统中输入柱 介质及大小。 2. 用溶剂A和溶剂B控制用于样品分离的溶剂系统。 3. 选择Tools>Auto Prime打开Auto Prime窗口，选择匹配的溶剂后，点击Play 按钮。系统开始准备内部管路并关闭Auto Prime窗口。 4. 在主窗口中，点击Play按钮。 5. 从最小运行条件窗口中，选择上样类型。 如果分离样品在初始流动相(溶剂A)中可溶，选择Liquid选项。 如果分离样品在初始流动相(溶剂A)中不可溶，选择solid (Pause)选项. 如果样品直接装于柱介质中，选择None选项。当选择OK选项时，分离立 刻开始，中间不再有平衡过程。 选项solid选项为分离的固体样品已经装填好，系统会平衡柱子并自动开始 分离而不用用户的干预。 6. 点击OK开始运行。如果选择Liquid或solid (Pause)选项，继续第9步的操 作。如果选择None选项，跳过第9、10、11步的操作，直接进行第12步操 作。 7. 系统首先平衡柱子。在这段时间内，准备好样品。 如果选择Liquid选项，将样品以最小体积的溶剂A (或是其它的能混溶的 溶剂)进行溶解，并用注射器吸取溶解后的样品; 如果选择solid (Pause)选项，按固体装填样品的方法进行装填。 8. CombiFlash Rf+系统在执行完柱平衡后会暂停，并提醒用户装填液体样品或 是固体装样筒。 如果是液体——将注射器的样品注射到注射口。为使样品通过阀，再注射约 0.5mL的初如流动相到注射口。 如果是固体——将固体装样筒装于CombiFlash Rf+系统上。 9. 装完样品后，选择OK键开始运行。 10. 用主机上的红色吸收线监视分离过程。CombiFlash Rf+系统在运行中收集液 体到分离管中，它将有峰的液体与非峰的液体分离开来，屏幕上显示分离管 的变化并帮助用户定位于被分离的物质。 三、仪器维护 1. 每次使用后需要用蒸馏水或是温和的洗涤剂清洁仪器的外壳表面，使用异丙 醇去除顽渍。在标签区域，避免大力揉搓或使用丙酮等溶剂，以免影响印刷 文字。 2. 不要将仪器浸在水中。该仪器不防水，浸水可能会损坏内部电路板。 3. 收集架和托盘是由导电塑料做成的，污垢，膜或涂层都会影响到收集架和托 盘的使用，因而需每用清洁收集架和托盘，一般采用蒸馏水或其它温和的洗 涤剂，遇到顽渍时，可用异丙醇清洗。 4. 每月进行一次管道检查:可以先目视检查溶剂、废液和 排水管，管道应没有任何的损伤、裂纹和腐蚀。再按照操作手册上的采用真 空进行操作。 5. 清洗流动池:作为预防措施，所有的方法均应设一高浓度的溶剂B冲洗柱子 作为程序的结束。在这短暂的时间(两到三个柱体积)的内，残留化合物将会从柱子、流动池和内部管路中被清洗出来。如果不设冲洗程序，会引起后续分离的交叉污染，提高柱子的操作压力，减少灯的能量，吸收线会产生较大的噪音以及仪器会不断地提醒建设流动池的清洗。