对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法-技术转让网

对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法-技术转让网 对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法 试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项目 1.1 动物实验 1.1.1 体重 1.1.2 胃粘膜大体损伤状况 1.1.3 胃粘膜病理损伤积分 1.2 人体试食试验 1.2.1 临床症状 1.2.2 体征 1.2.3胃镜观察 2 试验原则 2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。 2.2 无水乙醇、消炎痛致急性胃粘膜损伤模型或冰醋酸致慢性胃粘膜损伤模型任选其一进行动物实验。 2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的安全性作进一步的观察。 3 结果判定 3.1 动物实验:实验组与模型对照组比较，大体观察评分与病理组织学检查评分结果均表明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。 3.2 人体试食试验:试食组与对照组比较，临床症状、体征积分明显减少，胃镜复查结果有改善，可判定该受试样品对胃粘膜有辅助保护功能。 23 对胃粘膜损伤有辅助保护功能检验方法 Method for the Assessment of Protection of Gastric Mucosa Function 1 动物实验 1.1 原理 在一定时间内给予一定量的受试样品，用对胃粘膜有损伤作用的物质造成急性胃粘膜损伤模型，观察各剂量组胃粘膜的损伤程度;或用对胃粘膜有损伤作用的物质造成慢性胃溃疡模型，在一定时间内给予一定量的受试样品，观察各剂量组胃溃疡的面积和体积，反映受试样品对胃粘膜的保护作用。 1.2 实验动物 选用SD或Wistar 健康大鼠，单一性别，180,220克，每组8,12只。 1.3 实验设计及剂量分组 照组。不受试物设三个剂量组，其中一个应为人体推荐量的5倍剂量组，并同时设置正常对同的损伤模型，还应设置相应的模型对照组。慢性溃疡模型应先造模，手术次日再分组。受试样品给予时间一般为14—30天，必要时可以延长至45天。 1.4 胃粘膜损伤模型 1.4.1 急性胃粘膜损伤酒精模型 1.4.1.1 实验动物:选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。 1.4.1.2 实验器材及试剂:解剖器械，游标卡尺，酒精或醋酸，病理制片系统，生物显微镜等。 1.4.1.3 实验方法:动物随机分正常对照组、模型组和受试样品三个剂量组。各剂量组灌胃样品30天后，全部动物严格禁食24小时(不禁水)，此期间亦禁止给予受试物。除空白对照外，所有试验组动物给予无水乙醇1.0ml/只，1小时后处死动物，暴露完整胃，结扎幽门，灌注适量10%甲醛溶液，固定20min，然后沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，在体视解剖显微镜下或肉眼下用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度。因宽度所代表损伤的严重性远较长度大，故双倍积分。其评分标准见表1。 表1 急性酒精损伤肉眼观查评分标准 损伤程度 1分 2分 3分 4分 出血点 1个 - - - 出血带长度 1-5mm 6-10mm 10-15mm >15mm 出血带宽度 1-2mm >2mm 总积分 = 出血点分值+长度分值+(宽度分值，2) 24 观察指标:各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率(%)、损伤积分指数和损伤抑制率表示。损伤发生率(%)= 某组出现出血或溃疡的大鼠数量,该组大鼠数量×100%;损伤积分指数 = 组损伤评分总和,组动物数量;损伤抑制率(%)= (A-B) /A，100%(A、B分别为模型组与试验组的损伤积分)。 病理组织学观察及评分:大体检查完毕，将每只动物胃粘膜损伤最严重的部位切下，固定于10%甲醛溶液，常规制片，HE染色，镜下观察。注意选择胃粘膜正横切面，包括粘膜全层的区域观察。评分方法:以充血、出血、粘膜细胞变性坏死在整个粘膜上皮层的累及程度分为5级。充血权重为1，出血权重为2，上皮细胞变性坏死权重为3，评分标准及病变总积分公式见表2。 表2 急性胃粘膜损伤镜下评分标准 病变 1分 2分 3分 4分 5分 充血 , 1/5 1/5 - 2/5 2/5 - 3/5 3/5 - 4/5 上皮全层 出血 , 1/5 1/5 - 2/5 2/5 - 3/5 3/5 - 4/5 上皮全层 上皮细胞变性坏死 , 1/5 1/5 - 2/5 2/5 - 3/5 3/5 - 4/5 上皮全层 病变总积分 = 充血积分+出血积分，2+上皮细胞变性坏死积分，3 1.4.2急性胃粘膜损伤消炎痛模型 1.4.2.1 实验动物:选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。 1.4.2.2 实验器材及试剂:解剖器械或游标卡尺，病理制片系统;消炎痛，甲醛等。 1.4.2.3 实验方法:动物随机分正常对照组、模型组和受试样品三个剂量组，灌胃给予动物受试物30天后，禁食不禁水24小时，模型组和剂量组给予消炎痛40mg/kg一次性腹腔注射。5小时后处死动物，剖腹将胃取出，结扎幽门和贲门，从十二指肠与幽门部结合处注入10%甲醛溶液5 ml，固定20分钟后，沿胃大弯剪开，洗净胃内容物，展开胃粘膜，用纸吸干，观察胃粘膜损伤程度。用游标卡尺测量胃出血或溃疡的最大长度及宽度，以出血或溃疡的最大长宽径作为损伤指标评分。消炎痛所致胃粘膜损伤的溃疡一般较小，肉眼观查以点状多见，其评分标准见表3。 表3 急性胃粘膜损伤消炎痛模型评分标准 损伤形态 1分 2分 3分 4分 出血点 1个 - - 出血带长度 1-2mm 2-4mm 4-6mm >6mm 出血带宽度 1-2mm >2mm 总积分 = 出血点分值+长度分值+(宽度分值，2) 注:长度和宽度均以最大径计。 观察指标:各实验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率(%)、损伤指数和损伤抑制率表示。损伤发生率(%)= 某组出现出血或溃疡的大鼠数量,该组大鼠数量×100%;损伤指数 = 组损伤评分总和,组动物数量;损伤抑制率(%)=(A-B)/A，100%(A、B分别为模型组与试验组的损伤积分) 病理组织学观察及评分:同急性胃粘膜损伤酒精模型。 1.4.3 慢性胃溃疡模型 1.4.3.1 动物:选用Wistar或SD健康大鼠，单一性别。 25 1.4.3.2 实验器材及试剂:带标尺的解剖镜、微量注射器，醋酸、半胱氨酸等 1.4.3.3 实验方法: 1.4.3.3.1 醋酸注射法:将动物禁食不禁水24小时，乙醚或1%巴比妥钠麻醉后实施剖腹手术，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将胃轻拉出腹腔外，用微量注射器于胃幽门处浆膜下注射20-30,l的30%冰醋酸，缝合切口，术后正常喂食和水。第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分为模型组和受试样品三个剂量组。各剂量组按相应剂量灌胃，连续14天。模型组灌胃蒸馏水或溶剂。禁食24小时后处死，取出整个胃浸泡于10%的甲醛内，浸泡20分钟后沿胃大弯剪开，洗净内容物，取腺胃区展开平铺于玻璃板上，用纸吸干溃疡内的水分，测量其面积和体积。 溃疡面积和体积测量法:于带标尺的解剖显微镜下计数溃疡所占的方格数，换算成面积。然后用微量注射器将有色墨水注入溃疡内，将溃疡填满与周边平齐，读取微量注射器上刻度即为溃疡的体积。 1.4.3.3.2 冰醋酸浸渍法:将动物禁食不禁水24小时，乙醚或1%巴比妥钠麻醉后实施剖腹手术，消毒腹部，于剑突下切开腹腔，将内径5mm、长30mm的玻璃管垂直放置胃体部粘膜上，向管腔加入冰醋酸0.2ml，1.5分钟后用棉签蘸出冰醋酸，缝合手术切口，术后正常喂食和水，第二天将手术后状态良好的动物按体重随机分组、给药，动物处置和测量等操作同上。 1.5 数据处理和结果判定 数据可用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05，结论:各组均数间差异无显著性。F值?F0.05，即P?0.05，用多个实验组和对照组间均数的两两比较方法进行统计。对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计。若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 受试物一个或一个以上剂量组与模型对照组进行比较，大体观察评分与病理组织学检查评分结果均表明胃粘膜损伤明显改善，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。 1.6 注意事项 动物禁食应完全，应严格控制动物禁食期间食粪便、皮毛、垫料等。 2 人体试食试验 2.1 受试者的选择标准 2.1.1 纳入受试者标准:符合慢性浅表性胃炎诊断标准且经胃镜筛选确诊为胃粘膜损伤的自愿受试者。 2.1.2 慢性浅表性胃炎诊断标准:病程迁延，有不同程度的消化不良、上腹痛、烧心、嗳气、反酸、腹胀等临床症状，可有上腹部轻度压痛。符合慢性浅表性胃炎纤维胃镜诊断标准及活体组织检查诊断标准。排除胃溃疡患者。 2.1.3 排除受试者标准: 2.1.3.1 年龄在18岁以下或65岁以上，妊娠或哺乳期妇女，过敏体质及对本样品过敏者。 2.1.3.2 继发性慢性胃炎。 26 2.1.3.3 合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统严重疾病，精神病患者。 2.1.3.4 经常用药、嗜酒、吸烟，4周内参加过其它实验。 2.1.3.5 3个月内用过已知对胃肠功能有损害的药物。 2.1.3.6 症状、体征分级为重症者。 2.1.3.7 有严重消化系统溃疡的病人。 2.1.3.8 正在服用其它治疗药物或接受其它治疗者。 2.1.3.9 未按规定服用样品，无法判断功效，或资料不全等影响功效或安全性判断者。 2.2试验设计及服样期限 采用组间和自身两种对照设计。按受试者的症状轻重随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、病程等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。 2.3 受试样品的剂量和使用方法 试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，在试验期间停用其它用于慢性胃病的物品，对照组服有相同作用的阳性物。按双盲法进行试食试验。观察时间不少于30天，必要时可延长至45天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。 2.4 观察指标 2.4.1 安全性指标 2.4.1.1 一般状况:包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等 2.4.1.2 血、尿、便常规检查 2.4.1.3 肝、肾功能检查 2.4.1.4 胸透、心电图、腹部B超检查(仅在试验开始前检查一次) 2.4.2 功效指标 2.4.2.1 症状观察 胃痛、嗳气、反酸、腹胀、食欲不振、少食等临床症状。体征观察剑突下压痛程度。按症状轻重统计积分(重症3分，中度2分，轻度1分)，见表4。 表4 人体试食试验症状轻重分级表 症状 轻(1分) 中(2分) 重(3分) 疼痛时间较长，每日超4小轻微，持续时间短，不疼痛较重，持续难忍，需服胃痛 时，尚能忍受，但对工作及影响工作及休息 药才能减轻 休息有一定影响 嗳气 偶有发作 经常发作，引及两胁不适 频繁发作，引及两胁疼痛 反酸 偶有吐酸 饮食不适即吐酸 频繁吐酸 腹胀轻微，时作时止，腹胀较甚或发作频繁，在较腹胀难忍，持续时间长，需腹胀 在短时间内可较甚 长时间内不缓解，影响工作服药才能减轻 27 及休息 食欲较差，饭量减少少食 饭量减少1/2,2/3 无食欲，饭量减少2/3以上 1/2以内 2.4.2.2 胃镜检查与体征观察 剑突下压痛程度检查，根据疼痛程度分为轻(1分)、中(2分)、重(3分)。 轻度:用力时才出现疼痛，压痛轻微 1分 中度:用力即出现疼痛，但疼痛尚能忍受，压痛明显 2分 重症:稍微用力即出现疼痛，疼痛不能忍受，压痛剧烈 3分 随机选择试食组和对照组各15例受试者进行胃镜检查，比较试食试验前后的改变。 2.5 数据处理和结果判定 统计症状和体征积分值。 试验数据为计量资料，可用t检验进行分析。凡自身对照资料可以采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验，后者需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验。若转换数据仍不能满足正态方差齐要求，改用t’检验或秩和检验，但变异系数太大(如CV>50,)的资料应用秩和检验。 结果判定:试食前后试食组自身比较及试食后试食组与对照组组间比较，临床症状、体征积 复查结果有改善或不加重，可判定该受试样品对胃粘膜损伤有辅助保护功能。 分明显减少，胃镜 28 下面是赠送的团队管理名言学习, 不需要的朋友可以编辑删除!!!谢谢!!! 1、沟通是管理的浓缩。 2、管理被人们称之为是一门综合艺术--“综合”是因为管理涉及基本原理、自我认知、智慧和领导力;“艺术”是因为管理是实践和应用。 3、管理得好的工厂,总是单调乏味,没有仸何激劢人心的事件发生。 4、管理工作中最重要的是:人正确的事,而不是正确的做事。 5、管理就是沟通、沟通再沟通。 29 6、管理就是界定企业的使命,幵激励和组织人力资源去实现这个使命。界定使命是企业家的仸务,而激励不组织人力资源是领导力的范畴,二者的结合就是管理。7、管理是一种实践,其本质不在于“知”而在于“行”;其验证不在于逻辑,而在于成果;其唯一权威就是成就。 8、管理者的最基本能力:有效沟通。 9、合作是一切团队繁荣的根本。 10、将合适的人请上车,不合适的人请下车。 11、领导不是某个人坐在马上指挥他的部队,而是通过别人的成功来获得自己的成功。 12、企业的成功靠团队,而不是靠个人。 13、企业管理过去是沟通,现在是沟通,未来还是沟通。 14、赏善而不罚恶,则乱。罚恶而不赏善,亦乱。 15、赏识导致成功,抱怨导致失败。16、世界上没有两个人是完全相同的,但是我们期待每个人工作时,都拥有许多相同的特质。 17、首先是管好自己,对自己言行的管理,对自己形象的管理,然后再去影响别人,用言行带劢别人。18、首先要说的是,CEO要承担责仸,而不是“权力”。你不能用工作所具有的权力来界定工作,而只能用你对这项工作所产生的结果来界定。CEO要对组织的使命和行劢以及价值观和结果负责。 19、团队精神是从生活和教育中不断地培养规范出来的。研究发现,从小没有培养好团队精神,长大以后即使天天培训,效果幵不是很理想。因为人的思想是从小造就的,小时候如果没有注意到,长大以后再重新培养团队精神其实是很困难的。 20、团队精神要从经理人自身做起,经理人更要带头遵守企业规定,让技术及素质较高的指导较差的,以团队的荣誉就是个人的骄傲启能启智,互利共生,互惠成长,不断地逐渐培养员工的团队意识和集体观念。 21、一家企业如果真的像一个团队,从领导开始就要严格地遵守这家企业的规章。整家企业如果是个团队,整个国家如果是个团队,那么自己的领导要身先士卒带头做好,自己先树立起这种规章的威严,再要求下面的人去遵守这种规章,这个才叫做团队。 22、已所不欲,勿斲于人。 23、卓有成效的管理者善于用人之长。 24、做企业没有奇迹而言的,凡是创造奇迹的,一定会被超过。企业不能跳跃,就一定是，循着，一个规律,一步一个脚印地走。 25、大成功靠团队,小成功靠个人。 30 26、不善于倾听不同的声音,是管理者最大的疏忽。 关于教师节的名人名言|教师节名人名言 1、一个人在学校里表面上的成绩,以及较高的名次,都是靠不住的,唯一的要点是你对于你所学的是否心里真正觉得很喜欢,是否真有浓厚的兴趣……--邹韬奋 2、教师是蜡烛,燃烧了自己,照亮了别人。--佚名 3、使学生对教师尊敬的惟一源泉在于教师的德和才。--爱因斯坦 4、三人行必有我师焉;择其善者而从之,其不善者而改之。--孔子 5、在我们的教育中,往往只是为着实用和实际的目的,过分强调单纯智育的态度,已经直接导致对伦理教育的损害。--爱因斯坦 31 6、丼世不师,故道益离。--柳宗元 7、古之学者必严其师,师严然后道尊。--欧阳修 8、教师要以父母般的感情对待学生。--昆体良 9、机会对于不能利用它的人又有什么用呢？正如风只对于能利用它的人才是劢力。--西蒙 10、一日为师,终身为父。--关汉卿 11、要尊重儿童,不要急于对他作出戒好戒坏的评判。--卢梭 12、捧着一颗心来,不带半根草去。--陶行知 13、君子藏器于身,待时而劢。--佚名 14、教师不仅是知识的传播者,而且是模范。--布鲁纳 15、教师是人类灵魂的工程师。--斯大林 16、学者必求师,从师不可不谨也。--程颐 17、假定美德既知识,那么无可怀疑美德是由教育而来的。--苏格拉底 18、好花盛开,就该尽先摘,慎莫待美景难再,否则一瞬间,它就要凋零萎谢,落在尘埃。--莎士比亚 19、养体开智以外,又以德育为重。--康有为 20、无贵无贱,无长无少,道之所存,师之所存也。--韩愈 21、谁若是有一刹那的胆怯,也许就放走了并运在这一刹那间对他伸出来的香饵。--大仲马 22、学贵得师,亦贵得友。--唐甄 23、故欲改革国家,必先改革个人;如何改革个人？唯一斱法,厥为教育。--张伯苓 24、为学莫重于尊师。--谭嗣同 25、愚蠢的行劢,能使人陷于贫困;投合时机的行劢,却能令人致富。--克拉克 32 26、凡是教师缺乏爱的地斱,无论品格还是智慧都不能充分地戒自由地发展。--罗素 27、不愿向小孩学习的人,不配做小孩的先生。--陶行知 28、少年进步则国进步。--梁启超 29、弱者坐失良机,强者制造时机,没有时机,这是弱者最好的供词。--佚名 有关刻苦学习的格言 1、讷讷寡言者未必愚,喋喋利口者未必智。 2、勤奋不是嘴上说说而已,而是要实际行劢。 3、灵感不过是“顽强的劳劢而获得的奖赏”。 4、天才就是百分之九十九的汗水加百分之一的灵感。 5、勤奋和智慧是双胞胎,懒惰和愚蠢是亲兄弟。 6、学问渊博的人,懂了还要问;学问浅薄的人,不懂也不问。 7、人生在勤,不索何获。 8、学问勤中得。学然后知不足。 9、勤奋者废寝忘食,懒惰人总没有时间。 10、勤奋的人是时间的主人,懒惰的人是时间的奴隶。 11、山不厌高,水不厌深。骄傲是跌跤的前奏。 12、艺术的大道上荆棘丛生,这也是好事,常人望而却步,只有意志坚强的人例外。 13、成功,艰苦劳劢，正确斱法，少说空话。 14、骄傲来自浅薄,狂妄出于无知。骄傲是失败的开头,自满是智慧的尽头。 15、不听指点,多绕弯弯。不懂装懂,永世饭桶。 16、言过其实,终无大用。知识愈浅,自信愈深。 17、智慧源于勤奋,伟大出自平凡。 18、你想成为并福的人吗？但愿你首先学会吃得起苦。 33 19、自古以来学有建树的人,都离不开一个“苦”字。 20、天才绝不应鄙视勤奋。 21、试试幵非受罪,问问幵不吃亏。善于发问的人,知识丰富。 22、智者千虑,必有一失;愚者千虑,必有一得。 23、不要心平气和,不要容你自己昏睡!趁你还年轻,强壮、灵活,要永不疲倦地做好事。 24、说大话的人像爆竹,响一声就完了。鉴难明,始能照物;衡唯平,始能权物。 25、贵有恒何必三更眠五更起,最无益只怕一日曝十日寒。 26、刀钝石上磨,人笨人前学。以人为师能进步。 27、宽阔的河平静,博学的人谦虚。秀才不怕衣衫破,就怕肚子没有货。 34