【doc】番荔枝种子化学成分研究

【doc】番荔枝种子化学成分研究 番荔枝种子化学成分研究 药学ActaPharmaceuticaSinica1994;29(6)l{{3,448 "q4番荔枝种子化学成分研究 余竞光罗秀珍刘春雨孙兰洪少*马立彬* (中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物资源开发研究所,北京looo94)良釉 提要从番荔枝柳邓哪啪L种子的乙醇提取物分得三个p0】yketide类化合物:squamosmtin— B(I).annonin—VI(II)和dc~acetyluvarlcln(1lI)及胡萝h甙(daucostero1.IV)其中I是一种新的 polyketide,经光谱解析方法,测定丁I的化学结构式和部分碳原子的立体化学. 关键词至;e啊e;ogenin;squam—tin—e寺L叩一,f匕哮 番荔枝血~nosaL.是番荔枝科Annonaeeae植物,一种着名热带水果我国南方的广 东,广西,海南,福建,台湾和云南等省均有栽培1982年Cole"首先从该科紫玉盘属植物u— —n抽础分得一种抗肿瘤活性很强的化合物uvaricin,引起了人们的注意.近1O年来,已报道从 番荔枝科不同植物中分到80多个类似物.这类化台物统称为annona.eouspolyketide或~qriona— eeousacetogenin.实际上这是一类含四氢呋哺环(THF)的长碳链脂肪酸内酯化合物,它们多数 显示细胞毒活性.已报道从A.?中分到13个polykctides,即squamocin,annonin一11,一IV,一一 ? VI,-VIII,X1V,一XVI,neoannonin,squamostatin—A,arlriO~aeirl,annonacin—A,manonastatin和squa- mone. .我国民间有用番荔枝根治疗急性赤痢,精神抑郁症和脊髓骨病;用其果实治疗恶 疮或 作杀寄生虫药剂.作者从广东省产的番荔枝种子的乙醇提取物分得3个polykctidc,即squamos— tatin—B(1),annoninV1(11)和desacetyluvariciri(111),及一种甾醇甙胡萝h甙(dauc~steroliv) (见图1) 化台物1,mpl05,i06"C,[q]+13.5.(c0.14,CHCI3),FAB-MS,m/z639(MH),提示其 分子式为CHO8.1显示arinonaein型的polyketide分子中的不饱和内酯片段的特征信号", uV219.5rim(1og8,3.49),lR中1745(tm(内酯羰基)和3400cm(羟基);HNMR谱中, 不饱和内酯环片段质子信号66.97(1H,d,J=1.4I-Iz,35一H),4.98(1H,qd,J一6.8,1.4Hz, 36一H),1.38(3H,d,J=6.8Hz,37CH3)}CNMR谱中,相应的碳信号为6173.86(s,C一0), 134.24(s,C一2),148.85(d,C一35),77.37(d,C一36)和19.17(q,C一37)(见表1).1的母核碳骨架和 羟基位置可由E1一MS诊断性碎片峰以及其准确质量值确定(见图2和表2) 本文于I993年7月09日收到 .国家自然抖学基金资助项目 "北京微量化学研究所,北京100091 444药学ActaPharmaceuticaSinica1994I29(6)|443~448 R0 \ R0OR/ ,,,\//,,//,甲\厂矗—\//,\,/, 一,n Squsmoststin-B Squamostatin—B Squamostatin—B Squamostatin一^ (1) tetraacetate(1a) tetramesitoate(Ib) (V) R=H R=^c/?e =—c.一 OR=w0H,e —— 蓼Anv.onin-VI(II) ~noninVItriaeetate(IIa) De蛐cetyIuvaricin(1?) De,acetyluvariein4iacetate(Ilia) Rl=OH. Rl-OAc, Rt=I/. Rt=li. R=H R=Ac R=H R=Ac FiglStructure~ofsquamostatin—B.annonin—VIanddesaeetyluvaricin. 卜H:. ?口 . 聃[J'1 Fig2Diagnosticfragmentionsofsquamac~tation—B(I) 化台物i乙酰化后生成四乙酸酯la.HNMR谱中出现四个乙酰基单峰62.05,2.06, 2.09和2,10;1和Ia的3-Ha和3-Hb信号均出现在62.24(2H,bn,7.8)处,提示c一4是非手性 碳,即I式不存在4一OH"'1的CNMR谱有9个C—O一型碳信号,HNMff中有相应的9个 H—c—o一型的质子信号.乙酰化以后,I式中12一H(63.87)和36一H(4.89)的化学位移值变化 不大.H一'HCOSY中,无论I或la式的12一H(63.87,3.83)均不与任何较低场的质子发生偶 合,因此与C—l2相邻的c-11和c-l3均不存在羟基.I式中63.39,3.40,3.58和3.81峰,在乙酰 化后的Ia中,6值移向低场64.82,4.87(4H),因此这四个信号必然是与羟基碳连接的质子(4 ×H—c—oH).I中63.79,3.87(3H)所示的三个质子信号,在乙酰化后的la中只微移至 一 《=]j{ 肿. 豆.一 )I一卜岬蛩 , 一一 \O0 .. PP ,>一 药学ActaPharmaceuticaSinica1994I29(6),443~448445 63.93(3H),因此它们应该是四氢呋哺环除12一H以外的其他三个el-[(15一H,19 一H和24一H)(见 表2).至此,根据EI—MS推导出的结构式与它的NMR信号一致. Fujirnoto报告一个与我们的化合物1的平面式一样的~tid~squarnostatin—A(V)(mp 87,89"C),但v的mp比I(rnplO5,106?)低得多,且未报告V的立体化学情况.我们认为I 与V二者可能是异梅体.为了便于区别,将I命名为sqtmmostafin-B.Squamos~atln —B(I)式中有两 个隔离的THF环.有关THF单元的立体化学可以采用Cassady方法确定.即在C6D6中测定 其莱酸酯(mesitoate)Ib的HNMR谱,然后与模型化合物作比较在Ib中,THF(A)环的12一H, 15-H和16一H有三组峰,63.93,4.O7和5.34;THF(B)环的19一H,20一H,23一H和24一H则有四组 峰,65.54,4.11,403和5.29.这些数据表明THF(A)环的12一H和15一H为(反式)构型; 15一H和l6H为0w*o(苏式).THF(B)环的2O.H和23一H亦为打口结合;但由于HNMR数据无 法准确确定B环两侧的构型,当19.H和20一H一侧定为鲫m(赤式),则另一侧23一H和24一H则 为埔(苏式).反之亦然(见图l和表2). Tab2ExactmassmeasurementaJldelementalcompositionofsqummosmUn—B(1) 药学AcPharmaceuticaSinica1994;29(6)'443,448 化合物II,mp77,78?,[a]+14.2(co.23.CHCI3),FAB-MSm/z623(MH).化合物 III,mp65,67?,FAB-MSm,z607(MH).显然后者的M比前者少一个氧原子(16质量单 位).在El—MS的碎片峰中也有相似的情况,I?的部分碎片峰常比I】步16质量单位.lI和III的 NMR谱十分相似.差异较大之处在C一3和C一4的6值,I1分别为 33.30(t),69.95(d);II1分别为 25.16(t),23,38(t)二者乙酰化以后,IIa有三个乙酰氧基单峰52.02,2.05,2.07;IIIa只 有 两个62.05,2.08.ILa的3-Ha和3-Hb信号分别为62.5J(ddt)和2.56(ddt),而IILa的 3-Ha和3一 Hb同为2.26(brt)上述数据表明二者差别在于II有4一OH,而II】没有4一OH 至此鉴定II为 annonin—VI,III为desacetyluvaricin.它们均属于bistetrahydrofuran环系的 polyketide.两个相 邻的THF部分的立体构型,从C一15至C一24应为threo,打御8,aa.eo,~rans和 "" 此外,还分得一个谷甾醇葡萄糖甙,即胡萝甙(daucosterol,IV) Tab3'C(12~MHz)andH(~OOMHa)NMRdataofatmo'nin—VI(?) desacetyluvaricin(II1)andtheiracetatesIIaandIllaimCDC]I I74.59sI73.9Is一一一一 I3117sI34.339一一一一 3330t25.16t2.39dbrd(I4,82)226[【(7.7,1.)2.51ddt(14.80.12)2.26brt(77) 2.52tim(1{)2.56ddt(14.43.I8) 69.95d22,38t3.84m1.26,1.65m5.IOdddd(80.75,4.8,4.3)I.2B,I.65m 74.IId74.09d3.39m3.39m486ddd(8.0,56,4.2)486dddC80,56,4.2) 82.80d82.79d3.84m3.85m39B/it3.97/it 28.37t2837tI.6O,I.96mI.63,197m165.I.95mI65.1.95m 28.97t2897tI.60,1.96m1.63,197m165.I.95mI.65,1.95m 82.50d8249d3.92m3.92m380t(5.8)3.80t(5.8) 82.27d82.23d3.84m3.85m3.80t(5.8)380t(5.8) 28.93t28.80t1.60,196mI63,1.97mI65,I.95mI.65.I.95/it 28.37t28.37t1.60,196mI.63,1.97m166.1.95/it1.65.195/it 83.28d83.22m3.92m3.92m3.96m397m 7I_27d71.3Id3.84m3.86m4.9Iddd(8.0,5.6.4.2){91ddd(e.0,5.6.4.2) 14.09ql4.1lq0.87t(7O)0.87t(6.9)0.87t(6.7)087t(6.9) 15177dI48.83d7.18d(1)6.98d(1.)7.08d(I.4)699d(I.4) 77.94d77.39d5.03qd(68,I.4)4.99qd(6.8,1.4)5.Olqd(6.8,14)4.99qd(6.8.I4) 19.10ql9.2lqI40d(68)I.40d(6.8)1.39d(6.8)140d(6.8) 2.O2 2.0532053 2.07日2.083 Accordingto.H-CotH一.HCOSy. "Theassignmenmareinterchangeable 实验部分 熔点用Fisher—Johns熔点仪测定,温度未校正.比旋度用Perkin—Elmer241型旋光仪测定 uV谱甩PhillipsPyeUnicam8800~仪测定IR谱用Perkin—Elmer983G型仪测定.NMR谱用 BrukerAM一500型仪测定MS用MAT71l型质谱仪测定TLC和柱层析用硅胶均为青岛海洋化 工厂产品. 0 c雩轴"坞加虬跎?弘;;{号 药学ActaPharmaceutieaSinica1994}29(8)l443,4拍447 提取分离 番荔枝种子1.2ks破碎后以石油醚(30--60"C)脱脂,然后用95EtOH渗漉得到棕色膏 状物127g,再以CHCA转溶得到可溶性部分38g,将其进行硅胶柱层析,以CHCIa--McOH洗 脱,逐渐增大MeOH的用量极性较小的洗脱液部分,以制备性TLC分离,己烷一EtoAc(60: 40),得到化合物III12mg.从中等极性部分得到化合物II400nag和I300mg.从极性较 大部分 析出化合物IV56mg.. 鉴定 化合物I白色结晶,mp105,106C,[a+13.5.<co.14,CHC1a),FAB-MSm/z639 (MH).UVk219.5nm(1oge3.49).IR(KBr)em一:3400,1745,1654,l470,l325,1065, 1033,970,880.'HNMR(CDC13,500MHz)和"CNMR(CDCI3,125MHz)数据见表1,EI —MS见图2. 化合物I乙酸酯(Ia)制备用Aco—csHsN法常规制取,HNMR数据见表i. 化合物I莱酸酯Ib制备取I4mg,加入对二甲胺基吡啶2mg,2,4,6-三甲基苯甲酰氯 20 mg和干燥CHChlml,室温反应2d.依次用5Na2CO3,5HCl和H20洗涤,无水Na:SO 干 燥.硅胶TLC分离,己烷--EtOAc(7030),得到相应的衍生物莱酸酯Ib4mg.tHNMR数 据见表 1. 化合物II白色结晶,mp77,78?,[+14.2.(c0.23,CHC13).FABMSm/z623 (MH),645(M+Na).EI—MSm/z():45l(1),433(10),415(18),397(5),381(4),363(46), 345(22),311(100),293(19),275(6),24l(6),223(3),205(4),14l(9).uv219.5Ylm(1og, 3.69).IR'(KBr)cm,:3420,1745,1642,l470,1325,l080,1030,965,920.HNMR和CNMR 数据见表3. 化合物II乙酸酯(IIa)制备用Aco—HsN法常规制取,HNMR数据见表3. 化合物III白色结晶,mp65,67?,FAB-MSm/z607(MH).El-MSre~z():435(1), 417(7),399(i6),365(4),347(53),329(11),31l(4),295(100),273(7),267(4),24l(7),223 (7),11l(8),83(15).uVM,,c220rim(toge3.38).IR(KBr)c:3420,1740,1650,1462,1320, 1075,950,878.H和CNMR数据见表3.乙酸酯IIla制备同上,'HNMR数据见表3. 胡萝甙(IV)mp275,290?,(dec),与品的混合熔点不下降,IR亦与标准品图谱 一 致.IR(KBr)em,:3410,1633,1460,1380,1365,1075,1022. 数谢植物学名由本所连文琐教授鉴定.本所分析室代测紫外和红外光谱.军事医学 科学院测试中心,医 学科学院生物技术所代溯质谱 参考文献 1JoladSD,eta1.Uvaricin,anewantitumoragentfromUvtrria?mmfAnnonaceae).dOr9 Chem1982i47=3151. 2YuJG?eta1.Squam~tatin—B,anewpolyketidefrom珥桃m删.(a1993;ll 423. 3吴征镒主编新华本草纲要.第一册.上海科技出版社,1988,70. 4XuL,eta1.Chemistryandselectivecytotoxityofannonacin一10一 Olle,isoannonacin,andiso- annonacin一10一one?Novelpolyketidefrom堋0d鲫加 (Annonacease).JOrgChem1989|54: 54l8 5FujlmotoY,eta1.Squamostatin— A:unprecedentedhis--tetrahydrofuranacctogeninfromm?? 448药学;~ctaPharmaceuticaSinica1994I29(6)l443~448 唧.m1990;Ill535.? 6YuJGeta1.CytotoxicpolyketidesfromAmuma如珊r删 (Annonaceae):10.13-0"am-13,14一tkreo- densicoMaacin,l0.13-~rans-13,14一erythro—densicorrmcinand8一 hydroxyannonacin.JOr9Chem l992I576198. 7Gale??n.Stereocherrti~ryofmono— tetrahydrofuranylmoietyincytotoxicpolyketides.Part A:Synthesisofmodelcompounds.PartB:ApplicationofprotonchemicalshiftImtmrns.T~r ahe- 5847.5851. 1993II? 8BornL,eta1.TherelativeconfigurationofacetogeninsisoMtedfromAamna~ruauu,saann onin—I (squamocin)andannonin—VI.P/anmMed1990;5BI312., 9JoiadSD,eta1.Desacetyluvarieinfrom口wdc?础configurationofuvarieinatc.36.J Na~1985,48z544. 10HoyeTR.eta1.VariationoftheHNMRchemicalshiftmethodfordeterminationofstereo- chemistryinthebis-tetrahydrofuranylmoietyofuvariein— relatedacetogeninsfromAnnonacease: rolliniastatin一1(andasimiein).JOr9C%em1988,53z5578. sTUDIESONTHECHEMICALCONSTITUENTS OFANNONASQUAMOSASEED JGYu,XZLuo,CYLiu.LSun.SLHongandLBMa (ofMedicinalPlant却m,ClweseA蜘MedicalSciences 蜘MedicalCollege,&油100094) ABSTRACTAneWpolyketide,squamostatin—B(I),twoknownpolyketides,annonin— VI(II) anddesacetyluvaricin(III),anddaucosterol(IV)havebeenisolatedfrom~an0nasqnan~aL. (Annonaceae).Thestructureandrelativestereoehemistryof1wereelucidatedollthebasisofs pectral analysisofIanditsacetate(Ia)andmesitoate(Ib). KeywordsAnsosa唧;Polyketide;Aeetogenin;Aquamostatin—B;Annonin— VI}Desacety luvaricin. .k|姗InstituteofMierochemistry,Beijing100091