局灶性脑缺血鼠大脑半球含水量及病理变化的实验研究
局灶性脑缺血鼠大脑半球含水量及病理变
化的实验研究
?380?ClfinJ?CoreMed,Ju1.~2001,Vcl21.H
局灶性脑缺血鼠大脑半球含水量及病理变化的实验研究
王詈周,严家川,许红利,高东,姚国恩,陈曼娥
[摘要]目的探讨鼠一侧太脑中动脉桂塞/再灌流(McA/0R)后太脑半球脑承肿形成及病理变化的病生机制.方法
线栓法制作一侧MCA—OR大鼠模型;干湿重法测定双侧大脑半球脑含水量;HE染色观察脑病理变化.结果一侧MCA一
0R后双侧大脑顶叶含水量均有增加,出现不同程度病理改变,病灶侧重于非病灶侧.结论一侧太脑中动脉栓塞/再灌流
后,不仅同侧大脑半球产生脑水肿和病理变化,对侧太脑半球对称部位亦有脑含水量增加和脑组织解剖结构变化其确切机
制有待于进一步研究.
[关键词】脑缺血/再灌流;脑水肿;病理变化;远隔机能障碍
[中图分类号]R7433[文献标识码]A[文章编号]1002—1949(2001)07—0380—02
EzqJerhnentalstudy?dmges0fthe珈啦I腊一.0nt咖andthelmlholal~inb0.hh目lt叩h怖after?emiddle—cerebral—arterial
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chuan,XUHong一,df.帆oyNerudo~”,
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[Abstract]ObjectiveTostudythep~hysidoglealmechanisms0fbrainedema
andpathologicalclla?inbothhenfispheresafter
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怡.MethodmakelocalisckfrIiemodel0fanimalbrainbyu宕onefish—threadtOoccludethe出ME&To
measurethemoisture一~orltentinbrainbythedry/wettechnique,andtoobservethep毗ll0lca1c}IaflbyHEgrey.I?,esdtItmarkedly
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oneMCA—OR,thebrainedemaandpathologicalchansappearedintheiseht
m’dche.sphereandinthe.pp0slobe.hsexact
r~lnsshouldbefurtherexd
[Keywords]Brainisc}岬ihpe正Isi0II;嘣nede_I.a;dlol0c8lclla”8瞄;D]瞄chmis
脑梗死患者及局灶性脑缺血动物急性期出现脑
水肿,颅内压改变,血压波动等脑血液循环障碍及全
身血液动力学改变.有研究发现,局限性脑损害时,
在远离病灶的广泛脑区亦可能出现功能,代谢和脑
血流量的改变,称之为远隔机能障碍(Diaschisis,
Dc)…1.但脑梗死Dc发生的确切机理尚不清楚.
本文采用一侧大脑中动脉栓塞/再灌流(MCA/OR)
大鼠模型,观察动物急性局灶性脑缺血时双侧大脑
半球含水量及病理变化,探讨其病理生理机制,为脑
梗死的全脑保护提供理论依据.
1
与方法
1.1实验动物及分组
1,1.1Wistar大鼠36只,由第三军医大学野战外科
研究所实验动物中心提供,体重(258,0?26.5)g,雄
雌不拘.
l,1.2实验分组
脑缺血/再灌流(IR)组:30只.采用线栓法制
作McA/OR动物模型:选用直径0,2r一市售日本
尼龙鱼线,剪成长约3can的线段,一端用聚胺酯包
被5r一,成倒锥形头端,风干后肝索浸泡吹干,紫外
线消毒备用.大鼠用0.5%戊巴比妥钠(25—40mg/
ks)腹腔注射麻醉.正中切开颈部皮肤,动脉分叉上
方5一处结扎并离断,距分叉3mill处剪一小口插
人尼龙鱼线.调整颈外动脉方向,与颈内动脉呈一
直线,沿颈内动脉人颅方向推送栓线(约墙,20
mil1),直至有明显阻力感,结扎颈外动脉近心端栓
线.缺血1h后拔除栓线,行大脑中动脉再灌流.
并分别于再灌流3h(m3h),IR6h,IR24h,IR48
h,IR96h各活杀动物6只,观察脑含水量及病理变
化.
正常对照组(NORM):6只.麻醉,血管分离同
上,但不予结扎.观察1h活杀动物.
1.2标本制备
l,2.1TIE染色活杀动物后,立即以4?生理盐
水250ml左心室灌注,断头取脑,置一??冰冻l加
mln,使之成半硬状,自额叶由前向后作冠状切片(厚
2mil1),脑片以2%TrC(盐酸2,3,5一三苯基四氮唑)
染色.
1.2.2病理组织取材脑组织用?%福尔马林缓
冲液固定,石蜡包埋,切片;常规行HE,Neelsen染
色,光镜病理观察.
1.2.3脑含水量测定采用干湿重法J.
%H20=(1一dryweight/wetwet)×100%
1.3统计学处理结果以均数?
差(?s)表
示,采用微机Excell2,0统计程序进行显着性检验,
P<0,05为相差显着.
2结果
2.1一般观察m组动物实验全过程生命征稳
[基金项目]第三军医大学科研基盘项目
[作者单位]第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科.重庆
400042
[作者简介]王景周.男.1953年出生,汉族.教授,主任医师.硕士导师.主
要从事急性脑血管病,血管性痴呆的发病机理与防治研究.曾获军
队科技进步二等奖2项,三等奖4项.
定,爬行中左前肢力弱,左后肢拖曳,部分动物身体
左倾.其中5只出现左转圈现象.提尾倒提大鼠,
动物躯干右弯,左肢下垂.NORM组大鼠生命征,四
肢活动正常,活泼,饮食正常.
2.2脑组织病理学改变
2.2.1大体观察可见m组病灶侧大脑半球体积
明显增大,脑回变平,脑沟变浅,颜色变浅,非病灶侧
顶叶大体看颜色略显苍白.
2.2.2TIC染色NORM组大鼠脑组织切片呈均匀
红色.m组病灶侧脑组织再现中等范围苍白区,以
m48h最明显,非病灶侧颜色较NORM组变浅.
2.2.3常规病理观察HE染色:m组病灶侧海马
IR3hCA1区锥体细胞和颓叶皮质神经元数量较
N0RM组减少,核染色略深,神经元胞浆内可见空泡
形成.IR6h顶叶皮质锥体细胞较N0RM组胞浆浓
缩深染,尼氏体消失.m24,48h神经元固缩呈三
角形,界限不清,核仁消失,间质高度水肿,神经元周
围间隙明显增宽,血管管腔变窄,瘀血,周围间质增
大.非病灶侧m3h改变基本同病灶侧,m24,48h
核染色较深,尼氏体减少,间质中度水肿.神经元周
围间隙略有增宽.m95h有所恢复,与IR3h接
近.
2.3脑缺血再灌流后鼠脑含水量的变化(见附表)
m组病灶侧大脑顶叶含水量进行性增加.自IR
3h开始,m24,48h达高峰,m96h仍较高.非病
灶侧大脑顶叶含水量亦有增加,m24,鹌h最明
显,m96h接近NORM组.非病灶侧变化轻于病灶
侧.
附表MCA/OR鼠双俩大脑顶叶脑含水量变化(%)
与NORM比较:*P<0.05i与病灶侧比较:?P<0.05.
3讨论
近年来有关缺血性脑损害发生,发展的病生机
制研究受到重视,但许多问题尚未完全阐明.尤其
是脑梗死DC的发生机理,有待进一步明确.
本文研究发现,一侧大脑中动脉栓塞/再灌流
后,鼠脑病灶侧大脑顶叶含水量显着增加,以m24
?
38l
,
鹌h尤为明显;TI?染色发现桂塞侧MCA供血区
脑组织缺血苍白.HE染色可见IR3h海马CA1区
锥体细胞和皮质神经元数量减少,胞浆微空泡形成,
核染色略深;IR6h神经元胞浆浓缩.核仁不清.关
于缺血性脑水肿多系细胞毒性和血管源性脑水肿
(即混合性脑水肿).脑水肿病理改变形成机制有多
种学说,一般认为与能量耗竭,自由基毒性,兴奋性
氨基酸毒性和钙超载等有关.
值得注意的是,本文发现MCA/OR动物非病灶
侧大脑顶叶对称部位脑含水量亦有增加,其程度轻
于病灶侧.HE与尼氏染色鼠脑双侧海马CA1区锥
体细胞和皮质神经元均可见不同程度的细胞胞浆浓
缩,尼氏体消失,核深染及固缩等现象.亦有作者报
道,局灶性脑缺血,出血,外伤等损害时,在远离病灶
的广泛脑区(如对侧大脑半球,小脑,脑干等)可出现
局部脑血流量(cBF)减少,氧和葡萄糖利用率降低,
脑电波幅降低等L3.4J.汤继宏等【报道脑出血血肿
远隔区CBF下降,脑含水量增加,二者范围基本一
致.龚建平等_6报道顶叶,枕叶和基底节区出现的
脑软化灶可继发丘脑萎缩.关于脑梗死DC发生的
确切机制目前尚不完全明了.有人认为局灶性脑损
害时远离病灶的广泛脑区发生的病理改变可能与神
经传导通路抑制有关【lJ,即局灶性脑损害时,通过顺
行性或逆行性神经元通路抑制远隔部位脑组织的功
能,代谢,甚至产生结构改变.其确切机制有待于进
一
步研究.
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[收祷:2001一o3一OI][奉文编辑:裴俏]
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