高效液相色谱法同时测定头孢呋辛钠和更昔洛韦的含量

· 药 物 研 究 · 中国药物 与临床 2009年 1O月第 9卷第 lO期 Chinese Remedies&Clinics，October 2009,Vo1．9，No．10 高效液相色谱法同时测定头孢呋辛钠 和更昔洛韦的含量 邱 枫 肇丽梅 刘晓东 何晓静 头孢呋辛(cefuroxime)是半合成的第二代头孢菌素，药用 为头孢呋辛的钠盐。头孢呋辛钠抗革兰阴性杆菌活性强于第 一 代头孢菌素，抗革兰阳性球菌的活性强于第=三代头孢菌 素。临床适用于呼吸、泌尿生殖、皮肤等系统感染。更昔洛韦 (gancilovir)是核苷类抗病毒药物，其抗病毒作用与阿昔洛韦 相似。对艾滋病患者的巨细胞病毒甚至更强[1]。在临床应用时 有将头孢呋辛钠和更昔洛韦同时配伍使用．本文建立同时测 定两药含量的高效液相色谱法(HPLC)．便于考察两者配伍稳 定性。为临床合理用药提供依据。 1 仪器与材料 HPI 100系列高效液相色谱仪(美国安捷伦科技公司)。 头孢呋辛钠品(丽珠制药厂，含量 94．8％)，更昔洛韦 标准品(天津药业集团新郑股份有限公司，含量99．5％)；乙腈 (色谱纯)，磷酸二氢钾(分析纯)，二重蒸馏水(中国医科大学 附属盛京医院)。 2 方法与结果 2．1 分析测定方法 2．I．1 溶液的配制：①标准品储备液的制备：精密称取头孢呋 辛钠标准品 1000 mg，置 100 ml容量瓶中，加水定容至刻度， 摇匀 ，即可得浓度为 10 mg／ml的头孢呋辛钠标准品储备液 A；再精密量取头孢呋辛钠标准品储备液A 5 ml，置 lO ml容 量瓶中。加水定容至刻度，摇匀 ，即得浓度为 5 mg／ml的头孢 呋辛钠标准品储备液B。精密称取更昔洛韦标准品9O mg，置 100 ml容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，即得浓度为0．9 m咖 l 的更昔洛韦标准品储备液A：再精密量取更昔洛韦标准品储 备液 A 5 ml，置 10m1容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，即得 浓度为0．45 mg／ml的更昔洛韦标准品储备液B。②混合标准 品溶液的制备：分别精密吸取头孢呋辛钠标准品储备液A和 更昔洛韦标准品储备液A各 5 m1，置同一 1O ml容量瓶中， 加水定容至刻度，摇匀，即得含头孢呋辛钠5 mg／ml和更昔洛 韦0．45 mg／m]的混合标准品溶液。 2．1．2 色谱条件：色谱柱Diamonsil Cl8色谱柱 (150 mmx4．6 mm，5‘Lm)；流动相：A(乙腈)，B(0．01 mol／L磷酸二氢钾，用 磷酸调pH=3．5～4)．二元梯度洗脱，梯度洗脱条件为：0~3．5 min：VA／VB=5／95；3．5～4．5 min：VA／VB=5／95— 28厂72；4．5~10 min：VA／VB=28／'／2；10-11 min：VA／VB=28／72---~5／95，洗脱流速为 作者单位 ：l10004沈阳，中国医科大学附属盛京医院药学部 通信作者：肇丽梅。Email：zhaolm@sj—hospita1．org 1．0 ml／min，紫外波长为 252 nm，柱温为 30~C。在此色谱 条件下 ，取 5 l(标准品溶液取 1-10 1)进行 HPLC分析，样 品中各成分分离度良好，空白样品对头孢呋辛钠和更昔洛韦 测定无干扰，头孢呋辛钠和更昔洛韦的保留时间分别为8．99 和 3．10min。 2．2 方法学评价 2．2．1 线性关系考察 ：分别精密吸取新制头孢呋辛钠标准品 储备液 B和更昔洛韦标准品储备液 B 1．0，2．0，4．0，6．0，8．0， 10．0 Ixl注入高效液相色谱仪中。按照“色谱条件”项下测定峰 面积，以峰面积为纵坐标，标准品的进样量( g)为横坐标，绘 制标准曲线，得标准曲线分别为：C=1524．2,4+966．7(r=O．9998． 头孢呋辛钠)；C=3120．8_4+69．509(r=1．000，更昔洛韦)。表明 头孢呋辛钠在 5．0—50．0 txg范围内、更昔洛韦在 0．45—4．5 txg 范围内与其峰面积呈良好的线性关系。 2．2．2 精密度试验：精密吸取新制混合标准品溶液5 ，连 续进样 5次，按“色谱条件”项下测定峰面积．结果头孢呋辛 钠峰面积平均值为 39 710．6，RSD=I．3％，更昔洛韦峰面积平 均值为 7035．0，RSD=O，19％。 2．2．3 重现性试验：按“混合标准品溶液的制备”项下方法新 制混合标准品溶液 5份，按“色谱条件”项下测定峰面积(进 样量 5 txL)，结果头孢呋辛钠平均含量为 5．09 mgC,,a，RSD= 2．4％．更昔洛韦平均含量为0．46 mg／ml，RSD=2．2％。 2．2．4 加样回收率试验：分别精密量取 5．0 ml已知浓度标准 品溶液各 9份于 l0 ml容量瓶中 (头孢呋辛钠的标准品溶液 含量为 5．02 m咖 l，更昔洛韦的标准品溶液含量为 0．45 msh~1)， 分别加头孢呋辛钠标准品储备液 A 3．0、2．5、2．0 ml和更昔洛 韦标准品储备液 A 3．0、2．5、2．0 m1．每个浓度 3份，用水稀释 至刻度，摇匀。按“色谱条件”项下测定头孢呋辛钠的平均回 收率100．9％，更昔洛韦的平均回收率为 100．8％，结果见表 1。 2．2．5 稳定性试验：精密吸取头孢呋辛钠标准品储备液B、更 昔洛韦标准品储备液B和混合标准品溶液 5 l，分别在制备 后0、1、2、4 h按“色谱条件”项下测定峰面积，由标准曲线计 算含量，结果表明更昔洛韦单独配制和混合配制是在4 h稳 定，头孢呋辛钠单独配制时稳定。头孢呋辛钠混合配制后略 有降解，0—1 h降解 3．3％．1～2 h降解2．4％．2 h降解 3．2％ (每小时降解 1．6％)。 3 讨 论 中国药物与临床2009年10月第9卷第 l0期Chinese Remedies& Iinic—s,October 200—9,Vo1．9,No．10 表 l 加样回收率试验(n：3) · 963 · 表 2 头孢呋辛钠与更昔洛韦配制后 0-4 h含量变化 头孢呋辛钠和更昔洛韦单独测定已有很多报道_l_ ，但是 同时测定两者国内罕见。本试验基于两者单独测定的诸多方 法，对其进行改进 ，用梯度洗脱将头孢呋辛钠和更昔洛韦同 时测定 ，该方法简便 、准确、灵敏，分析周期短，可以适用于头 孢呋辛钠和更昔洛韦配伍稳定性考察等临床用药研究。实验 中发现头孢呋辛钠和更昔洛韦在单一溶液中都很稳定，但是 混合溶液中头孢呋辛钠在配制0～4 h后均有降解，建议用该 方法时，用单一溶液建立标准，混合溶液要现配现用。实验结 果提示两者不适时配伍使用。 参 考 文 献 1 郭丹．陈娜娜，杨西晓，等．注射用头孢呋辛钠的HPCE测定．中 国医药工业杂志，2004，35(8)：480—481． 2 毛建新，杨卫．马锦星．HPLC测定注射用更昔洛韦的含量．中国 医药导报 ，2007，4(6)：1 19． 3 常珍，曹桂芳 ，高雷，等．更昔洛韦含量及有关物质的 HPLC测 定．药物分析杂志，2005，25(9)：1058—1060． (收稿 日期 ：2009—05—04) 顺铂明胶微球体夕卜释药特性考察 王亚夫 顺氯氨铂简称顺铂(CDDP)。是临床应用广泛的抗肿瘤药 物，主要用于肺癌、膀胱癌、前列腺癌 、乳腺癌、恶性淋巴癌和 白血病等⋯．但其不良反应较大．特别是胃肠反应、肾毒性及 骨髓抑制等，其中尤以。肾毒性最严重 。影响了癌症的治疗效 果。近年来各国通过制备微球来解决这个问题 ]。载药微球浓 聚于靶部位 、保持或提高抗癌活性，同时可减少药物在其他 脏器的分布，因而减少了毒副作用。 微球 (microsphere)是用药用高分子材料作为载体 ，将药 物分散或吸附于其中而制成的球型或类球型微球，微球粒径 一 般在 1 300 I．Lm。药物制成微球后主要特点是缓释性和靶 向性 ：在体内微球中药物的释放依赖于微球的降解，使药物 缓慢释放 ，达到长效的目的；微球在体内特异性分布是基于 微球的大小，>30 m以上的可直接动脉栓塞，使抗癌药物于 病灶部位具有较高浓度，大大提高药物的疗效，降低毒副作 用嘲。此外．微球为固化实体微粒，其稳定性较脂质 、微乳、 作者单位：030001太原，山西医科大学第二医院药剂科 复乳等微粒体系好 ，易实现商品化生产 ，微球用于血管栓塞 已逐渐成为微粒热门课题 。本文考察了载药明胶微球的体 外释药特性及其释放机制。 1 材料与仪器 CDDP(锦州九泰药业有限责任公司，041201)；CDDP明 胶微球(自制)；Visking透析袋(美国)；氯化镍(天津市光复 精细化工研究所，分析纯)；二乙基硫代氨基甲酸钠(天津市 光复精细化工研究所，20030520)；其他普通试剂均为国产分 析纯。 ． HH—s水浴锅(巩义市英予峪华仪器厂)；TG328A电子 天平(湘仪电子仪器厂)；HY一2调速多用震荡器(江苏中大 仪器厂)；DZF--6021真空干燥箱(上海恒科化学仪器有限公 司)；wH—s溶出试验仪 (上海黄海药检仪器厂)；UV--752 紫外分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；多功能搅拌 机(顺德市科顺电器有限公司)。 2 方法与结果