细菌、霉菌及酵母菌计数操作规程

细菌、霉菌及酵母菌计数 1. 目的 本规程旨在为微生物计数提供一个标准化方法。 2. 适用范围 微生物 3. 责任者 QC主管生测员 4. 安全注意事项 严格无菌操作，防止微生物污染。 5. 规程 a(平皿菌落计数法:取供试液各1ml，加入90mm的平皿中，每个稀释度各2个平皿。每个平皿加15-20ml已融化并冷至45?的培养基(细菌用营养琼脂培养基，霉菌和酵母菌用玫瑰红钠琼脂培养基)，快速摇匀，待凝后，倒置进行培养。同时各做一个空白对照。 b(薄膜过滤法:取相当于1mL供试品的供试液，加至适量的稀释级中，混匀，用pH7.0蛋白胨-氯化钠无菌缓冲溶液冲洗滤膜，冲洗时应注意保持供试品的溶剂及冲洗液覆盖整个滤膜面。冲洗量不宜过大，每张滤膜每次冲洗量约为100mL，取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基上。同时做一个空白对照。 c(培养: 细菌30-35?培养3天，计菌落数; 霉菌、酵母菌25-28?培养5天，计菌落数; 空白对照应无菌生长。必要时延长培养时间为7天 6(结果判断 细菌、酵母菌宜选取平均菌落数小于300cfu，霉菌宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告(取两位有效数字)的依据，以最高的平均菌落数乘以稀释倍数的值报告1mL供试品中所含的菌数。 7. 附表及附录 附录1:细菌、霉菌及酵母菌计数报告 8. 制定依据 1 参照《中华人民共和国药典》2010版第二部细菌、霉菌及酵母菌计数(附录XI J)微生物限度标准，和GB/T14233.2医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分生物学试验方法。 附录1:细菌、霉菌及酵母菌计数报告 2 供试品 产品批号 取样量 取样时间 检验依据 检验日期 检测人 复核人 检测项目 菌种 检测结果(CFU/mL) 是否合格 细菌 微生物 霉菌 酵母菌 3