人感染猪链球菌病流行病学调查方案

人感染猪链球菌病流行病学调查 一、目的 1、核实诊断～了解病情～掌握疾病的临床和流行病学特点, 2、调查危险因素和感染途径～为进一步阐明疾病的自然史、流行病学特征及规律提供研究线索, 3、掌握疫情波及范围和影响因素～为疫情的处理提供依据。 二、调查内容 主要内容包括一般情况、发病情况,临床表现、临床检验,、流行病学,病家及周围环境、家禽、家畜养殖情况、 与病,死,猪接触史及其他情况,。对资料及时进行整理、、总结。 三、调查要求 1、个案调查对象:疑似病例、临床诊断病例、确诊病例。 2、调查组在接到疑似病例后～应于最短时间内派出流调人员对报告病例进行流行病学个案调查。原则上每例病人至少由2名专业人员共同完成调查。 3、对病例进行个案调查时～尽可能由病人自己回答调查者所提的问题～对于不详或有可疑的地方可通过病人家属或医生等其他知情者补充或核实。如病人病情较重或死亡～无法直接调查时～应通过其亲友、同事或其他知情人了解情况～完成调查。 4、按照病例个案调查表,附表1,进行个案调查～个案调查基本内容:病人的基本情况、临床表现、临床实验室检测结果、流行病学相关资料。调查表填写要完整～字迹要清晰～调查问卷中所有总是不得空缺～如不能填写请标注原因。 5、在接到调查病例的订正报告或转归报告时～应及时做好随访和相关住处的补充调查～进一步完善个案调查表。 附表:江苏省人感染猪链球菌病个案调查表 人感染猪链球菌病个案调查表 编码: ??-? 一、一般情况: 1、被调查者姓名: 被调查者属:1病例本身 2 病例家属 3病家邻居 4与病例同时宰杀死猪者 2、年龄(岁): 3、性别:1 男 2 女 、职业:1 农民 2 民工 3 渔民 4 工人 5 学生 6 干部职员 4 7 医务人员 8 家务及待业 9 其它: 5、住址: 市 县,区, 乡,镇、街道, 村 6、发病:时间 年 月 日 时 地点 7、初诊:时间 年 月 日 时 初诊单位 8、住院:入院时间 年 月 日 时 住院单位 出院时间 年 月 日 时 9、报告:时间 年 月 日 时 报告单位 10、死亡时间 年 月 日 时 11、病程: 天 小时 、诊断: 1 是 2 否 12 诊断病名: 13、转归: 1痊愈 2死亡 3治疗 14、并发症: 二、临床资料 ,一, 临床症状与体征 1、是否发热, 1是 2否 就诊体温 ? 最高体温 ? 2、就诊时:脉博 次/分 呼吸 次/分 血压 ,注明单位, 2、是否有以下临床表现,,以框内打“?”表示, — 2 — 畏寒 ? 咳嗽 ? 咽痛 ? 咽红 ? 呼吸困难 ? 腹痛 ? 腹泻 ? 恶心 ? 呕吐 ? 如腹泻～每天大便次数: 1.3，5次 ? 2.6，10次 ? 头痛 ? 全身酸痛 ? 淋巴结肿胀 ? 关节肿胀疼痛 ? 昏迷 ? 抽搐 ? 瘀点瘀斑 ? 眼结膜充血 ? 外周性面神经瘫痪 ? 听力减退 ? (单侧 双侧) 眼球震颤 ? 克氏征 ? 布氏征 ? 颈项强直 ? 低血压 ? 最低血压 / Kpa,或 / mmHg, 其他临床表现: ,二,临床检验,如单位不一致～请注明, 9/升， 淋巴细胞 %， 1、血常规:WBC: ×10 9中性粒 %， 血小板 ×10/升 2、脑脊液:浑浊: 1是 2否 潘氏球蛋白试验:1阳性，2阴性; 细胞计数: /μL 葡萄糖: mmol/L( mg/dl)， 氯化物 mmol /L 3、粪常规:性状:1软便 2稀便 3水样便 4脓血便 5粘液便 6血便 镜检:红细胞 /HP，白细胞 /HP; 潜血试验:1阳性 2阴性; 粪胆素:1阳性 2阴性; 粪便胆红素:1阳性 2阴性。 4、肾功能: 血肌酐 μmol/L, 血尿素氮 mmol/L, 血尿酸 mmol/L 5、肝功能检查: 谷草转氨本科AST: U/L 谷丙转氨酶ALT: U/L 总胆红素TBLL: umol/L 胆汁酸: 直接胆红素DBLL: umol/L 间接胆红素: umol/L 碱性磷酸酶ACP: U/L γ-谷氨酰转肽酶γ-GT : U/L 总蛋白: g/L 白蛋白: g/L 球蛋白: g/L 白球比例A/G: 三、流行病学调查 1、居所环境卫生状况: 1 很好 2 较好 3 一般 4 较差 5很差 — 3 — 2、是否养殖家禽、家畜, 1是 2 否 喂养方式 粪便处理 种类 数量 备注 圈养 放养 集中堆放 散放 猪 牛 羊 鸡 鸭 3、猪舍环境:猪群饲养密度 平方米/头 猪舍卫生条件: 1 好 2 中 3 差 通风条件: 1 好 2 中 3 差 猪舍喷雾消毒: 1 是 2 否 4、近一月内家中有无家禽家畜死亡,,详填每一只病死动物情况, 1有 2无 死亡日期 动物种类 养殖时间 备注 5、病前一周内是否有与病、死猪及其制品接触史, 1有 2无 3不详 一周内初次接触时间: 年 月 日 时 方式:1喂养 2宰杀 3销售 4洗切加工 5食用 6埋葬 7其它 如果参与宰杀～则所做工作, 1主要人员 2协助人员 具体操作:1去毛 2开膛 3分割 4蒸煮 5其它 所接触部位:1毛皮 2内脏 3猪血 4粪尿 5生肉 6熟肉 — 4 — 一周内最近接触时间: 年 月 日 时 方式:1喂养 2宰杀 3销售 4洗切加工 5食用 6埋葬 7其它 如果参与宰杀～则所做工作, 1主要人员 2协助人员 具体操作:1去毛 2开膛 3分割 4蒸煮 5其它 所接触部位:1毛皮 2内脏 3猪血 4粪尿 5生肉 6熟肉 接触后是否及时洗手, 1是 2 否 是否用洗涤剂或肥皂? 1是 2否 接触时手、臂皮肤有破损或划破, 1有 2无 是否出血? 1是 2否 6、其他: ,1,发病前一周内是否食用过肉类, 1 是 2否 如食用～种类:1牛肉 2羊肉 3猪肉 4鸡肉 5其它 6不详 ,2,发病前喝未煮沸的牛、羊奶, 1有 2 无 3不详 ,3,1周内是否参加过聚餐, 1 有 2 无 3不详 其他同聚餐者有无腹泻, 1有 2无 3不详 ,4,饮水类型, 1 自来水 2 压井 3 河水 4 湖水 5塘水 6其它 喝生水习惯, 1有 2无 3不详 四、调查小结: 调查者单位: 调查者: 调查时间: 年 月 日 审查者: — 5 — 人感染猪链球菌病诊疗方案(试行) 一、流行病学史 1、潜伏期:本病潜伏期短～平均常见潜伏期2~3天～最短的从接触到发病只有数小时～最长7天。 2、传播途径:猪链球菌?型感染病例的感染来源为猪～国外也有野猪感染的报道。人在接触病,死,猪时～致病菌经破损皮肤等侵入人体～在几小时至几天内发病。猪链球菌引起的链球菌感染综合征虽为感染性疾病～但尚未发现人传人的现象。 二、临床症状及分型 ,一,本病的潜伏期短～平均常见潜伏期2，3天～最短可数小时～最长7天。 ,二,临床可表现为败血症型和脑膜炎型2种类型。 病人感染后起病急～临床表现为畏寒、发热、头痛、头昏、全身不适、乏力、腹痛、腹泻。外周血白细胞计数升高～中性粒细胞比例升高～严重者发病初期白细胞可以降低或正常。 重症病例迅速进展为中毒性休克综合征～出现皮肤出血点、瘀点、瘀斑～血压下降～脉压差缩小。可表现出凝血功能障碍、肾功能不全、肝功能不全、急性呼吸窘迫综合征、软组织坏死、筋膜炎等。 部分病例表现为脑膜炎～恶心、呕吐,可能为喷射性呕吐,～重者可出现昏迷。脑膜刺激征阳性～脑脊液呈化脓性改变。皮肤没有出血点、淤点、淤斑～无休克表现。 还有少数病例在中毒性休克综合征基础上～出现化脓性脑膜炎表现。 三、实验室检查 1、常规检查: — 6 — ,1,血常规检查:白细胞计数升高～中性粒细胞比例升高～重者病初白细胞亦可降低或正常。血小板计数进行性下降。 ,2,血生化检查:肝、肾功能～心肌酶谱。 ,3,凝血功能: ,4,血气分析: ,5,X线胸片: ,6,心电图: ,7,血电解质检查: 上述检查每天重复1，2次。 2、细菌学检查: ,1,血培养: ,2,脑脊液检查:常规、培养～部分病人有脑脊液化脓性改变。 四、诊断要点 综合病例的流行病学史、临床表现和实验室检测结果～排除其他明确病因的可进行诊断。诊断要点包括: 1、流行病学史:7，8月份存在高温、高湿环境～当地一般有猪等家畜疫情存在～病例发病前7天内有与病,死,猪等家畜的接触史～如宰杀、洗切、销售等。 2、疑似病例:流行病学史结合急起畏寒、发热～外周血白细胞计数升高～中性粒细胞比例升高。 3、临床诊断病例:流行病学史结合中毒性休克综合征和/或脑膜炎。 4、确诊病例:全血和尸检标本等无菌部位的标本经培养后～经鉴定为猪链球菌。 五、治疗原则 ,一,高度重视、早期发现、早期诊断、早期治疗, — 7 — ,二,入住县级以上传染病房或ICU～隔离治疗, ,三,控制感染源～切断传播途径～医务人员注意防护, ,四,避免长时间缺氧和低血压～尽早切断向MODS转变的病理过程。 1、一般治疗 体位:一般采取平卧位。 吸氧:鼻导管给氧～效果差者可面罩给氧。 饮食:进食易消化、流质饮食～对消化道症状严重的患者～可插胃管～静脉补液～保证水、电解质及能量供应。 退热:发热患者采用物理降温～慎用解热镇痛剂。 预防应激性溃疡:洛赛克40mg iv～1，2次/天或法莫替丁20mg iv～2，3次/天。 支持治疗:可选用丙种球蛋白20，30g/天 静脉滴注。 2、病原治疗 早期、足量使用抗生素。治疗:建议联合使用青霉素和头孢曲松钠。青霉素用量:800，2000万u/天～分次静脉滴注,皮试,。 头孢曲松钠用量:2.0g～q12h，q8h～静脉滴注。治疗2，3天无效或有细菌培养证据需立即更换抗生素。 如有对青霉素过敏者～可选用二代头孢加左氧氟沙星～剂量应大于常规量～分2，3次静脉注射。 3、抗休克治疗 ,1,扩容治疗: ?晶体液～应用乳酸林格氏液1000，2000ml～5%GNS1000，2000ml～低分子右旋糖酐500ml。 ?胶体液～白蛋白20，40g～血浆500，1000ml～新鲜血适量。 — 8 — ?条件容许时～进行CVP和PCWP的监测。 ?扩容过程中注意心、肺功能及血压的变化。 ,2,血管活性药物应用: >5ug/kg/min～可与间羟胺配合使用～必要时可选用肾上腺素多巴胺 和去甲肾上腺素～应用微量输液泵～缓慢静脉滴注。 ,3,强心药物的应用～如果心率偏快～可用西地兰0.2mg～每天2，4次～总量不超过1.2mg/天。 ,4,东莨菪碱可疏通微循环～0.3mg～每半小时到1小时一次～视心率而决定用药间隔时间。 ,5,纳洛酮0.4mg～每1小时一次～连用24小时。 ,6,纠正酸中毒～在血气分析指导下～应用5%碳酸氢钠～不要矫枉过正。 4、激素治疗:推荐应用甲基强的松龙～一般剂量每天160，240mg～1天两次～每日剂量不超过1g～连续应用5，7天。 5、脑膜炎的处理: ,1,20%甘露醇125ml～q6h，q8h/天,速尿10，20mg～p.r.n.～注意低钾血症的发生。 ,2,抽搐的处理:对抽搐惊厥患者～可以使用苯巴比妥钠100mg～肌肉注射～8，12h一次。也可使用安定10mg～缓慢静脉注射～注意患者呼吸。必要时～10%水合氯醛10，20ml～口服或灌肠。 6、DIC的处理: 患者有出血表现～血小板减少或进行性下降～PT延长3秒以上～应高度怀疑DIC存在。DIC的治疗原则:原发病治疗,抗生素,～支持替代治疗～必要时肝素抗凝治疗。 替代治疗:每天至少输注新鲜血浆400ml～至PT恢复正常,如果患 — 9 — 9者血小板数小于50×10/L～先输注单采血小板10单位,血小板数小于 920×10/L时～一次性输注单采血小板20单位～必要时可输注纤维蛋白原及冷沉淀。 肝素抗凝:如果经过以上积极替代治疗1天后出血症状不改善～血小板数和PT不能恢复正常～在继续替代输注治疗基础上可以给予肝素抗凝治疗。方法:,1,普通肝素钠25mg～皮下注射～q12h,或者,2,低分子肝素:60IU/Kg,用速避凝0.3，0.4ml,～q12h。肝素使用期限为出血明显改善～血小板数和PT恢复正常。 丹参20ml加入5,GNS100ml静脉滴注。 7、如有下列四项中的两项即可诊断急性肾功能衰竭～可进行连续血液净化: ,1,发热、休克后出现少尿～尿量<17ml/h, ,2,血尿素氮和肌酐进行性升高, ,3,尿钠增高>60mmol/L～或尿渗透压降低<400mOsm/L, ,4,B超提示双肾增大。 我们主张:不必等肾功能衰竭出现～即可进行连续血液净化。 8、如果呼吸频率>35次/分～血氧分压<50mmHg～应行机械通气。呼吸模式视病人具体情况决定。 9(其他:乌司他丁:20万u加入5,GS100ml～静脉滴注～q8h。 — 10 — 人感染猪链球菌病中医辩证施治方案 为有效预防、快速应对、及时控制人感染猪链球菌病疫情～更好地发挥中医药的优势～特制定中医辩证救治方案如下: 〔病名〕猪疫,瘟疫, 〔病因病机〕 初起疫毒之邪侵犯人体卫表及肠胃～以致卫表不和～肠胃失运～重症病人疫毒鸱张～由卫肠逆传心包～或热深厥深而致厥脱～或疫毒蔓延脏腑～传遍三阴～累及肺、肝、肾～继则邪传营血～迫血妄行～以致DIC发生。 〔治疗原则〕 表里双解～清热解毒～醒脑开窍～宣解阳郁～凉血化瘀。 〔辩证施治〕 一、表,卫,里,肠,同病证 临床表现:畏寒发热～头痛～头昏～全身不适～乏力～腹痛～腹泻～舌薄黄腻或厚黄腻～脉浮数。 治法:表里双解 成药:5,葡萄糖水250ml，清开灵注射液20ml～静脉滴注～2次/日 方药:葛根～黄芩～黄连～地锦草～马齿苋～煨木香～霍香～佩兰 二、气分型盛证 临床表现:高热～汗出口渴～烦躁～面红目赤～脉洪数～苔黄腻或躁。 治法:清热解毒～生津止渴 方药:生石膏～生知母～银花～连乔～七叶枝花～板蓝根～升麻～玄参～鲜芦根～金荞麦～半枝莲 三、热深厥深证,中毒性休克综合征, 临床表现:发热～血压下降～脉压差缩小～凝血功能障碍～皮肤出血 — 11 — 点～肝肾功能不全～苔黄舌红～脉滑数～急性呼吸窘迫综合征～软组织坏死～筋膜炎等。 治法:宣解阳郁～凉血清热 成药:5,葡萄糖水250ml，丹参注射液20ml～静脉滴注～1次/日 方药:柴胡～赤芍～枳实～丹皮～桑白皮～葶苈子～丹参～大青叶～泽兰泻 四、邪犯心包证,脑膜炎型, 临床表现:发热～恶心呕吐,可能为喷射性呕吐,～神昏～脑膜刺激征阳性～脑脊液呈化脓性改变～苔黄燥舌红～脉弦。 治法:清热解毒～醒脑开窍 成药:?安宫牛黄丸～1粒,烊化口服,～2次/日 ?5,葡萄糖水250ml，醒脑静20ml～静脉滴注～1-2次/日 方药:黄连～黄芩～升麻～玄参～板兰根～生知母～生石膏～石菖蒲～连翘～淡竹叶～芦根 五、邪犯营血证,DIC型, 临床表现:发热～口干舌绛～皮肤出血点及瘀斑、瘀点～面部潮红～吐血衄血～躁扰不安～脉细数。 治法:清热解毒～凉血化瘀 方药:水牛角～生地～丹皮～赤芍～制大黄～紫草～丹参～紫珠草～升麻～葛根 — 12 — 人感染猪链球菌病疫点消毒处理方案 一、消毒处理范围 人感染猪链球菌病例所在家庭、病畜圈舍, 病例发病前接触的病,死,猪所属家庭及其畜圈、禽舍, 病,死,猪处理及收治疑似、临床、确诊病例等场所。 二、准备工作 1、物资准备:消毒剂、水桶、量器、容器、漏斗、喷雾器、长卷尺、洁净毛巾,2条,。 2、防护用品:长筒胶靴、乳胶手套、口罩、工作帽、防水工作服等。 三、工作程序 1、进入现场前～做好个人防护。 2、进入现场～了解现场需消毒的物品、区域等情况～选择合适的消毒方法。 3、消毒程序:进入疫点消毒～按由外向内顺序～喷雾或擦拭消毒门把手、地面、墙壁、家具、厕所等处,从不同房间以及最后退出时～边退边消毒经过的地面。为了保证消毒效果～病家应在60分钟后方可进入消毒现场。 4、消毒结束后～工作人员应穿长筒胶靴站入盛有含有效氯2000mg/L消毒液的槽或盆内消毒5分钟～并用消毒剂消毒手部,手套、口罩、帽子、工作衣等带回及时消毒处理。 四、消毒方法 1、环境物体表面的消毒 用含有效氯2500mg/L~5000mg/L或含0.5%过氧乙酸的消毒液对被污染的地面、墙壁、桌椅、床、柜等环境物体表面进行喷洒或擦拭消毒～喷 22洒量100ml/m~200 ml/m。对可能污染的砧板、盆、碗、刀等物品用含有 — 13 — 效氯500mg/L~1000mg/L的消毒液浸泡消毒30分钟~60分钟以上。 2、污染用具消毒 对耐热耐湿物品～如餐具、棉织物、金属、陶瓷、玻璃类物品～用加热煮沸30分钟以上或压力蒸汽灭菌～121?30分钟,亦可用0.2%~0.5%过氧乙酸浸泡1h~2h。 对不怕湿物品～如各种塑料制品、用具、容器、人造纤维织物等～可用含有效氯5000mg/L消毒液或0.5%过氧乙酸液浸泡30分钟或擦拭表面消毒。 3、病人排泄物、分泌物、呕吐物及其盛装容器的消毒 患者的排泄物、分泌物、呕吐物等应用专门容器收集～容器用含有效氯2000mg/L或0.5%过氧乙酸消毒液消毒,排泄物、分泌物、呕吐物用20000mg/L有效氯消毒～按比例1:2浸泡消毒2h,若有大量稀释排泄物～可用含有效氯80%漂白粉精干粉～按粪、药比例20:1加药后充分搅匀～消毒2h。 4、病畜圈舍的消毒 用0.2%~0.5%过氧乙酸或有效氯5000mg/L~10000mg/L消毒液～按100 22ml/m~300 ml/m药量～连续喷洒三次～间隔1h。 5、病畜粪尿的消毒 病畜的粪尿加入漂白粉或其它含氯消毒剂干粉或溶液～使其最终有效氯浓度不少于10000mg/L消毒2h～不得用作肥料。 6、病人遗体 病人遗体用0.5%过氧乙酸溶液浸湿的布单严密包裹后尽快火化。 7、饮用水消毒 集中式供水水源～如各自来水厂～疫区供水余氯量,管网处,不得低于0.5mg/L。 — 14 — 分散式供水水源～包括直接从江、河、渠、塘、井取用水者～均应采用在家庭水缸内用漂白粉精片或二氯异氰尿酸钠片剂～按每升水加入有效氯1mg~5mg～作用30分钟后～余氯量达0.5mg/L~1.0mg/L者～即可使用。 8、手、皮肤消毒 0.5%碘伏、75%酒精、0.5%醋酸氯己定消毒液擦拭消毒3分钟~5分钟。 9、病,死,猪的消毒处理 对病死猪用含有效氯5000mg/L的消毒剂喷洒尸体表面消毒并用浸有0.5%过氧乙酸的棉球塞住口、鼻、耳等处后深埋,2米,坑底铺一层漂白粉～最好集中消毒深埋～且远离饮用水源50米以上。 10、运输工具 可用0.5%过氧乙酸溶液或1000mg/L~2000mg/L有效氯溶液喷洒至表面湿润～作用30分钟~60分钟。 五、消毒工作注意事项 1、消毒工作人员在出发前仔细检查所带消毒剂和用具是否齐全。 2、消毒时不可吸烟、喝水、吃东西～不得随便走出消毒区域～并劝阻无关人员进入疫点。 3、消毒应有条不紊～突出重点。凡应消毒的物品～不得遗漏。严格区分已消毒和未消毒的物品～勿使已消毒的物品被再次污染。 4、消毒完毕应清点所消耗器材、物品～加以整修、补充。 5、消毒1小时后住户方可进入～对消毒过的物品进行必要清洗后再使用。 6、做好消毒记录～及时上报。 — 15 — 人感染猪链球菌病健康教育方案 为有效开展传染病和人畜共患病防治知识的宣传教育工作～提高社会公众参与的积极性和有效性～共同应对可能发生的猪链球菌病疫情～特制定《人感染猪链球菌病健康教育方案》。 一、目的 开展防治人感染猪链球菌病的知识普及工作,增强社会公众的自我防范意识,提高重点人群自我保护技能～最大限度地减少人感染猪链球菌病的发病人数。 二、宣传策略与宣传的重点内容 在政府的领导下～卫生、农林、广电等有关部门～要开展好各自职责范围内的健康教育工作,市疾控中心要加强对社会健康教育工作的组织指导。为电视、电台、报纸等大众传媒的宣传工作提供专业技术支持。 开展人感染猪链球菌病防治健康教育工作时～应该以向全民普及相关的防治知识为重点～及时组织相应的科普宣传内容～通过各种途径～利用各种宣传工具大力开展宣传教育活动,应针对重点人群及时制定并实施相应的干预措施。 1、疫情发生之前 宣传策略:与大众传媒开展广泛合作～为其提供必要的宣传材料～运用广播～电视和报纸等大众媒体大力开展防治知识的科普宣传,通过健康教育网络体系组织社会各界力量对各种人群有序地开展宣传教育工作,设计制作相应的宣传材料并快速地发放～使其进入千家万户。 宣传教育的重点内容:政府和有关部门对防治人感染猪链球菌病工作的重视,政府出台的防治人感染猪链球菌病的有关政策～采取的预防措施,该疾病的感染途径、可疑症状及主要临床表现,人感染猪链球菌病的预防、诊断、治疗与消毒等知识。 — 16 — 宣传教育的对象:城乡社区的所有公众。重点是生猪养殖户、生猪宰杀、加工人员和销售人员。 2、疫情发生之后 宣传教育策略:加大广播～电视和报纸等媒体的宣传力度～并运用“个别劝导、电视讲座、咨询”等互动方式～对疫区群众的防病指导与心理危机干预。 宣传教育重点内容:早期发现和正确处理可疑病猪、及早诊断和治疗患者的方法及重要性,农民预防该病的主要措施,农民发生可疑症状应采取的措施等。 宣传教育对象:城乡社区的所有公众。重点是疫区的生猪养殖户、生猪宰杀、加工人员销售和消费者等人群。 通过深入开展全民的健康教育～提高城乡群众自我防范意识和自我保护技能。在帮助广大城乡居民消除恐慌心理～做好个人防护的同时～引导其配合及时、有序、高效地处理疫情～控制疫点～避免疫情进一步蔓延～切实保障大众身体健康和生命安全～维护社会安定。 三、宣传教育活动的主要形式 1、运用广播～电视和报纸等大众媒体开展宣传,包括专栏、专版及电视专题讲座,。 2、针对不同人群设计制作宣传折页、传单、海报、招贴画等各种宣传品～利用有效渠道进行发放。 3、利用机关企事业单位、街道、各个单位及窗口地区的宣传栏、科普画栏、板报等宣传阵地进行宣传。 4、农村利用有线广播网～农民健康教育学校～老年活动室～卫生院和村卫生室的橱窗和板报等工具进行宣传教育。 5、开通热线咨询电话为社会人群答疑。 — 17 — 四、预防猪链球菌病宣传要点 1、猪链球菌病是一种严重的、预后较差的人畜共患病～重在预防, 2、猪链球菌病主要通过密切接触病猪和病死猪而感染, 3、及早发现和处理病猪或病死猪是最有效的预防措施, 4、避免接触可疑病猪或病死猪及其猪肉制品, 5、在猪病流行高峰前～给猪普遍接种猪链球菌菌苗是有效的预防措施, 6、加强体育锻炼～增强自身抵抗疾病能力、大搞爱国卫生运动是提倡的行为, — 18 — 人感染猪链球菌病样品采集运送与实验室检测方案 一、样品采集 1、采样器材 ?无菌封闭性好的试管～最好使用负压采血管或带螺口盖的塑料管～ 避免使用玻璃试管。 ?可以清楚标记且标记不易脱落的记号笔。 ?可以方便采集组织标本的无菌容器。 ?无菌的剪刀、镊子和手术刀。 ?血平皿(或者血培养瓶)。 ?一次性隔离服、乳胶手套、防护口罩等。 ?带有冰袋或者冰排的安全可靠的保温运输容器。 ?采样送检单。 2、样品种类 ?现症病人不抗凝全血 ?现症病人抗凝血 ?发病4，7天、10，16天不抗凝血 ?脑脊液标本 ?尸体解剖应无菌采集肝、脾、心血、胸,腹,水 ?如有病死猪也可进行解剖～取肝、脾、肾、心血、肉 3、血液和脑脊液标本采集方法 ?无菌抽取血液5，10ml分臵于有抗凝剂和无抗凝剂的无菌试管或 者负压采血管中 ?按常规方法腰穿采集适量脑脊液标本臵于无菌试管中。 ?采集标本的同时接种血平皿或者血培养瓶～臵于35，37?培养。 — 19 — 4、样品运输保存 ?所有的原始标本在转运过程中应臵于安全可靠容器中。 ?标本应冷藏运输。 ?需要马上检测的标本在实验室可暂放4-8?冰箱。 ?剩余标本放臵于-70?保存。 5、注意事项 ?严格无菌操作～防止标本污染。 ?用于分离培养的标本应在抗菌治疗前采集。 ?应尽可能床边接种分离培养～如无法立即接种～应在样品送达实验室后立即进行分离。 ?在标本采集过程中～注意安全防护。使用一次性隔离服、乳胶手套、防护口罩。采取预防措施～防止针头等锐器刺伤。如发生伤口意外暴露～应及时清洗和消毒～并预防性服药。 二、实验室检测 1、推片镜检 抗凝血或脑脊液可推片革兰染色镜检。阳性标本可见中性粒细胞内吞噬颗粒～偶尔可见革兰阳性球菌。 2、猪链球菌分离步骤 ?血平板接种 血或脑脊液等标本可直接接种于新鲜羊血琼脂平板,如无血平板可用含8%新生牛血清的营养琼脂平板代替,。组织标本可直接涂抹平板或剪碎用无菌生理盐水洗涤～洗液接种平板。平板臵37?5% CO2培养箱或者烛缸中培养24小时。 ?增菌培养 待检标本臵约10倍体积脑心肉汤或含8%新生牛血清葡萄糖肉汤,配 — 20 — 方附后,或商品化血培养瓶中增菌液培养24小时～接种新鲜羊血琼脂平板～臵37?5% CO2培养箱或者烛缸中培养24小时。 如果是污染标本,则要接种于选择增菌培养液,含15微克/毫升多粘菌素B～30微克/毫升萘啶酮酸的脑心培养基,进行增菌。 ?形态学鉴定 猪链球菌在血平板上呈直径l，2毫米的细小菌落～无色～半透明～边缘整齐～凸起～光滑～α溶血,偶而也有弱β溶血或α溶血或β溶血现象均不明显,。 挑取平板上可疑菌落革兰氏染色镜检。猪链球菌无芽胞～无荚膜～刚分离的猪链球菌～典型的革兰氏阳性链球菌～链长达二十多个～二代培养后细菌形态不典型～多为革兰氏阴性球杆菌～短链或不成链。 ?筛检生化试验 猪链球菌触酶试验阴性～可与葡萄球菌区别。 ?血清学检测 用分型诊断血清～以乳胶凝集试验或玻片凝集试验。确定所分离的菌株为R群～与2型猪链球菌分型血清反应。 目前国内无血清供应。据报道,加拿大和澳大利亚有商品化血清分型试剂。 ?生化鉴定 在血平板上挑选可疑菌落进行革兰氏染和触酶试验～如符合链球菌特征～接种血平板纯培养后进行生化鉴定。 猪链球菌水解七叶苷、淀粉和精氨酸～不水解马尿酸盐和明胶,分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露糖～不分解阿拉伯糖、鼠李糖、山梨醇和甘露醇。 梅里埃API 生化鉴定系统API 20 strep鉴定条可鉴定2型猪链球菌～ — 21 — 推荐使用,鉴定程序详见操作说明,。 ?PCR检测 采用PCR技术可以检测猪链球菌种特异性基因16S rDNA、猪链球菌2型和1/2型特异的荚膜多糖基因cps2A、毒力因子溶菌酶释放蛋白基因MRP和细胞外蛋白因子基因EF～有条件的实验室可以采用。 附:葡萄糖肉汤,含8%新生牛血清, 成分: 酵母浸膏 3克 10%葡萄糖溶液 20毫升 枸椽酸钠 3克 磷酸氢二钾 2克 牛肉汤 900毫升 24.7%硫酸镁 20毫升 0.5%对氨苯甲酸 5毫升 新生牛血清 80毫升 制法 1、除葡萄糖及硫酸镁外～其他各物混合～加热溶解～矫正pH至7.6～再煮沸5分钟～用滤纸过滤并分装于100毫升三角烧瓶内～每瓶50毫升～包扎瓶口～高压灭菌10磅20分钟。 2、将葡萄糖配成10%水溶液～硫酸镁配成24.7%水溶液～分别高压灭菌8磅15分钟。 3、于每50毫升无菌肉汤内加入无菌葡萄糖及磷酸镁水溶液各1毫升～混匀。于37?培养2天证明无细菌生长后存于冰箱内备用。 — 22 —