盖勃法测定乳脂肪

© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 第 卷第 期 年 互月 中 国 乳 品 工 业 。 , 〔。 盖 勃 法 测 定 乳 脂 肪 砚吸逐三扁三 髻拭梦, 一 、 盖勃法的基本操作 牛奶脂肪含量的测定方法有重量法和容 积法 重量法的方法是罗兹 —哥特里法 。 容积法有巴布考克法和盖勃法等 。 容积 法较重量法测定速度快 、 省时 、 ‘ 省力 。 最常 用的乳脂肪测定法 , 在我国 是 盖 勃 法 酸 法 。 现将盖勃法有关间题 讨 论 一 下 。 首 先 , 介绍盖勃法的基本操作 试剂 硫酸 , 比重 异戊醇 , 比重 · 仪器 盖勃乳脂计 , 刻度 。一 牛奶吸管 , 或 。 硫酸 自动定量瓶 , 异戊醇 自动定量瓶 离心 机 , 一 转 分 离 心因素 操作步骤 从硫 酸 自动 定 量 瓶 中 放 硫酸于乳脂计中 , 加 牛乳 , 异 戊醉 。 塞紧塞子 , 振摇乳脂计 , 当蛋白全部 溶解后 , 颠倒乳脂计 一 次 , 用 转 分 的离心机离心 分钟后置于 ℃水浴 分钟 。 取出乳脂计 , 计 口 向下垂直 , 调节胶塞使脂肪 柱底线落在带刻度部份 。 读取脂肪层与酸层 相交线弯月面最低点的读数 , 即为脂肪百分 数 。 二 、 盖勃法操作的说明 在盖勃法 酸法 测定 脂 肪 过 程 中, 应注意硫酸浓度。 其比重应为 。、 , 浓度为 。 也有使用一 一 的荷兰标准 。 如果硫酸 比 重太高会使 蛋 白碳化 , 读数困难 , 硫酸比重太低 , 不能 使所有的蛋 自质都溶解 , 水相与脂肪相之间 分离不好 , 脂肪就测 下出来 。 所以硫酸的比 重一定要恰到好处 。 硫酸的作用 , 一 是和酪 蛋 白钙盐作用 , 形成可溶性的重硫酸酪蛋 白 化合物和硫酸钙沉淀 、 , 二是破坏脂肪球膜 , 因而促使脂肪并合而成为油层 , 从水相中分 出 。 溶液的加热和离心的作用是使脂肪并合 与水相分离作用加速 。 加入异戊醇的作用 , 一是促进磷脂 从蛋白质中分离 , 二是有利于游离脂肪从水 相中分离 。 如果在异戊醇中存在醚类杂质 , 会使脂肪柱体积增大而读数偏高 。 所以必要 时可将异戊醇作 一鉴定 , 检验这类杂质是否 存在 。 鉴定方法如下 用等量的硫酸 比重 一 。 和水混合 。冷却后调整至比重 , 取 置子盖勃乳脂计中 , 加 需测试之异戊醇 , 塞紧塞子 , 育昆匀 、 离心分 离 , 进行第一次观察 , 应不出现 “ 油珠 ” 将乳脂计加热到 ℃ 分钟 , 再离心 , 第二 次观察 , 不应有油珠存在 再加 水 , 混 合 、 冷却 , 放置过夜 , 离心后观察 , 不应有 油珠存在 如有油 珠存 在 , 则 在离 心前会 出现溶液 混 浊 现 象 。 经过上述处理不出 现油珠的异戊醇方可用于脂肪测定 。 异戊醇质地不纯 , 在加入硫酸后常会 出 现污点黑点 。 好的异戊醇 , 加入硫酸后应为 浅棕色清液 。 也可用下述简单方法鉴定异戊醇中是否 含有杂质 按盖勃法操作步骤 , 除将水来代 替牛乳外 , 共它均与脂肪测定相同 , 摇匀后 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net , 专题论述 盖勃法测定乳脂肪 让它静置 小时 。 如果在乳脂 卜内上部没有 “ 油层 ” 或 “ 油珠 ” 析出 , 则此异戊醇就可 使用 。 。 盖勃法测定脂肪中 , 一定妥顺着下 列顺序在乳脂计中加 入 硫 酸 、 牛 奶 、 异戊 醇 , 一 切不可顺序颠倒 , 否则就得不到测定结 果 。 使 川的硫酸浓度比较大 , 在操作时应特 别注意 , 以防吸入嘴中或发生意外事故 , 为 了避免事故发生 , 采用了硫酸自动定量瓶和 异戊醇 自动定量瓶 。 比重 的硫 酸 放在 类似分液漏斗的硫酸定量瓶中 , 旋转塞子 度 , 即得 硫酸 。 同样 , 旋转异戊醇的定 量瓶塞 度 , 即得 异戊醉 。 离心因索 盖勃法测定时 , 对离心机 的要求是 离 心因素 。 离 合因索的物理意义是 , 单位质量的物 体在离心机 , , , 所受的离心力等于重力的多 少倍 。 即 此式符号的意义和单位同前 , 可川于确定应 采用的离心机规格。 例 离心机的旋转半径 , 问盖勃 法测定时转速应为多少 。 解 盖勃法测定应取 二 旋转半径 。· ‘ , 卜 、 了 午份迷 一 一 — ‘ ”一 ’ 。 一 一息面一 一 ’ 。 只 。 转 分 三 、 乳脂计的分类 式 , , 一一离心因索 —向心加速度 ““ —重力加速度 , 。 。 —旋转物的质量 , 向心加速度 “ , 由旋转半径和转速 所决 定 。 因此 , 由 式可看出 , 离心因素是 由旋转 半径和转速决定的 。 向心加速度 兀 孟 式中 —旋转半径 , —转速 , 转 山此得出离心因索和转速 、 半径的关系 式 一 一 翌器生 “ · 命 丁简化为 二 按刻度划分 乳脂计 , 其中分成 等分 , 每 等分为 , 最小间隔为 。 乳脂计最大刻度进 , 其中分成 等分 , 每 等分为 , 最小等分 。 乳脂计最大刻度 , 其中分成 等分 , 侮 等分为 , 最小等分 。 。 , 乳脂计最大刻度 , 其中分成 等分 , 每 等分 , 最小等分 。 乳脂计最大亥, 度 , 其中 无刻度 , 为 等分 , 最小等分 。 乳脂计最大刻度 , 其中分成 等分 , 每 等分 , 最小等分 为 。 乳脂计最大刻度 , 其中分成 了等分 , 每 等分 , 最小等分 。 乳脂计最大刻度 , 其中分成 等分 , 每 等分 , 最小刻度 。 乳脂计最大刻度 , 其中分成 等分 , 每 等分 , 最小刻度 。 乳脂计最大刻度 , 其中 。 无刻度 , 一 分成 等分 , 每 等 分 , 最小刻度。 。 。 按用途划分 测定脱脂乳的乳脂计 , 使用刻度 范围为 , 理 、 写的乳脂计 。 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 中 卤 乳 品 工 业 第 卷第 期 测定牛乳的乳脂计 , 使用刻度范 围为 的乳脂计 。 测定奶粉的乳脂计 , 使用刻度范 围为 的乳脂计 。 测定冰淇淋的乳脂计 , 使用刻度 范围为 的乳脂计 。 测定稀奶油的乳脂计 , 使用刻度 范围为 的乳脂计 。 测定奶油的乳脂计 , 使用刻度范 围为 , 牙。 的乳脂计 。 测定干酪的乳脂计 , 使用刻度范 围为 的乳脂计 。 每一大格的容积 二 后 一 前 为汞的比重 刻度 一 格容积 。 一 。 。 格容积 。 。 一 。 。 。 格容积 。 一 。 。 四 、 盖勃法乳脂计的标定 。 注 中国国家标准 中 规 定 , 误 差 范 围 。 士 。 在美国一般要求的误差范围是 , 大 格的总容积误差不超过 。 , 即每一大格 要求容积范围为 土 标定乳脂计首先要知道乳脂计每 大格的标准容积是多少 。 由于盖勃法测定的脂肪结果有一定的偏 差 , 近期对乳样的吸管进行了改进 , 但在乳 脂计的刻度部分的容积还是按传统划分 , 如 牛乳脂计的刻度范围是 。 每 大 格 为 一 。 用 吸管 , 牛乳 比重 。 , 牛乳的 重量 , 理论上为 克 。 在刻度范围部分的脂肪量应 为 。 克 在刻度部分的脂肪毫升数为 。 为 ℃时脂肪比重 。 刻度 在 。 含有 脂肪 。 每 格容积 。 标定使用的物质 , 应在常温下不易 挥发 , 且不能沾玻璃壁 。 根据此条件 , 选用 了汞 。 汞 的比重在 ℃时 。 例 将汞装入乳脂计至刻度 , 称 重 为 克 , 记下重量 。 再装入汞至一大格 , 刻度 , 重量为 克 。 以此 类 推 , 直到 刻度 。为止 。 计算每一大格的容积 , 计 算 如 下。 五 、 乳吸管容积的确定 盖勃法的精确 度 重 现 性 很 好 。 一 般 , 重复测定的数值 , 偏差应在土 脂肪 绝对值 之 内 而且 , 对 测定值 , 偏 差在士 脂肪 以内 。 但是 , 盖勃法的准确 度问题 , 经许多人的研究 , 已经一致认为 , 用该法测定天然乳 即测定范围在天然乳变 动范围内 , 测定结果 , 较罗兹 —哥特里法偏高 , 偏高之值 , 共同的意见 , 是脂肪含量的 左右 指相对误差 。 按盖勃创始该法时 , 是使乳脂计每大格 之刻度为 , 此体积之乳脂肪 , 其 重 量恰为吸牛奶 重量的 。 看来 盖 勃法的这种重量配合不是十分正确的 , 因此 导致结果的偏高 。 为了使容积法既能保持它 原有的优点 , 又能达到重量法的准呻度 , 途 径有三 一是改变乳脂计的刻度 , 即在原来 毫升的基础上放大 一些 , 这样可使读出的读 数不再偏高 。 此法在法国有人赞成 , 但实际 难以采用这个 。 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net , 场 专题论述 盖勃法测定乳脂肪 班 二是通过盖勃法与哥特里一罗兹法之间 的关系等式 , 使偏高的读数得以修正 。 以下介绍改变盖勃法偏高的可能性 。 年荷兰乳品研究所和农业大学的乳 品实验室的 和 · 作 出 了盖勃法的校正值 , 该式是使用释放容积为 的吸管作出的 。 下面是他们建 立 的 盖 勃法与哥特里一罗兹法之间的关系式 。 一 。 式中 用 吸管的盖勃法所测得 的脂肪含量 二 罗兹一哥特里法所测得 的 脂 肪含量 通过以 上等式可求出盖勃法 的 正 确 含 量 , 但此法计算太费时间。 如通过此等式代入一些数 , 可计算出一 个表 , 比计算更方便些 。 由上式可知 , 盖勃法的结果亦不总是偏 高 , 在脂肪含量低时要偏低 。 这点在下面要 讨论到。 三是采用减少取样奶量 , 亦即修改吸管 容积的方案 。 此法简单易行 。 所以 , 修改吸 管容积 , 减少取样乳量的方案乃是最优的盖 勃法改进方案 。 五十年代以来 , 各国相继采 甩新的吸管容积 。 几个国家规定乳吸管的定 量如下 荷 兰 年确定为 毫升 西 德 年确定为 。 士 , 毫升 苏 联 年确定为 毫升 丹 麦 毫升 确度间题 , 亦即盖勃法同罗兹一哥特里法 标 准法 的偏差问题 。 盖勃法 常简写为 “ ” 和罗兹一哥特 里法 常简写为 之间的偏差 , 实 际 上 是一种系统偏差 , 它是一种复杂 的 对 真 值 假设 法测定值为真值 的 偏 差 。 上面 已说过 , 在天然乳含脂率或含脂率高的情况 下 , 盖勃法是偏高的 但在含脂率低的情况 下 , 盖勃法测定值是偏低的 。 现在我们就来 讨论一 ’ 下产生这种偏差的原因 。 早在 年荷兰 的 · 和 · 时 就讨论 过乳脂计脂肪柱弯月面脂 肪容积 , 以及酸液层中存在脂肪的间题。 年 , 荷兰 的 · 取 提 出乳脂 计有关偏差 问题 , 从而揭示了这种系统偏差 的本质 。 他提出 , 如果在牛乳含脂 率 的情况下 , 乳脂计脂肪柱的重量正好为乳样 重的 , 那么 , 在其他刻度的情 况 下 , 就必然会出现偏差 。 这种偏差的引起 , 是由 于脂肪柱弯月面中脂肪量相 当 于 脂 肪 , 而在酸液 水相 中的 脂 肪 又 相当于 刀旨肪 。 于是便出现 了 不 同 情 况 , 示 例如 图 如乳脂真实含脂率 , 而 读 出的读数也是 。 这就意味着 在刻度部分中的脂肪 在水相中的脂肪 在弯月而中的脂肪 。‘ 真实脂肪含量 显示读数 读数与真实数相等 , 偏差 仆 而为使偏差 , 必须使这时的 脂 肪柱 六 、 乳吸管容积和盖勃法的 准确度 自盖勃在 年制订了本测定法以来 , 这种方法的准确度经过了许多人的研究 。 五 十年代将乳吸管改为 , 是提 高准确度的一个重要步骤 。 所谓盖勃法的准 的重量只有真实值的。 。 号指会· 。 ·。 而在读数为零时 , 如图 在脂肪柱中的脂肪 在弯月面中的脂肪 ‘ 在水相中的脂肪 。 真实脂肪含量 。 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 幻 中 国 乳 品 工 业 第 卷第 期 显示读数 读数比真实数小 , 偏差 二 尸 真实脂肪含量 显示读数 读数比真实数低 , 。 。 偏差 一 周周周旦亘亘 图图图 【【 三三 尽 图图图 图图图 图 图 图 月 在全量程刻度 时 , 如读 出 刻 度为 , 此时实际脂肪柱重量 , · 只 有 读数 时的两倍 刻度管是这样 刻 出的 , 即 在脂肪柱中的脂肪含量 弯液面中的脂肪 , 在水相中的脂肪 真实脂 , 含量 二 显示读数 即 , 读数 比真实数大 , 偏差 , 在读臀值低于 · 时 , 也 可 举 一例 。 如 在脂肪柱中脂肪含量 在弯液面中的脂肪 在水相中的脂肪 由上述可 见 , 只 要 使 孔 脂 计 刻 度在 处出现偏差 , 那么在测定值高于 时 , 盖勃法总要出现正偏差 偏高 而在 测定值低于 时 , 要 出 现 负偏 差 偏 低 。 荷兰 和 · 的研究进一 步对此作了说明 。 他们在 年发表的 中提到 用释放乳样 毫升的吸管 , 准确地 用盖勃法测定乳样 , 并与罗兹一哥特里方法 做了比较 , 结果得出图 。 勺图 得出一个方程 。 一 。 式中 为盖勃法含脂率 , 为罗兹一哥 特里法含脂率 。 山这式可 以得出两点结论 , 一是 , 盖勃 法的偏差随含脂率不同而异 。 二是 , 只有在 官脂率 时 , 经典盖勃法的测定值与罗 © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 一 专题 论述 盖勃法测定乳月旨肪 经典盖粉减阅, 盆一于替里滋仲关录 成 介 斗 群 件留咖嵌翔每甲翎叭 , 万 矛尤 窝 不尤 岁另 盖粉践帕李 图 兹一哥特里法相符 用含脂牢 代入上 式便知 。 这两位作者继续了他们 的研究 , 以便在 盖勃法存在系统偏差的情况下 , 找寻一种在 乳样含脂率 左右时 当时荷兰的乳样 平均含脂率 , 盖勃法偏差为零的条件 。 为此 , 他们用不同容量的乳样 相当于 不同的乳吸管容积做实验 测出两种方法的 偏差 , 如下表 吸 管 偏差 盖勃 一 罗兹一哥特里 二 。 一 。 一 。 十 。 。 。 。 。 。 。 。 。吐 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 。 峨 。 。 。 。 一一一 ﹄﹃︸︸︸︸﹄一︸﹄ © 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 中 国 乳 品 工 第 卷第 期 由表看出 , 只有在吸管容积 时 , 出现零偏差的含脂率为 。 因此作者提 出 , 选择 作为荷兰 的盖勃法吸管 。 此时 , 测定 含脂率奶时 , 不会出现偏 差 。 如果使用这种 毫升的吸 管 , 在 乳 样脂肪含量在 到 的时候 , 盖勃法 和罗兹一哥特里法之 间的偏差 , 将不会超过 士 的脂肪读数 。 这点由上表可查出 。 这说明新的方案对天然乳测定是 非 常 准 确 的 。 如果测定值距 较远 , 两种方法之 间的偏差就较大 , 就可 以使用 和 在乳脂计上 的 脂 肪 读 数 脂肪含量校正数 脂肪 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 。 一 。 提出的校正表 , 校正盖勃法测定 结果 。 综合 述 , 可得到几点结论 如用释放乳量 吸管 , 盖勃法对 罗兹一哥特里法的偏差较大 , 其关系式为 。 一 。 此时只有脂肪测定值在 时 , 二者 之间偏差为零 。 如果释放乳量为 毫升的吸管 , 盖勃法和罗兹一哥特里法 之 间 , 在 含 脂率 时偏差为零 。 因此 , 这种方案适合于 现有西欧国家天然乳的测定 。 但是即使采用 毫升的吸管 , 由于乳脂计弯月面的脂肪量和酸液中所含脂 肪量 , 使盖勃法和罗兹一哥特里法之间仍然 存在着系统偏差 。 这时 , 如脂肪含量在 之间偏差值不大于士 脂肪读 数 。 如脂肪含量距 更远 , 可使用本处 提出的校正表 , 使盖勃法的测定结果得到校 正 。 参 考 资 料 一 。 〔 〕 众 刀 。 。 一 于 。 · · 主题词 盖勃法 乳脂肪 测定 郁蕴华编译 黄渔权校 收稿 日期 年 月 日 月了八匕一才任八曰,甘﹁“︸︸八 ⋯⋯ ︺八﹁︸八八八十十十 ,︼月任比几八八八 ⋯ 八八”﹄ 一一一一一 上接 页 酸奶 产品是由嗜酸性乳酸杆菌作为菌种并 加有增香乳糖水解酶而发酵的搅拌型酸奶 。 乳和乳制品的研究在芬兰已经有了悠久 的历史 , 但研究范围十分狭窄 , 研究工作主 要集中在必需解决的技术问题上 , 有关基础 研究 比较少 , 在奶业技术方面而临着新的挑 战是基因工程技术的利用和有 关 营 养 方面 的压力 。 收稿 日期一、 年 月 日