平性药蒲黄、银杏叶活血化瘀作用的实验研究（可编辑）

平性药蒲黄、银杏叶活血化瘀作用的实验研究（可编辑） 平性药蒲黄、银杏叶活血化瘀作用的实验研究 学校代码:10600 学 号:061059广 西 中 医 学 院 硕 士 学 位 论 文平性药蒲黄 、银 杏叶 活血化瘀 作用的 实验 研究 究 生: 毛 健 研 导师: 郑作文 教授 院 系 ( 部 所 ) : 药学院 专业: 药理学 究 方 向 : 中药药理 研 完 成 日 期 : 2009 年 5 月 28 日 目 录 目 录 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????????????? 1 主要英文 缩略 词 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 4 中文摘 要 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????????????? 6 英文摘 要 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????????????? 8 引 言 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 11 正 文 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 13 第一部分 蒲黄、 银杏叶 对瘀热 互结证 动 物的影 响 ??????????????????????? 13 1. 对微循环的观 测???????????????????????????????? ???????????????????????????????? 13 1.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 13 1.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 13 1.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 14 2. 对血液流变学的检 测 ???????????????????????????????? ????????????????????????? 14 2.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 14 2.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 15 2.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 15 3. 对血流动力学观 测 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 20 3.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 20 3.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 20 3.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 21 4. 对相关活性物质的 检 测 ???????????????????????????????? ?????????????????????? 31 4.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 31 4.1.1 受试药 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 31 4.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 32 4.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 32 第二部分 蒲黄、 银杏叶 对正常 动物的 影 响 ???????????????????????????????? 36 第 1 页 1. 对微循环的观 测???????????????????????????????? ???????????????????????????????? 36 1.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 36 1.1.1 受试药 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 36 1.1.2 主要试 剂 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 36 1.1.3 主要仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 36 1.1.4 实验动 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 36 1.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 36 1.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 36 2. 对血液流变学的检 测 ???????????????????????????????? ????????????????????????? 37 2.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 37 2.1.1 受试药 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 37 2.1.2 主要试 剂 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 37 2.1.3 主要仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 37 2.1.4 实验动 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 38 2.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 38 2.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 38 3. 对血流动力学观 测 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 43 3.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 43 3.1.1 受试药 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 43 3.1.2 主要试 剂 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 43 3.1.3 主要仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 43 3.1.4 实验动 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 43 3.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 43 3.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 44 4. 对相关活性物质的 检 ?????????????????????? 47 测 ???????????????????????????????? 4.1 实验材料与主要 仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 47 4.1.1 受试药 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 47 第 2 页 4.1.2 主要试 剂 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 47 4.1.3 主要仪 器 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 48 4.1.4 实验动 物 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 48 4.2 实验方 法 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 48 4.3 实验结 果 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ??????? 48 第三部分 讨 论 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????? 52 1. 有关平性 药 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ?????? 52 2. 有关血瘀及血瘀 证 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 54 3. 有关内毒素和造 模 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 56 4. 血瘀证的本质 现 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 62 5. 蒲黄、银杏叶及活 血化瘀 药的作 用 ???????????????????????????????? ??????? 63 6. 对瘀热互结证大鼠 的影 响 ???????????????????????????????? ??????????????????? 65 6.1 对微循环的影 响 ???????????????????????????????? ?????????????????????????????? 65 6.2 对血液流变学的 影 响 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 67 6.3 对血流动力学的 影 响 ???????????????????????????????? ???????????????????????? 72 6.4 对相关活性物质 的影 响 ???????????????????????????????? ????????????????????? 75 7. 对正常大鼠的影 响 ???????????????????????????????? ???????????????????????????? 81 8. 蒲黄和银杏叶对瘀 热互结 证大鼠 的适 用 性 ?????????????????????????????? 81 结 论 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 82 研究展 望 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 82 参考文 献 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 83 附 录 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 89 综 ?????? 述 ???????????????????????????????? ??????????????????????????????????????? 93 致 谢 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ????????????? 99 攻读学位 期间发 表的学 术论文 目 录 ???????????????????????????????? ?????????? 100 广西 中医 学院研 究生学 位论文 作者声 明 ???????????????????????????????? ???? 100 个人简 历 ???????????????????????????????? ???????????????????????????????? ???????????? 101 第 3 页 主 要英文缩 略词 英 文 缩写 英 文 全称 中 文 全称 LPS lipopolysaccharide 脂多糖( 内毒素 ) ADP adenosine diphosphate 二磷酸腺 苷 5-HT 5-hydroxytryptamineserotonin 5-羟色胺 血清素 cAMP cyclic adenosine monophosphate 环磷酸腺 苷 cGMP cyclic guanosine monophosphate 环磷酸鸟 苷 ET Endothelin 内皮素 NO nitric oxide 一氧化氮 EDTA-Na disodium ethylene diamine tetraace- 乙二胺四 乙酸二 钠 2 tic acid 时间 PT prothrombin time 凝血酶原 APTT activated partial thromboplastin time 活化部分 凝血活 酶时间 FIB fibrinogen 纤维蛋白 原 TT thrombin time 凝血酶时 间 D-Galn D-galactosamine hydrochloride D-盐酸 氨 基半乳 糖 胺 HR heart rate 心率 SP systolic arterial pressure 动脉收缩 压 DP diastolic arterial pressure 动脉舒张 压 AP average arterial pressure 动脉平均 压 LVSP left ventricular systolic pressure 左心室收 缩压 LVDP left ventricular diastolic pressure 左心室舒 张压 LVAP left ventricular average pressure 左心室平 均压 LVEDP left ventricular end-diastolic pressure 左心室终 末舒张 压 dp/dtm dp/dt 左室内压 最大上 升速率 第 4 页 t-dp/dtm t-dp/dtm 左 心 室 开 始 收 缩 至 内 dp/dtm 的间隔时 间 -dp/dtm -dp/dtm 左心室内 压最大 下降速 率 Vpm velocity practical imum 左 心室 心 肌 纤 维收 缩 成 分 实测 缩短速度 最大值 V velocity imum 左 心室 心 肌 纤 维收 缩 成 分 零负 荷时的缩 短速度 最大值 V velocity 40 左心室内 压力 为 40mmHg 时心 40 肌纤维收 缩成分 缩短速 度 左心室压 力下降 时间常 数 T time 第 5 页 中 文 摘 要 目 的: 研究 平性 药 蒲黄 、银杏叶对 瘀热互结证 大鼠 活血化瘀作用 和对 正常 动物 的活 血作用 及 可能 的 作用 机制 。 方 法: 观察蒲 黄 和银杏 叶对注射 LPS 复制的 瘀 热互结证 动物 活 血化瘀 作用 和正 常动 物 的 活血作用:1. 对微循 环的 影响 :利 用微 循 环仪 直接 观 察大 鼠肠系膜微血管,观测微循环血流流速 、微血管管径、毛细血管网交点 计数 等指 标。2. 对血流 动 力学 的影 响: 大鼠 心室 插管 、 股动 脉插 管 ,利 用 BL-410 生 物机能 实验系 统, 记 录测定 左心室压 力、 左室舒 张末期 压血 压、 心率 等多 项 血流 动力 学 模块 实验 参 数。3. 对血 液 流变 学的 影 响:大 [1] 鼠腹主动 脉取血, 仪器法 检测全血 粘 度、 血浆粘 度、 红细 胞压积、 红 细 胞 电泳、红细胞聚集指数、红细胞刚性 指数、红细胞变形指数、纤维蛋 等各项 血液流 变学指 标。 4. 对相关活性 物质含 量及水 平白原含量 的影 响: 动脉取 血, 用放射 免疫法 、 酶联 免疫法检测 ADP 、 5-HT 、 大鼠腹主 cAMP 、 cGMP 、ET 、NO 等 相关 活 性物质 含量。 结 果: 1. 平性药 蒲黄、银杏 叶对瘀 热互结 证动 物的 活血 化瘀作 用 : 与 正常组 比较 , 模型组 微血流 速度降 低 (P0.01 ) , 毛 细血管 网交点 计数减少 (P0.01)。 与 模型组 比较, 蒲 黄、银杏 叶可提 高微血 流速度 、 增加网交 数(P0.01)。 与正常组 比较, 模型组的 SP 、AP 、LVSP 、LVAP 、dp/dtm 、-dp/dtm 降低 (P0.05 或 0.01)。 与模 型组比 较, 蒲黄可使 LPS 所 致的 AP 、LVSP 、 LVAP 、 dp/dtm 、 -dp/dtm 降 低升 高 (P0.05 ) ; 银 杏叶可使 LPS 所 致的 LVSP 降低升高 (P0.01)。 与正常组 比较 , 模型 组的 cAMP/cGMP 比值 升高 、ADP 、5-HT 含量 第 6 页 升高 (P0.01)。与模型 组比较 ,蒲黄 高 低剂量组的 ADP 、5-HT 含量 降 低(P0.01) ; 银杏叶 高 低组 cAMP/cGMP 比值、ADP 降 低(P0.01)。 2 蒲黄、 银杏叶 对正常 动物 的 影响 与正常组 比较, 蒲黄可 提高微 血流速 度 、增加网 交数 (P0.05 ) 。 与正常组 比较 , 蒲黄 可提高 dp/dtm 、-dp/dtm 、Vpm (P0.05 ) ; 银杏 V (P0.05 ) 。 叶可升高 40 正常 组 比 较, 蒲 黄 可降低 5-HT 含量 (P0.01 ) ; 银杏 叶 可 降与 低 ET/NO 比值 (P0.05 ) 、降低 5-HT 含量 (P0.01) 。 结 论: 平性药 蒲黄、银杏叶 体 现 出 与 寒 性 对 照 药 大 黄 相似的作用, 均能改 善瘀 热互结证 大鼠微循环障碍,提高心 功能,在 瘀热互结证 的条件下, 显现中药寒性药性的特征。平性药蒲黄 、银杏叶对正常大鼠具有一 定的 活血作用 。 关键 词 : 平性药 ;蒲黄 ; 银杏 叶 ; 瘀 热互结证 第 7 页 英 文 摘 要 Research on nature of gentle property drug and scientific con- notation of regulating body balance :experimental study on ef- fect of promoting blood circulation and dissolving stasis of Pol- len Typhae and Folium Ginkgo ABSTRACT Objective: To study the promoting blood circulation and dissolving stasis effect of Pollen Typhae and Folium Ginkgo which belong to gentle property drugs on the hot blood stasis rats and the promoting blood circulation effect on the normal ones, and the possible related mechanismsMethods: The promoting blood circulation and dissolving stasis effect of Pollen Typhae and Folium Ginkgo on the hot blood stasis rat models which were replicated by injecting LPS and the promoting blood circulation effect on the normal rats was observed: 1. Impact on microcirculation: Rat mesenteric mi- crovessels were observated directly by using the microcirculation intrument to measure the blood flow velocity of microcirculation, microvessel diameter, junction of capillary network counts. 2. On hemodynamics: Experimental parameters of hemodynamic module were recorded such as left ventricular pressure, left ventricular end-diastolic blood pressure, heart rate etc. by using the biological function experimental system BL-410 after rat ventricular can- nulation and femoral artery cannulation. 3. On hemorheology: Hemorheolo- gy indexes of rat abdominal aortic blood such as whole blood viscosity, plas- ma viscosity, hematocrit, erythrocyte electrophoresis, erythrocyte aggregation index, erythrocyte rigidity index, erythrocyte deformability index, fibrinogen content level were detected by using blood viscosity instrument and coag- ulometer. 4. On the relevant active substances content or level: Radioim- 第 8 页 munoassay or enzyme-linked immunosorbent assay was conducted to detect ADP, 5-HT, cAMP, cGMP, ET, NO and other related active substance content of rat abdominal aortic bloodResults: 1. The promoting blood circulation and dissolving stasis effect of Pollen Typhae and Folium Ginkgo on the hot blood stasis rats: Compared with normal group, the microvascular blood flow velocity of model group was lower (P0.01 )and junction of capillary network counts of model group was lesser (P0.01 ). Compared with model group, Pollen Typhae and Folium Ginkgo improved microvascular blood flow velocity, in- creased junction of capillary network counts P0.01Compared with normal group, SP ,AP ,LVSP ,LVAP ,dp/dtm ,-dp/dtm of model group was lesser (P0.05 or 0.01 ). Compared with model group, Pollen Typhae increased LPS-induced AP ,LVSP ,LVAP ,dp/dtm ,-dp/dtm reductionP0.05; and Folium Ginkgo increased LPS-induced LVSP reduc- tion P0.01Compared with normal group, cAMP/cGMP ratio and ADP ,5-HT con- tent of of model group were higherP0.01. Compared with model group, ADP ,5-HT of Pollen Typhae high and low dose group were lowerP0.01; ADP content and cAMP/cGMP ratio of Folium Ginkgo high and low dose group were lowerP0.012. Influence of Pollen Typhae and Folium Ginkgo on the normal rats: Compared with normal group, Pollen Typhae improved microvascular blood flow velocity, increased junction of capillary network counts P0.05Compared with normal group, Pollen Typhae increased dp/dtm , -dp/dtm , VpmP0.05 ; Folium Ginkgo increased V40 (P0.05 )Compared with normal group, Pollen Typhae decreased 5-HT content P0.01; Folium Ginkgo decreased ET/NO ratio P0.05 and 5-HT content P0.01Conclusion: 第 9 页 Pollen Typhae and Folium Ginkgo which belong to gentle property drugs can improve the blood microcirculation and enhance the cardiac func- tion of the hot blood stasis rat as the cold drug rhubarb does. In the condition of the hot blood stasis they reflect the similar effects of the cold drug and show the same nature to the hot blood stasis. Pollen Typhae and Folium Ginkgo have a certain effect of promoting blood circulation Key words : gentle property drug; Pollen Typhae; Folium Ginkgo; hot blood stasis 第 10 页 引 言 课来源 信息如 下: 基金项目 : 国家 重点基 础发展 计划 973 项目名称 :中药 药性理 论相关 基础问 题 研究 课题编号 :2007CB512602 课题名称 :平性 药药性 本质及 其调节 机 体平衡科 学内涵 的 研究 本课题 旨在 研究平性 药蒲黄 、 银 杏 叶 对 瘀 热 互 结 证 大 鼠 活 血 化 瘀 作 用和对 正 常动物 的 活血 作用 及 可能的 作 用机制 。 中药是在中医药理论指导下 认识和使用 的药物。它与天然药物、 民 族药物、草药、西药等最大的区别是具 有中医药理论的指导。其中中药 理论是中药学的重要学术特征。中药药 性理论是中 医 药理论的核心,要 解决中医药的理论问题必须解决中药药 性的理论问题,也就是要解决中 药药性科学内涵的问题。 无 论 是 从 中 药 品 种 的 数 量 上 看 , 或 是 从 多 数 医 家的药性学说,还是其实际上的临床应 用的广泛程度来看, 平性药自古 以来客观存在, 都是一类不容忽视的中 药,就更应该加强对平性药的研 究,其 药性 的研究则是其中一个很重要 的环节。 平 性药的双向适用性 研 究 也正是平性药药性研究的一部分 。 平 性 药 的 双 向 性 也 是 其 药 性 的 其 中 [2] 一个特殊 点 , 其作用从药性 偏性来 说, 依然符合 以偏纠 偏的原 则, 但是 其可能具有双向的纠偏或调节作用, 本 课 题 为 平 性 药 双 向 适 用 特 性 研 究 的一部分,仅选择以蒲黄和银杏叶对 瘀 热 互 结 证 和正常 大鼠的影响及可 能的 活血 化瘀作 用机制 。 血瘀证是一种系统疾病,通 常是指因 血 热 、 气虚、气滞、寒凝等 原 因,导致血瘀而血行不畅,或外伤或各 种急、慢性病导致出血未能及时 消散而引起的病证。分多种证型,其中 寒热两种为对立统一的内环境的 证型。平性药的双向作用是有条件的, 即不 同的内环境条件下其显性不 第 11 页 同。本 课 题选用 注射 LPS 造 成瘀热互 结 证模型来 研究 蒲黄 和银 杏叶对 其 的影响 。 蒲黄 (Pollen Typhae ) 为 香蒲科 植物水 烛 香蒲 (Typha angustifolia L . ) 、 [3] 东方香蒲 (Typha orientalis Presl )或同 属植物的 干燥花 粉 。性味为甘、 平,归肝、心经,具有止血、化瘀、通 淋等功效。其药理作用主要有抗 凝或促凝 (条件 显性) 、 抗实验 性心律 失 常、 保护 急性心 肌缺血 、 抗血 栓、 增加子宫平滑肌条收缩、降血脂、抗高 脂血症所致血管内皮的损伤、镇 痛等作用 。银杏 叶(Folium Ginkgo ) 为 银杏科银 杏属植 物银杏 (Ginkgo biloba L . ) 的 干燥叶, 是常用 的活血 化瘀 药之一。 银 杏叶性 味甘、 苦、 涩、 平。有敛肺、平喘、活血化瘀、止痛 功效 , 主治肺虚咳喘、冠心病、心 绞痛、 高血脂 等症 。 银杏 叶提取 物 (extractum ginkgo siccus ,EGS ) 主治 活血化瘀通络。用于瘀血阻络引起的胸 痹心痛,中风、半身不遂、舌强 [4] 语塞、 冠心 病稳定 型心绞 痛、 脑 梗死见 上述症候 者 。 银杏叶药理作 用主 要是改善心 脑 血管系统、调节血脂、抗 氧化、抗衰老、抗菌消炎、抗病 [5] 毒、抗肿 瘤 、平喘、增强 免疫功 能 等 作用。 目前,国内外尚未见有蒲黄 和银杏叶的 双向适用特性研究的报道 。 本课题 为 平性药双向适用特性研究 的 一 部 分 。 选取蒲黄和银杏叶 作用于 瘀热互结 证模型 大鼠 和 正常大鼠 , 观测 它们对大 鼠微循 环、 血流动 力学、 血液流变学及相关活性物质水平的影响 , 以期求证蒲 黄和银杏叶可以适 用于 瘀热互结证 或对机体功能进行调节 显现出中药 寒 性药性的特征。 为 平性药 双向适用特性研究提供实验依据 并初步探讨其作用机理,同时也 药平性 药的科 学内涵 提供科 学 依据。 为研究中 第 12 页 文 正 第一 部分 蒲 黄、 银杏 叶对 瘀热 互结 证动 物的 影响 1. 对微 循环 的观 测 1.1 实验 材料 与主 要仪 器 1.1.1 受试药物 平性药蒲黄、银杏叶,寒 性 对 照 药 大 黄 制 剂,由 广 西 中 医 学 院 药 剂 教研室 提 供。 1.1.2 主要试剂 LPS Sigma 公司 ,批号 :116K4100 乌拉坦 上海国药 集团化 学试剂 有限公 司,批 号 :20071030 生理盐水 武汉滨湖 双鹤药 业有限 责任公 司,批 号 :070819402 1.1.3 主要仪器 ZL104 型微循 环检测 仪 徐州众联 医疗器 械有限 公司 1.1.4 实验动物 SD 大鼠 ,SPF 级, 雄性 , 体重 300 ?20g , 由昆 明医学 院实验 动物中 心提供, 许可证 号:SCXK (滇)2005-0008 。 1.2 实验 方法 大鼠随机分为正常组,平性 药蒲黄和银 杏叶高、低剂量组,寒性 对 照药大黄组及模型组。蒲黄和银杏叶低 剂量组为临床等效剂量,而各组 高剂量组 为低剂 量组的 5 倍 剂量。灌 胃 给药,模 型组和 正常组 给生理 盐 ,其余 各组分 别 给相 应浓度 的药物 ,1 次/d ,连续 14d ,各 组给药 水 体积 均为 20ml/kg 。 末次药 后肌注 乌拉坦 1.4g/kg 麻醉 ,除正常 组外各 鼠尾静 脉注射 LPS 6mg/kg 造模,90min 后, 沿 大鼠腹中 线作一 切口, 提出盲 肠 端, ?于 37?生 理盐水 恒温浴 槽内, 用 37?生理 盐水湿 润肠系 膜,3min 后微循环检测仪测定 微 血流速度、 微 血 管 管 径 、 毛 细 血 管 网 交 点 计 数 等 [6] 指标 。 计 量资料数据 以x ?s 表示, 两组间 均数 比较 采用 t 检验 ( 方差 不 第 13 页 齐时采用 t 检验 校正公 式 ), 统计软件 SPSS13.0 。 1.3 实验 结果 如 表 1 结 果 所 示, 与 正 常 组 比 较 , 模 型 组 微 血 流 速 度 显 著 降 低 (P0.01 ) , 毛 细 血 管 网 交 点 计 数 显 著 减 少 (P0.01)。 与模型组比较, 平性药蒲 黄和银 杏叶、 寒性对 照药大 黄 均可提高 微血流 速度(P0.01); 蒲黄和银 杏叶、 大 黄 均可 增加网 交数 (P0.01 ) 。 从均 值看, 模 型组小静 脉管 径 较正常组有一定程度的缩小,而 大黄 、 银杏叶 、 蒲黄 较模型组有 扩张小静 脉管 径 的趋势。 和 银 杏 叶 可显著提本实验研究结果表明,与模 型 组 比 较 , 蒲 黄 高 微 血流速度 (P0.01 ) ; 显著 增加毛 细血管 网交点计 数 (P0.01 ) 而改 善毛 细血管充 盈程度 。 x 表 1 对 瘀热 互结 证大鼠 微循 环的 影响 ( ?s ) 2 组别动物数 剂量 (g/kg ) 流速 (μm/s ) 网 交数 ( 个/mm ) 管径 (μm ) 正常组 12 ? 1496.59 ?213.76**3.83 ?0.83** 26.58 ?4.42 模型组 23 ? 593.22 ?321.281.39 ?1.08 23.52 ?4.47 银杏叶高 13 5.50 1458.16 ?277.46** 3.31 ?1.11** 29.31 ?7.65* 银杏叶低 12 1.10 1020.00 ?357.47** 2.92 ?1.68** 26.58 ?5.02 蒲黄高 12 4.001395.59 ?399.33** 3.42 ?1.98** 32.33 ?9.46* 大黄 13 13.501272.77 ?305.17** 3.46 ?1.51** 31.77 ?7.67** 注:与模型 组比较, *P0.05 , **P0.01 。 2. 对血 液流 变学 的检 测 2.1 实验 材料 与主 要仪 器 2.1.1 受试药物 平性药蒲黄、银杏叶,寒性 对照药 大黄 制剂,由 广 西 中 医 学 院 药 剂 教研室 提 供。 主要试剂 2.1.2 LPS Sigma 公司 ,批号 :048K4126 14 页 第 乌拉坦 上海国药 集团化 学试剂 有限公 司, 批号:T20071030 生理盐水 武汉滨湖 双鹤药 业有限 责任公 司,批 号 :080429 2.1.3 主要仪器 LG-R-80A 血液黏 度仪 北京中勤 世帝科 学仪器 公司 SysmexCA50 血凝 仪 SYSMEX. CORPORATION2.1.4 实验动物 SD 大鼠, 清洁 级, 雄性, 体重 250-300g , 由长沙市 开福区 东创实 验 动物科技 服务部 提供, 许可证 号:SCXK(湘 )2006-0001 。 2.2 实验 方法 大鼠 随机分为正常组 , 平 性 药 蒲 黄 和 银 杏 叶 高 、 低 剂 量 组 , 寒 性 对 照药大黄及模型组。蒲黄和银杏叶低剂 量组为 临床等效剂量,高剂量组 为低剂量 组的 5 倍剂 量。灌 胃给药, 模 型组和正 常组给 生理盐 水, 其 余 各 组 分 别 给 相 应 浓 度 的 药 物 ,1 次/d ,连续 14d , 各 组 给 药 体 积 均 为 20ml/kg 。 末 次药后 除正常 组外各 组大鼠 腹腔 注射 LPS 2mg/kg 造模 ,5.5h 后腹腔注 射乌拉坦 1.4g/kg 麻醉, 造 模 ( 即腹腔注射 LPS )6h 后, 腹主 动 脉取血 , 利 用血凝仪 和血液 黏度仪 等仪 器进行全 血黏度 值、 血浆黏 度值、 红细胞压积、全血还原粘度、红细胞聚 集指数、红细胞变形指数、红细 间、 红 细胞刚 性指数、APTT 、PT 、TT 、FIB 等指标 的测定。 胞电泳时 计 量资料 数 据以x ?s 表示,两 组间均 数 比较 采 用 t 检验( 方差不 齐时采 用 t 检验校正 公式 ) ,统计 软件 SPSS13.0 。 2.3 实验 结果 如 表 2 结果所 示,与 正常组 比较,模 型 组的全血 粘度值 (高、 中、 低切) 显著 降低 (P0.05 或 0.01 ) 。 与 模 型组比较 , 各用 药 组相应 血液 流 变学指标 的差异 无统计 学意义 (P0.05)。 如 表 3 结果所 示,与 正常组 比较,模 型 组的 血 浆 黏度值 、红细 胞压 积与 正常 组的差 异无统 计学意 义 (P0.05)。 与模 型组比 较, 各 用药 组 相 应血液流 变学指 标 与模 型组的 差异无 统 计学意义 (P0.05)。 第 15 页 如 表 4 结果所 示,与 正常组 比较,模 型 组的 全血 高、中 切还原 粘 度 显著 降低 (P0.01), 全血 低切还 原粘度 、 红细胞聚 集指数、 红细胞 变形 指