消毒剂中有效成分——对氯间二甲苯酚、三氯羟基二苯醚的高效液相色谱测定法

消毒剂中有效成分——对氯间二甲苯酚、三氯羟基二苯醚的高效液相色谱测定法 消毒剂中有效成分——对氯间二甲苯酚、三 氯羟基二苯醚的高效液相色谱测定法 . 408.环境与健康杂志2004年l1月第2l卷第6期JEnvironHealth,November2004,Vo1.21,No.6 文章编号:1001-5914(2004)06-0408-02 【技术与】 消毒剂中有效成分——对氯间二甲苯酚, 三氯羟基二苯醚的高效液相色谱测定法 杜达安,谢剑锋,胡静,朱杰民 摘要:目的研究消毒剂中有效成分——对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚的测定方法.方法选用高效液相色谱 法,以乙睛:水=60:40(用冰醋酸调pH值3.O)为流动相,选用二极管阵列检测器,检测波长为280nm.结果对氯间二甲苯 酚和三氯羟基二苯醚检出限分别为2.48,2.08ng,平均回收率范围为95.4%~103.3%,相对偏差为0.6%-3.4%.结论 高效液相色谱测定法准确度和精密度较高,适用于含对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚消毒剂样品的测定. 关键词:消毒剂;对氯间二甲苯酚;三氯羟基二苯醚;高效液相色谱测定法 中图分类号:Rll3文献标识码:B StudyontheMethodforDe~rminafionofNipacidePXandTriclosaninDisinfectantbyIIighP erformanceLiquid ChromatographyDUDa-an,XlE萎?母n昏HU矗n舀etd.CentersforDiseaseControlAndPr毛1,I伍tnGuangdongProvince, Guangzhou,Guangdong5lO300.China Abstract:ObjectiveTostudythemethodfordeterminationofnipacidePXandtriclosanindisi nfectantbyhigh performanceliquidchromatography.MethodsHighperformanceliquidchromatography,b asedonthemobilephase(CHsCN:H20= 60:40.pH=3.01anddiodearraydetector(DAD.=280nm),waschosedtodeterminenipacide PXandtriclosanindisinfectant. ResultsThedetectionlimitofnipacidePXwas2.48ngandtriclosanwas2.O8ng.Therateofre coverywas95.4%一lO3.3%. therelativestandarddeviationsSD)was0.6%一 3.4%.ConclusionThemethodiSsimple.preciseandsuitableforthe determinationofnipacidePXandtriclosanindisinfectant. Keywords:Disinfectant;NipacidePX;Triclosan;Highperformanceliquidchromatograph y 一 场突如其来的SARS灾害,带给了人类健康意 识和思想观念的转变,人们的卫生观念和疾病防范意 识大大增强.各种消毒剂产品因为能够杀灭病原微生 物而在社会上得到广泛的使用,但是化学消毒剂很多 是有机化合物,对环境和人体会造成一定的危害.如 过氧乙酸和戊二醛消毒剂,虽可杀灭一切致病微生 物,但也腐蚀物品,污染空气,对人体呼吸道和皮肤有 强烈刺激,致敏性.随着我国卫生部《消毒技术规范》 (2002)的颁布实施.对消毒剂的种类和含量提出了具 体的和监管.对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚 属于苯酚类消毒剂,苯酚类消毒剂是使用历史最为悠 久的一类消毒剂,具有广谱高效低毒,使用安全,持效 长的优点而得到广泛的应用1".但是目前的《消毒技术 规范》(2002)并没有方法对其进行检测,笔者在参考 有关文献的基础上,通过实验研究,采用高效液相色 谱法分析这2种物质1. 1材料与方法 1.1仪器 HP1100型高效液相色谱仪,配G1311A型四元 泵,G1313A型自动进样器,G1316A柱温箱,G1315B 型二极管阵列检测器(美国安捷伦公司);Reax-Top型 作者单位:广东省疾病预防控制中心(广东广州510300) 作者简介:杜达安(1947一),男,副主任技师,从事环境卫生与理化检验. 漩涡振荡器(德国Heidolph公司),5210E.MTH型超声 振荡器(美国BRANSONIC公司),MILLI.QAcademic 超纯水处理器(法国MILLIPORE公司). 1.2试剂 对氯间二甲苯酚标准品(纯度I>99%,瑞典Fluka 公司),三氯羟基二苯醚标准品(纯度>I99%,日本Tci 公司),乙腈(色谱纯,美国Burdick&Jackson公司),冰 醋酸,无水乙醇(优级纯,广州化学试剂厂),水为超 纯水. 1.3高效液相色谱条件 LC.18-DB色谱柱(150minx4.6mm,5m,美国 SUPELCO公司),流动相为乙腈:水=60:40,用冰醋酸调 节pH值3.0,柱温25cc,流速1.0mL/min,二极管阵列 检测器,波长280nm. 1.4样品预处理 称取膏霜,乳液或液体产品样品1.000g于25IIll 具塞离心试管中,用无水乙醇稀释定容至刻度,经漩涡 震荡混匀后,超声提取l0,15min,取上清液用0.45m 滤膜过滤后备用,溶液中有不溶物时离心分离,取上清 液过滤后备用. 1.5样品测定 按上述色谱条件取l0l待测溶液注入高效液相 色谱仪进行分析测定,根据色谱峰的保留时间和三维 光谱图进行定性,根据色谱峰面积进行定量. 环境与健康杂志2004年l1月第2l卷第6期 JEnvironHealth,November2004,Vo1.21.No.6?409? 1.6标准曲线 标准储备液配置:准确称取对氯间二甲苯酚,三氯 羟基二苯醚各0.1000g用无水乙醇溶解后定容至 100ml容量瓶中,配成标准溶液,浓度为1mg/ml.准 确移取0,0.10,0.20,0.50,1.00,2.00,5.00ml上述对氯 间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚标准溶液分别置于100ml 容量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,配成标准系列混合 溶液.进样l01分析,用峰面积和标准浓度分别绘制 对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚的标准曲线. 2结果与讨论 2.1检测器和检测波长的选择 有些含有各种中草药, 现代消毒剂成分比较复杂, 护肤功效成分等,如何选择合适的色谱条件十分重要. 用紫外检测器对检测物质进行分析时,仅依据紫外检 测器保留时间进行定性,很难排除复杂基体的干扰,影 响对样品的准确定性,考虑N---极管阵列检测器为三 维定性定量检测器,可以用保留时间和光谱图来进行 综合判断,从而大大提高了样品分析的准确性,因此实 验中检测器选用二极管阵列检测器.将对氯间二甲苯 酚,三氯羟基二苯醚标准液在200~300nm范围作光 谱扫描,发现对氯间二甲苯酚在220,280nm,三氯羟 基二苯醚在230,254,280nm处均有较强的紫外吸收, 综合考虑为了消除试剂的背景干扰,提高检测灵敏度, 选择280nm作为检测波长. 2.2流动相pH值及配比对样品色谱行为的影响 根据对氯间二甲苯酚和三氯羟基二苯醚2种物质 自身的物理和化学特性,以及在实际检测过程中样品 自身的复杂和多样性,选择合适的流动相对分析有十 分重要的意义.在反复实验中,发现在酸性条件下进行 分析,其中pH值在2.0—3.0之间峰型变化不大,分离 效果好,结果满足实验要求,但当pH值大于3.0时峰 型变化较大,分离效果变差.选用强极性试剂乙腈与水 为流动相,其中乙腈和水的配比在50:50至70:30之间 2种物质都能够很好地分离,综合考虑实验时间的长 短以及有机试剂对环境及人体的危害,选择乙腈和水 的配比为60:40.实验结果明,在pH-3.0及乙腈和 水的配比为60:40的流动相体系条件下,实验结果理 想,满足实验要求. 2.3色谱柱及柱温的选择 由于流动相pH=3.0,所以选择耐酸柱来进行分析. 温度对样品分析没有明显影响,只对出峰时间有些影 ,结果满足实验要求. 响,综合考虑柱温选定为25? 2.4干扰性实验 由于现代消毒产品种类繁多,其自身的复杂和多 样性给检测工作带来很大干扰,如果分析过程中发现 有其他物质产生干扰,可以通过适当改变流动相的配 比关系,达到被测物色谱峰与干扰物色谱峰分离,并辅 以二极管阵列检测器进行三维定性分析,确保实验的 准确性. 2.5标准曲线及最低检出限测定 对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚标准系列浓度 测定6次,取平均值得到标准曲线.则对氯间二甲苯 酚标准曲线回归方程为y=5474.缸+11.552,相关系 数r=0.99998;三氯羟基二苯醚标准曲线回归方程为 y=6634.2x一0.24186,相关系数r=0.99999.方法的最 低检出限以3倍信噪比计算,对氯间二甲苯酚和三氯 羟基二苯醚的检出限分别为2.48,2.08ng. 2.6方法回收率和精密度试验 称取分别含有对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚 消毒洗手液,消毒药水进行加标实验,在标准曲线范围 内,分别加入对氯间二甲苯酚和三氯羟基二苯醚3种 高,中,低浓度的标准溶液,测得各类消毒剂的加标回 收率和相对标准偏差,结果见表1. 表1消毒剂中对氯间二甲苯酚和三氯羟基二苯醚 高效液相色谱测定法的精密度与回收率实验结果(n=6) 3小结 本方法操作简单,分离效果好,准确度和精密度 高,适用于含对氯间二甲苯酚,三氯羟基二苯醚消毒剂 样品的测定. 参考文献: [1]陈仪本,欧阳友生,黄小茉,等.工业杀菌剂[M].北京:化学工业出 版社,2001,210—2l1. [2]朱杰民,胡静,杨业,等.高效液相色谱法测定化妆品中三氯生[J]. 卫生研究.2000,29(3):l54一l55. (收稿日期:2004-03-02)