阿尔新蓝pH2.5 – 酸性粘多糖
目的:用阿尔新蓝染酸性粘多糖和乙酸粘蛋白。在间皮瘤组织中可见过多的非硫酸性粘多糖。正常的血管壁存在一定数量的酸性粘多糖,而在动脉粥样硬化早期时数量会增加。
原理:阿尔新蓝是多价、碱性、水溶性染料。蓝色是由于分子中存有铜。3%醋酸阿尔新蓝液(pH2.5)能染硫酸、羧酸粘多糖和唾液粘蛋白(糖蛋白)。是由于碱性染料与粘多糖的酸基结合形成盐。。
对照:小肠、阑尾或结肠
固定:10%中性缓冲甲醛液(NBF), Bouin’s, or Hollande's.
技术:4μm石蜡切片
设备:蒸馏水洗玻璃器皿,染色缸,pH计,微波炉。
试剂:
3%冰醋酸液
冰醋酸Acetic acid 3.0 ml
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
保存期1年
警告:腐蚀性
阿尔新蓝溶液:
3%冰醋酸液glacial acetic acid100.0 ml
阿尔新蓝8GX 1.0 gm
混合溶解,用醋酸调PH 至2.5,过滤,加入少许麝香草酚。标签,签名和日期,保存期2-6个月。
警告:含有酸,避免接触和吸入。
核固红(Kernechtrot):
硫酸铝Aluminum sulfate 25.0 gm
蒸馏水Distilled water 500.0 ml
核固红Nuclear fast red 0.5 gm
先用水溶解硫酸铝,再加入核固红,加热溶解,过滤,加入少许麝香草酚,保存期1年。
警告:刺激性,避免接触和吸入。
安全:穿戴手套、护目镜和白大衣,避免接触和吸入。
醋酸:对呼吸系统有刺激性,侵入途径为吸入,影响靶器官为呼吸系统。腐蚀性。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 3%醋酸 3 minutes。
3. *阿尔新蓝微波高火30 seconds。
4. 流水冲洗2 minutes,蒸馏水稍洗。
5. 核固红5 minutes,流水冲洗。
6. 脱水,透明和封固。
*传统方法:阿尔新蓝室温30 minutes。
结果:
酸性粘液/粘液物质:蓝色
核:微红粉红
参考文献:
Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of HIstotechnology, 2nd Ed,
1980, pp 163,173-174, Battelle Press, Ohio
Bancroft J, Stevens A, Theory and Practice of Histological Techniques, 2nd
Ed, 1982,pp194-98,Churchill Livingstone, N.Y.
Carson F, Histotechnology A Self-Instructional Text, 1st Ed, 1990,pp126-
27, ASCP, Ill
Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology
Laboratory, 2nd ED, 1991, Anatech
程序卡:
阿尔新蓝pH2.5 – 酸性粘多液
对照:小肠、阑尾或结肠。
程序:
1. 脱蜡至蒸馏水。
2. 3%醋酸 3 minutes。
3. *阿尔新蓝微波高火30 seconds。
4. 流水冲洗2 minutes,蒸馏水稍洗。
5. 核固红5 minutes,流水冲洗。
6. 脱水,透明和封固。
*传统方法:阿尔新蓝室温30 minutes。
结果:
酸性粘液/粘液物质:蓝色
核:微红粉红
3%冰醋酸液
冰醋酸Acetic acid 3.0 ml
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
保存期1年
警告:腐蚀性
阿尔新蓝溶液:
3%冰醋酸液glacial acetic acid100.0 ml
阿尔新蓝8GX 1.0 gm
混合溶解,用醋酸调PH 至2.5,过滤,加入少许麝香草酚。标签,签名和日期,保存期2-6个月。
警告:含有酸,避免接触和吸入。
核固红(Kernechtrot):
硫酸铝Aluminum sulfate 25.0 gm
蒸馏水Distilled water 500.0 ml
核因红Nuclear fast red 0.5 gm
先用水溶解硫酸铝,再加入核固红,加热溶解,过滤,加入少许麝香草酚,保存期1年。
阿尔新蓝溶液:
3%冰醋酸液 glacial acetic acid 100.0 ml
阿尔新蓝8GX 1.0 gm
混合溶解,用醋酸调PH 至2.5,过滤,加入少许麝香草酚。标签,签名和日期,保存期2-6个月。
警告:含有酸,避免接触和吸入。
日期:
技师:
使用限期:
阿尔新蓝pH2.5:
日期:
技师:
3%冰醋酸液
冰醋酸Acetic acid 3.0 ml
蒸馏水Distilled water 100.0 ml
保存期1年
警告:腐蚀性
日期:
技师:
使用限期:
核固红液(Kernechtrot):
硫酸铝Aluminum sulfate 25.0 gm
蒸馏水Distilled water 500.0 ml
核因红Nuclear fast red 0.5 gm
先用水溶解硫酸铝,再加入核固红,加热溶解,过滤,加入少许麝香草酚,保存期1年。
日期:
技师:
使用限期:
核固红液
日期:
技师: